精品推薦 | 僅需5min！高效完成反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)
Hifair??AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit是基于Hifair??III 1st Strand cDNA Synthesis Kit開發(fā)的快速逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，適用于PCR擴(kuò)增以及RT-qPCR實(shí)驗(yàn)。與Hifair??III 1st Strand cDNA Synthesis Kit相比，具有穩(wěn)定的檢出率、特異性、產(chǎn)量保證，且反轉(zhuǎn)錄總時(shí)長(zhǎng)最快可低于6分鐘，大大縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
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產(chǎn)品名稱
Hifair??AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit
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產(chǎn)品特點(diǎn)
※快速反轉(zhuǎn)：最快5分鐘左右即可完成第一鏈cDNA合成；
※檢出率高：10 pg-1 ug的RNA檢出率；
※高效合成：合成效率媲美進(jìn)口，最長(zhǎng)可合成14kb大小的片段；
※應(yīng)用廣泛：可用于下游PCR或qPCR，亦可調(diào)整引物保證small RNA等樣本的反轉(zhuǎn)錄；
※示蹤便利：示蹤版包含無干擾、可視化藍(lán)色示蹤染料，提醒加樣進(jìn)度；
※穩(wěn)定性好：試劑盒可4℃存放14天，反轉(zhuǎn)產(chǎn)物可37℃保存7天，反復(fù)凍融50次。
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性能展示
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快速反轉(zhuǎn)
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圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，不同反轉(zhuǎn)錄時(shí)間處理的Ct值差值在0.2之內(nèi)。說明產(chǎn)品可在5分鐘內(nèi)完成反轉(zhuǎn)錄，反轉(zhuǎn)效果和長(zhǎng)時(shí)間反轉(zhuǎn)效果持平。
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靈敏度高，最低可至10 pg
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圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，RNA 投入量為10 pg-1 μg時(shí)，11149ES均可反轉(zhuǎn)成功，保證定量結(jié)果。
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擴(kuò)增性能好，最長(zhǎng)擴(kuò)增14 kb片段
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圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，將得到的cDNA進(jìn)行PCR檢測(cè)。結(jié)果顯示，11149ES能夠滿足合成1 kb-14 kb長(zhǎng)度的cDNA, 后續(xù)PCR有一定的試用場(chǎng)景。若需要直接反轉(zhuǎn)出10kb以上的片段，建議延長(zhǎng)反轉(zhuǎn)錄時(shí)間至20-30分鐘，以保證最終片段的獲取。
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示蹤便利
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圖. 測(cè)試顯示，加入一定量的示蹤劑成分，未影響產(chǎn)品的反轉(zhuǎn)錄效率，Ct值、熔解曲線峰值和TM值未受到負(fù)面影響。
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穩(wěn)定性好
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圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用-20℃、4℃、25℃、37℃下分別儲(chǔ)存1、3、5、7天的11149ES進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，對(duì)得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，不同溫度不同時(shí)間存放的試劑盒定量結(jié)果的△Ct均在0.3范圍內(nèi)（△Ct于±0.5以內(nèi)，認(rèn)為兩者差異可忽略不計(jì)），具有良好的穩(wěn)定性。
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反轉(zhuǎn)錄效率比對(duì)
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圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES、進(jìn)口A品牌進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，其中11149ES不進(jìn)行g(shù)DNA去除步驟，將得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，進(jìn)口A品牌反轉(zhuǎn)時(shí)間為13分鐘， 11149ES反轉(zhuǎn)時(shí)間為5分鐘，不同產(chǎn)物定量顯示，11149ES的Ct更小或者接近進(jìn)口競(jìng)品，說明11149ES 5分鐘反轉(zhuǎn)效率優(yōu)于或近似進(jìn)口A品牌的反轉(zhuǎn)錄效率。
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圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES、進(jìn)口B品牌進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，其中11149ES不進(jìn)行g(shù)DNA去除步驟，得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，進(jìn)口B品牌反轉(zhuǎn)時(shí)間為20分鐘，11149ES反轉(zhuǎn)時(shí)間為5分鐘，不同量底物定量顯示，11149ES的Ct更小或者接近進(jìn)口B品牌，說明11149ES 5分鐘反轉(zhuǎn)效率優(yōu)于或近似進(jìn)口B品牌的反轉(zhuǎn)錄效率。
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客戶反饋體驗(yàn)
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樣本來源：菊花葉片
客戶評(píng)價(jià)：與某進(jìn)口品牌效果相似，擴(kuò)增常規(guī)大小的片段效果不錯(cuò)。
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樣本來源：果*葉片
客戶評(píng)價(jià)：藍(lán)色很好看
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樣本來源：水稻
客戶評(píng)價(jià)：與其他反轉(zhuǎn)錄試劑盒相比，節(jié)省加樣時(shí)間，節(jié)省反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)時(shí)間（其他試劑盒需要15+2 min，本試劑盒只需5 min），后續(xù)基因克隆DNA電泳結(jié)果證明，本試劑盒反轉(zhuǎn)效率更高，條帶更亮，所以會(huì)更節(jié)省PCR使用試劑，節(jié)省成本。
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