耐藥株前培養團聚問題，優化胰酶+促貼壁試劑參考-細工生物20250328

建議參考類：乳腺，肝，胰島胰腺，免疫懸浮，膠質-神經，內膜，上皮，內皮，SV40-大T抗原，

特點：團聚

免疫類團聚參考：換液不棄液，解決團聚

貼壁大部分所需自分泌競相因子特點細胞，LNCAP、BV-2、mcf-7、ins-1，hep3b、thp-1。

驗證很簡單，上清回輸后細胞增殖比全新完全培養基增殖快，細胞狀態漂亮，先做預實驗，拿到這個結果，后面可長期備份上清，做為救助細胞最好條件。

細工優化胰酶+促貼壁試劑應用后團聚細節討論。

促貼壁試劑輔助后，平時7-8個小時才貼壁細胞區別，輔助試劑一小時就貼壁（也是我司救助細胞基本原理）增殖，代謝明顯加快，就別按傳統觀念，要考慮細胞匯合80-90%就要傳代，老習慣后，細工試劑種子庫級別的，細胞錨著后就可是克隆生長，代謝等，容易細胞長的很滿，并團聚厲害后，老幼狀態不一，細胞液更容易變黃，團聚太厲害的，影響后面實驗（轉染前，凍存前），摸出該細胞增殖特點調整讓細胞舒服錨著，增殖條件（自動化培養開發該項非常重要），再結合膜無損胰酶，消化成單個，傳代，保證細胞質量一致性，對后面維持培養，超量培養前期種子擴增非常重要。

團聚厲害組參考建議：可做超長時間消化，幾個小時，甚至過夜，如能驗證順利，原代離體后組織也可做為參考條件理由，團聚也可理解成培養成組織塊，該項要能深入研究，二維-三維培養那個條件增殖，那個條件三維，可做充足技術儲備。

該條件團聚，與生長較慢條件團聚，差別很大，粗略概述幾個因素不同：PH變化，耗材，代謝，試劑營養水平（種子庫要求）平時試劑篩選，習慣特點，等很多因因素都要考慮進去，正常生長條件團聚，說明試劑，耗材，技術等都還比較合適，通過細胞匯合度，傳代，上清利用等條件，把細胞調整到，細胞質量一致性是重點。

扣主題：建系，蛋白質晶體（真核細胞），耐藥株單克隆（超量培養，維持培養），自動化培養等所需冗余試劑，歡迎同學通過解決問題預實驗驗證提前技術儲備，試劑訂購與否都沒關系。

自動化培養相關試劑，技術開發，相關設備廠家，應用廠家，提前細胞培養技術人員人才儲備。

關鍵詞：耐藥株篩選、精準SOP,配套自動化培養，

蛋白質晶體：簡易單克隆方法，超量培養，維持培養，純化蛋白，結晶

注：省去化學，電轉染相關步驟目的是自動化培養相關開發，避開能力財力限制，讓自動化運行設備替代人力最繁重，易出錯，機械24小時運行工作明顯優勢。

純國內試劑技術建系 ：科研層面整體貫穿、PDX、類器官，人造肉、自動化應用。一定是先有細胞系，再有自動化培養應用。

討論：

需幾天長滿，團聚圖片，如何消化，細胞匯合多少開始傳代，如何保證細胞質量一致性，后面實驗都較關鍵。

控制增值快，有很多方法，減血清，上清回輸，傳代時細胞數量控制，匯合度條件傳代等

增殖太快，也可不用促貼壁啊。這個試劑特點做過預實驗了解下就行，也可做上述，該條件培養特性條件摸索。