HUVEC（人臍靜脈內皮細胞）是研究血管生成的核心模型細胞，其高增殖能力和成管特性可模擬腫瘤血管新生過程。通過將HUVEC接種于基質膠（模擬基底膜微環境），細胞可在體外形成復雜的三維管狀網絡結構，廣泛用于：
? 抗血管生成藥物篩選
? 腫瘤微環境機制研究
? 血管生成相關基因/信號通路驗證
PART.02
實驗步驟
實驗前一天將Ceturegel®基質膠置于冰盒中，放入 4℃冰箱，使膠能過夜緩慢融化。
開始實驗前，將Ceturegel®基質膠始終保持放在冰盒中。
準備24孔板，于每孔中加入100µL - 150µL Ceturegel®基質膠，避免產生氣泡。在37℃培養箱中放置30 min - 1 h。（注意槍頭要垂直于內孔的正上方加入 Ceturegel®基質膠，防止有孔壁殘留基質膠。若是孔的底部沒有鋪滿膠，可以晃動一下孔板，使底部鋪膠均勻）。
當HUVEC細胞長滿70 ~ 80%時，消化下來，并用含10%FBS的DMEM重懸，計數，使每孔加入1.2×105細胞/孔，重復三孔。
37℃培養箱孵育，每4 h觀察1次，4 - 18 h可見血管生成。
小心的移除上孔內培養基，注意不要碰到膠或者細胞網絡。加入Calcein染料進行染色。
結果觀察。
PART.03
實驗結果
圖.血管生成結果及染色圖
PART.04
常見問題及解答
為什么我的成管實驗中細胞 不能形成連續的網格？
QA
①建議使用3-5代狀態較好且融合度70%-80%的HUVEC細胞進行成管試驗，此時細胞成管能力比較強。
②超過15代HUVEC細胞成管能力明顯降低。
③細胞數量過少會使細胞無法形成連續的網絡。
成管實驗到底需要幾個小時？
QA
成管時間與細胞狀態密切相關。細胞狀態好時成管時間短。建議第一次實驗時，每4個小時觀察一次。
PART.05
產品推薦
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產品名稱 |
貨號 |
規格 |
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40186ES |
1.5 mL/5 mL/10 mL |
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40130ES |
50 mL/500 mL |
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40719ES |
1×50μg/2×50μg |
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41406ES |
500 mL |