NMT是基因功能的活體檢測技術，已被103位諾貝爾獎得主所在單位，及北大、清華、中科院使用。
期刊：Genes
主題：鹽脅迫下鉀轉運體LrKUP8抑制K+外排
標題：Potassium Transporter LrKUP8 Is Essential for K+Preservation in Lycium ruthenicum, A Salt-Resistant Desert Shrub
影響因子：3.331
檢測指標：K+流速
檢測樣品：黒枸杞愈傷組織
K+流實驗處理方法：
有/無300 mM NaCl培養12h
K+流實驗測試液成份：
0.5 mM KCl, 0.5 mM NaCl, 0.1mM MgCl2, 0.2 mM CaCl2, 2.5% sucrose，pH 5.7
作者：北京林業大學陳金煥、戴逢斌
英文摘要
Salt stress is a major constraint for many crops and trees. A wild species of Goji named Lycium ruthenicum is an important economic halophyte in China and has an extremely high tolerance to salinity. L. ruthenicum grows in saline soil and is known as a potash-rich species.
However, its salt adaptation strategies and ion balance mechanism remains poorly understood. Potassium (K+) is one of the essential macronutrients for plant growth and development. In this study, a putative salt stress-responsive gene encoding a HAK (high-affinity K+)/KUP (K+ uptake)/KT (K+ transporter) transporter was cloned and designated as LrKUP8.
This gene belongs to the cluster II group of the KT/HAK/KUP family. The expression of LrKUP8 was strongly induced under high NaCl concentrations. The OE-LrKUP8 calli grew significantly better than the vector control calli under salt stress conditions. Further estimation by ion content and micro-electrode ion flux indicated a relative weaker K+ efflux in the OE-LrKUP8 calli than in the control.
Thus, a key gene involved in K+ uptake under salt condition was functionally characterized using a newly established L. ruthenicum callus transformation system. The importance of K+ regulation in L. ruthenicum under salt tolerance was highlighted.
中文摘要（谷歌機翻）
鹽脅迫是許多農作物和樹木的主要限制因素。枸杞的一種野生種，稱為枸杞，是中國重要的經濟鹽生植物，對鹽分的耐受性極高。ruthenicum生長在鹽漬土壤中，被稱為富含鉀肥的物種。
然而，其鹽適應策略和離子平衡機制仍然知之甚少。鉀（K+）是植物生長和發育必不可少的大量營養素之一。在這項研究中，克隆了編碼HAK（高親和力K+）/ KUP（K+攝取）/ KT（K+轉運蛋白）轉運蛋白的假定鹽脅迫響應基因，并將其命名為LrKUP8。
該基因屬于KT / HAK / KUP家族的II類。在高NaCl濃度下強烈誘導LrKUP8的表達。在鹽脅迫條件下，OE-LrKUP8愈傷組織的生長明顯好于載體對照的愈傷組織。通過離子含量和微電極離子通量的進一步估計表明，與對照相比，OE-LrKUP8愈傷組織中的K+外排相對較弱。
因此，使用新建立的黑麥草愈傷組織轉化系統對在鹽條件下參與鉀離子吸收的關鍵基因進行了功能鑒定。強調了在耐鹽性條件下釕中的K+調節的重要性。
結果表明：LrKUP8抑制了愈傷組織中K+外排。不存在NaCl脅迫時，兩種愈傷組織的K+外排速率較小，且無顯著差異。經鹽脅迫后，K+外排速率遠高于無脅迫組；對照組（pBI121）的K+外排速率明顯高于過表達組（OE-LrKUP8）。過表達組由于其更強的保K+能力，因而維持高的K+/Na+比。保持最優的K+/Na+比是植物耐鹽性的關鍵特征之一，證明LrKUP8的保K+能力促進了黒枸杞在鹽脅迫下的生長發育。
文章鏈接：
https://www.mdpi.com/2073-4425/10/8/600