在生物制品生產(chǎn)過程中，會伴隨宿主細胞雜質殘留。其中宿主殘留DNA可能會引發(fā)潛在的安全問題（如潛在致瘤性、傳染性，甚至增加免疫源性或導致突變），所以相關的法律法規(guī)相繼出臺以對生物制品中外源宿主DNA殘留量進行嚴格把控。藥監(jiān)局規(guī)定，細胞表達產(chǎn)物的最終產(chǎn)品中殘留DNA含量應盡可能低?！吨腥A人民共和國藥典》2020年版第三部規(guī)定，外源性DNA殘留檢測采用DNA探針雜交法、熒光染色法和定量PCR法。前2種傳統(tǒng)方法存在序列特異性低、靈敏度低、重現(xiàn)性差、通量低、耗時長等缺點，不利于精確控制生物制品中DNA殘留量。
翌圣生物基于熒光探針qPCR原理，研發(fā)了包括CHO、HEK293、E.coli、Vero、Human、MDCK、漢遜酵母、畢赤酵母等一系列快速專一的宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒。最近，全新推出的HEK293宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒(3G) (41331ES)和CHO宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒(3G) (41332ES)，可檢測低至幾十bp高豐度殘留DNA片段，定量下限(LLOQ)亦可低至fg/μL。其中，CHO宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒(3G) 1h內即可完成qPCR反應，檢測下限(LLOD)為0.05fg/μL。
產(chǎn)品優(yōu)勢
靈敏度高：基于熒光探針qPCR方法開發(fā)，LLOD低至0.05fg/µL；
準確性高：樣本加標回收率在70%~130%范圍內；
專屬性強：與無關DNA無交叉反應，減少檢測的假陽性；
符合法規(guī)：按照Chp、USP、ICHQ2(R1)等要求進行全面驗證，性能符合中外法規(guī)標準；
配合審計：產(chǎn)品生產(chǎn)符合ISO13485質量體系標準，有完善的審計文件;
保障品質：試劑盒原材料全自主研發(fā)，qPCR Mix等酶產(chǎn)品在超潔凈酶工廠生產(chǎn)。
產(chǎn)品數(shù)據(jù)
高靈敏度：LLOQ低至0.3fg/μL，LLOD低至0.05fg/µL
1.CHO宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒（3G）線性范圍為：3fg/μL~300pg/μL，R2=1，擴增效率為99.29%，各濃度檢測值CV<15%。
2.檢測標曲最低濃度點3fg/uL及以下濃度的CHO DNA (3G)，每個濃度10個重復。結果顯示，在0.3fg/uL及以上濃度，CV<20%，即CHO宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒(3G)的定量限為0.3fg/uL。
3.檢測定量限0.3fg/μL及以下濃度的CHO DNA (3G)，每個濃度20個重復。結果顯示，在0.05fg/μL及以上濃度20個重復孔的檢出率≥19（即檢出率≥95%），即CHO宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒(3G)檢測限可達0.05fg/μL。
高特異性：與其他宿主細胞DNA無交叉反應
評估與CHO DNA (3G)親緣性較高的小鼠物種基因組DNA以及生物制品生產(chǎn)中常用的細胞基因組DNA對CHO DNA檢測試劑的干擾，干擾組與對照組擴增曲線重合，未見干擾（下圖依次為Mouse、HEK293和E.coli基因組DNA對CHO DNA檢測試劑的干擾數(shù)據(jù)）。
產(chǎn)品信息
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產(chǎn)品 |
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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樣本前處理 |
18461ES |
MolPure® Magnetic Residual DNA Sample Preparation Kit磁珠法殘留DNA樣本前處理試劑盒(瓶裝) |
25T/100T |
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18467ES |
MolPure® Mag48 Sample Preparation Kit FN 磁珠法48孔樣本前處理試劑盒FN（預封裝) |
3×16T/ 6×16T |
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核酸提取儀器 |
80511ES |
48通道自動化核酸提取儀 |
48通量 |
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殘留DNA檢測 |
41331ES |
HEK293 Host Cell DNA Residue Detection Kit (3G) HEK293宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒(3G) |
50T/100T |
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41332ES |
CHO Host Cell DNA Residue Detection Kit (3G) CHO宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒(3G) |
50T/100T |
相關產(chǎn)品
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宿主細胞殘留核酸檢測 |
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品名 |
貨號 |
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Vero宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒（2G） |
41307ES |
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E.coli宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒（2G） |
41308ES |
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漢遜酵母宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒 |
41317ES |
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MDCK宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒 |
41319ES |
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質粒DNA殘留檢測試劑盒 |
41323ES |
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Human宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒 |
41325ES |
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畢赤酵母宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒 |
41328ES |
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Vero宿主細胞殘留DNA片段分析試劑盒 |
41314ES |
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HEK293宿主細胞殘留DNA片段分析試劑盒 |
41316ES |
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Human宿主細胞殘留DNA片段分析試劑盒 |
41326ES |
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E.coli宿主細胞RNA殘留檢測試劑盒 |
41318ES |