?Peptide Hydrogel Suitable for 3D Cell Culture
——3D多肽水凝膠完美超越基質膠(matrigel)
Yeasen多肽水凝膠產品是由一種由16個氨基酸組成的多肽,在鹽離子存在情況下自發組裝成的水凝膠支架結構。多肽的大小通常在5nm左右,是親水性和疏水性氨基酸殘基交替排列組成的兩性分子肽段,能形成折疊片結構,并自組裝形成納米纖維,這些納米纖維相互交織在一起形成基質并進一步形成含水量超過99.5%的水凝膠支架(見圖1)。
Yeasen多肽水凝膠無需通過調節聚合物和交聯劑的量來獲得不同類型的水凝膠。組分單一,受環境影響小,針對不同類型細胞配有不同類型水凝膠產品,可直接進行挑選使用。

圖1:圖示為兩性多肽通過自組裝形成水凝膠的過程。
3D多肽水凝膠的特點:
還原體內外壞境,給細胞更真實的感覺——Yeasen水凝膠系列產品在適當條件下,可自組裝成平均孔徑為50~200nm的纖維狀結構,形成與天然細胞外基質(ECM)相似的網狀立體結構,能夠為細胞的粘附、遷移、增殖和分化提供更接近體內的外環境。
組分明確,無動物異源蛋白和病原體——Yeasen水凝膠系列產品是一種人工合成的多肽類生物納米材料,由1%(w/v)的合成多肽及99%的水組成,無需通過腫瘤分離,能有效避免因動物異源蛋白和病原體污染造成的細胞生長抑制等其他不利影響。
操作簡單,觀察方便——可以直接用熒光染料和免疫試劑對培養在3D水凝膠中的細胞的進行標記,Yeasen水凝膠產品外觀呈透明狀,可用共聚焦顯微鏡或其它顯像技術獲得清晰的細胞形態圖像。Yeasen多肽水凝膠4度保存,可室溫操作。
3D細胞培養水凝膠功能:
(1)適合大多數種類細胞的培養。
(2)促進細胞的分化,例如,肝前體細胞、大鼠PC12細胞、心肌細胞、海馬神經元細胞及內皮細胞等;
(3)增強原代細胞貼壁能力,如神經元細胞、成纖維細胞及角化細胞等;
(4)增強轉染細胞系的貼壁能力,如MG-63、SH-SY5Y、HEK-293及NIH3T3等。
3D細胞培養水凝膠(Hydrogel)與基質膠(Matrigel)對比
|
? |
3D細胞培養水凝膠(Hydrogel) |
基質膠(Matrigel) |
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生產方式 |
人工合成 |
EHS小鼠腫瘤中分離 |
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主要成分 |
1%(w/v)的合成多肽+99%的水 |
主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,巢蛋白,硫酸肝素糖蛋白等,還包含生長因子和基質金屬蛋白酶等 |
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外觀 |
透明 |
淡黃色到深紅色(含酚紅) |
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批次差異性 |
穩定 |
批次濃度差異性大 |
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儲存 |
2-8℃ |
-20℃,使用時需要過夜融化 |
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運輸 |
冰袋 |
干冰 |
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適用實驗類型 |
促進增殖和分化;促進原代細胞貼壁和增殖;支持轉染細胞的增長;干細胞增殖,腫瘤細胞遷移/侵襲 |
細胞生長、分化,形態研究,細胞化學功能,細胞遷移/侵襲,細胞基因/蛋白表達,裸鼠成瘤 |
|
使用濃度 |
0.1%-1% |
根據實驗目的稀釋(1:3或原液) |
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操作注意事項 |
室溫;避免引入鹽離子,用無菌蔗糖或去離子水稀釋 |
嚴格低溫:實驗涉及的液體、耗材需提前預冷 |
【注】如用于血管生成實驗,請購買高濃度基質膠(貨號:354248)
簡便的操作流程:

1)水凝膠原液水浴超聲(或渦旋振蕩)30 min,離心去除氣泡;
2)用20%無菌蔗糖稀釋超聲后的水凝膠至需要的濃度;
3)消化收集細胞,離心去除培養基;
4)用10%無菌蔗糖重懸細胞至需要的濃度;
5)取等體積(1:1)稀釋的水凝膠和細胞懸液迅速混勻;
6)迅速(2 min內)將上述水凝膠和細胞混合物轉移至細胞培養板等;
7)緩慢加入細胞培養基,30 min內更換2次培養基;
8)30~60 min即可成膠。
實例展示:
1)用于成人骨髓間充質干細胞的培養(Cat No. 40134ES)
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地 址: 上海市浦東新區天雄路166弄一號樓三層南單元 聯系人: 李自轉 電 話: 400-6111-883、021-34615995-8075 傳 真: 021-34615995-188 Email:lizizhuan@yeasen.com
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