針對皮膚組織的構成特點，我們采用DNase I和其他類型膠原酶配置特定的混合酶液對組織進行解離，消化前后結合GentleMacs儀器進行研磨，通過機械輔助降低角質層細胞比例；皮膚樣本細胞懸液制備中容易出現結團率偏高的情況，我們利用結團細胞團和單個細胞間沉降系數差進行離心沉降，輔助解離，降低結團率；對于碎片較多的樣本，可通過活細胞染色流式分選來去除碎片和死細胞，獲得總數多、活性好、碎片少、成團率低的單細胞懸液；同時，我們還可根據客戶的具體需求，針對皮膚組織的特定類型細胞進行分選。
皮膚組織單細胞懸液制備
實驗目的
客戶提供新鮮組織樣本（組織保護液保存），制備細胞懸液后用于單細胞測序。
實驗準備
樣本接收，拍照留存，超凈臺紫外消毒、備好冰盒冰板，準備好相應酶液。
【酶液】：
1 mg/ml Collagenase IV
3.5 mg/ml Collagenase II
0.04 mg/ml DNase I
0.002 mg/ml hyaluronidase
HBSS
實驗步驟
1. 將組織放入培養皿中，放置在冰板上，加入清洗液，清洗三次；
2. 完全棄去清洗液后，加入少量配制好的酶液，使用干凈的剪刀將組織完全剪碎；
3.待組織完全剪碎后，用移液器將每組剪碎的組織移到15mL離心管內，加入足量酶液混勻，取20μl進行臺盼藍鏡檢；
4.將裝有組織的離心管放置在37oC搖床上消化60min；
5.待消化結束，將所有消化液轉移至離心管，加入足量清洗液，將其通過100μm, 40μm濾網轉移至離心管，300×g 離心5min；
6. 加入清洗液，300×g 離心5min；
7. 棄去上清，加入紅細胞裂解液重懸裂解紅細胞，裂解時間3min；
8. 加入清洗液終止裂解并清洗細胞，300×g 離心5min；
9. 棄上清,加入清洗液繼續清洗一次后重懸，取20μl懸液進行質檢；
10.將細胞加到37% percoll上，400×g，20min,升降速度為1，離心；
11.棄上清，使用清洗液重懸細胞，分別取20μl進行臺盼藍染色和AOPI計數。
部分實驗結果展示
樣本：小鼠皮膚組織
細胞活率：98.8%
活細胞濃度：3.6E+05/ml
結團率：4.37%
樣本：人黑色素瘤
細胞活率：93.27%
活細胞濃度：2.98E+04/ml
結團率：12.47 %