T4 DNA連接酶指南-技術前沿-資訊-生物在線

T4 DNA連接酶指南

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2024-11-29T00:00 (訪問量:55178)

T4 DNA連接酶(T4 DNA Ligase)是一種由T4噬菌體編碼的酶,以ATP作為輔因子,催化雙鏈DNA或RNA的5’-磷酸與3’-羥基之間形成磷酸二酯鍵。該酶既能催化黏性末端分子間或平末端分子間的連接,也能修復雙鏈DNA或DNA-RNA雜交雙鏈上的單鏈DNA切口,廣泛用于NGS測序,分子克隆等應用。

圖1.T4 DNA Ligase反應原理圖

 

多年來,翌圣生物始終致力于生命科學試劑的研發與創新,特別是在分子酶領域,憑借深厚的專業積淀和技術實力,在該領域取得了顯著成績,為廣大的生命科學研究者提供了可靠且高效的分子酶產品。依托翌圣鎂孚泰生物ZymeEditor™酶改造平臺(了解更多)定向篩選出一系列性能卓越的分子酶原料,提供耐高溫、高靈敏、缺失腺化功能等多個方向的T4 DNA 連接酶產品,面向科研、診斷等多個應用場景,打造全網最全面的T4 DNA連接酶系列產品供應商。

 

表1.翌圣T4 DNA Ligase系列產品

產品特性

產品名稱

貨號

主要應用

耐高溫、低自連

Hieff® Versatile T4 DNA Ligase (600 U/μL) 

12996ES

特別適合對酶穩定性要求高的NGS建庫場景

兼容多樣本、

超低殘留

Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL)

10299ES

特別適合病原檢測,NIPT檢測等。

超高靈敏度

Novel T4 DNA Ligase (400 U/µL)

10298ES

特別適合cfDNA樣本的NGS建庫

超低接頭自連

 

14960ES

NGS建庫過程中DNA片段和5’預腺苷酰酸化接頭的連接

常規款

Quick T4 DNA Ligase (400 U/µL)

10301ES

分子克?。籒GS建庫接頭連接

Hieff® Gold T4 DNA Ligase (5 U/µL)

10300ES

分子克??;線性DNA的自環化

 

T4 DNA Ligase 產品介紹01

Hieff® Versatile T4 DNA Ligase (600 U/μL) (Cat#12996ES)

依托翌圣鎂孚泰生物的ZymeEditor™酶改造平臺對野生型T4 DNA連接酶進行改造,得到一種在連接效率、接頭自連以及熱穩定性上均遠優于傳統野生型T4 DNA Ligase,可催化黏性末端或平末端分子間的連接反應,應用于NGS建庫中的DNA片段與接頭連接。該產品已經通過高通量測序驗證,質量優異,貨架期更持久!

數據展示

圖2.42℃熱穩定性測試

 

將翌圣生物的Hieff® Versatile T4 DNA Ligase與品牌N*、品牌A* 、品牌T*以及品牌Q*的T4 DNA連接酶進行42℃下0、2 、4 h的熱處理。接著,使用翌圣生物DNA建庫試劑盒(Cat#12927ES)、投入1 µg斷裂的牛gDNA來構建全基因組DNA庫。

 

結果表明:翌圣生物的Hieff® Versatile T4 DNA Ligase的熱穩定性優于品牌N*、品牌A* 、品牌T*、品牌Q*。

 

更多數據詳情點擊:https://www.yeasen.com/news/detail/1716

 

02

Hieff® Versatile T4 DNA Ligase (600 U/μL) (Cat#12996ES)

翌圣針對NGS建庫過程中DNA片段和接頭連接專門開發了Fast T4 DNA連接酶,該酶具有高效的連接能力,不僅連接速度快,而且兼容各類樣本,對于復雜結構核酸片段的連接更顯優勢。目前已經過大量客戶的高通量測序驗證,對于華大平臺的Bubble接頭的連接,也能得到穩定的測序質量。

 

數據展示

表2.不同種類樣本文庫產量

 

使用腸道微生物、cfDNA和FFPE HD200 gDNA三種樣本構建NGS文庫,以此檢驗翌圣Fast T4 DNA Ligase與品牌N*的建庫能力。

 

結果表明:翌圣生物的Fast T4 DNA Ligase在不同樣本類型的文庫構建中均展現出了更高的效率和產量。

更多數據詳情點擊:https://www.yeasen.com/news/detail/741

 

03

Novel T4 DNA Ligase (400 U/µL)(Cat#10298ES)

依托翌圣鎂孚泰生物的ZymeEditor™酶改造平臺對野生型T4 DNA連接酶進行改造,將T4 DNA Ligase的有效催化活性結構域通過多輪突變篩選,得到一種連接活性更強的突變體。采用高純度的生產標準和嚴格的質量檢測,有效去除核酸酶、切口酶的殘留,連接時間只需15min,成功打造一款快速高效的DNA連接酶—Novel T4 DNA Ligase (400 U/µL)(Cat#10298ES)。

 

數據展示

圖3.雙端均連接接頭檢測

 

使用翌圣生物和競品的Novel T4 DNA Ligase進行 cfDNA樣本的NGS文庫構建測試(連接Y型建庫接頭),通過Agilent 2100檢測雙端均連接接頭的片段比例。

 

結果表明:翌圣生物的Fast T4 DNA Ligase具有極高的連接活性,完美適配cfDNA樣本。

 

更多數據詳情點擊:https://www.yeasen.com/news/detail/203

 

04

Hieff® 5'App T4 DNA Ligase (2000 U/µL)(Cat#14960ES)

依托翌圣鎂孚泰ZymeEditor™酶改造平臺,對野生型T4 DNA Ligase進行定向改造獲得Hieff® 5' App T4 DNA Ligase,該產品只能以預苷化接頭為底物進行接頭連接,能顯著減少片段自連,提高文庫轉化率。

數據展示

圖4.連接效率檢測圖

 

以100ng 170bp和300bp的模式片段為底物,使用翌圣Hieff® 5' App T4 DNA Ligase對合成的預腺苷化(App)接頭進行接頭連接,結果顯示連接效率達95%以上,且片段自連占比極低。

 

結果表明翌圣生物的Hieff® 5'App T4 DNA Ligase具有極高的連接效率和極低的自連。

 

更多數據詳情點擊: https://www.yeasen.com/news/detail/1350

 

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