DNA - 蛋白質互作研究利器!Multi-CUT&Tag 強勢登場-技術前沿-資訊-生物在線

DNA - 蛋白質互作研究利器!Multi-CUT&Tag 強勢登場

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2025-07-11T00:00 (訪問量:50743)

 

在 DNA - 蛋白質互作研究的 “江湖” 里,有一款超牛的技術 ——Multi-CUT&Tag !它憑借獨特的優勢,迅速成為科研 er 們探索生命奧秘的得力助手,今天就帶大家一探究竟!

 

技術原理超硬核

傳統研究 DNA - 蛋白質互作的方法或多或少存在一些局限,而 Multi-CUT&Tag 技術則另辟蹊徑!它巧妙地利用 Tn5 轉座酶和特異性抗體。抗體與目標蛋白質結合后,引導 Tn5 轉座酶精準定位到 DNA - 蛋白質互作位點,然后 Tn5 轉座酶對 DNA 進行切割并添加測序接頭,直接高效地捕獲互作信息。相比于傳統的 ChIP-seq,Multi-CUT&Tag 無需超聲破碎,大大減少了樣本損耗,還能降低背景信號干擾,讓研究結果更加準確可靠!

 

 

應用場景超豐富

01

神經科學領域

2022 年 12 月,Gonçalo Castelo - Branco 課題組在《Nature Biotechnology》上發表研究 ,通過 anti - mouse Tn5 和 anti - rabbit Tn5,針對鼠抗和兔抗在鼠腦中實現特異性的 Multi - CUT&Tag 技術應用。此研究非常詳細地剖析大腦中的祖細胞如何特化成少突膠質細胞,為我們在疾病背景下如何刺激少突膠質細胞群的恢復提供線索,幫助我們深入了解大腦神經細胞的分化機制。

02

免疫學研究

美國紐約基因組中心 Ivan Raimondi 團隊于 2022 年 12 月在《Nature Biotechnology》發表成果 ,在不同免疫細胞,如 PBMCs 和 BMMCs 中,使用納米抗體偶聯的 Tn5 酶實現了單細胞多靶標的 CUT&Tag 研究。不僅獲得了高分辨率的多模態圖,還擴展了技術,能同時分析細胞表面蛋白表達和多模態染色質狀態,極大推動了免疫系統細胞的研究進展。03

發育生物學

在研究細胞分化和發育過程中,Multi - CUT&Tag 可同時檢測多種染色質特征的變化,助力了解基因調控網絡在單細胞水平如何協調細胞發育命運。相關研究成果可參考發表于《Nature Protocols》的論文 “Multi - CUT&Tag to simultaneously profile multiple chromatin proteins” 。該研究展示了 Multi - CUT&Tag 在小鼠胚胎干細胞和滋養層干細胞中的應用,為探究胚胎發育早期細胞分化機制提供了關鍵數據 。

 

產品優勢超給力

01

多靶標同時檢測

Multi-CUT&Tag 最大的亮點之一就是能夠同時檢測多個蛋白質與 DNA 的互作。一次實驗就能獲取多種蛋白質的結合信息,不僅節省了大量的樣本、時間和實驗成本,還能更全面地解析復雜的調控網絡,讓研究效率直線飆升!

02

超高靈敏度與特異性

得益于獨特的酶切和標記方式,即使是微量樣本,Multi-CUT&Tag 也能精準捕獲 DNA - 蛋白質互作信號。并且,它對目標位點的識別特異性極高,能夠有效區分特異性結合和非特異性結合,確保研究數據真實有效,為科研成果保駕護航。

03

操作簡便易上手

翌圣全球首發的 Multi-CUT&Tag 試劑盒配套完善(貨號12592ES),包含了實驗所需的各種關鍵試劑。科研人員只需按照標準化的操作流程,準備好樣本和簡單的實驗設備,就能輕松開展實驗。即使是實驗新手,也能快速掌握,大大降低了技術門檻。

 

表1.翌圣Multi-CUT&Tag試劑盒組分原理

組分名稱

組分原理

BOX-I

ConA Beads

ConA beads為包被了伴刀豆球蛋白A的磁珠,結合細胞膜糖蛋白,從而捕獲細胞

DNA Extract Beads

提取DNA的磁珠

DNA Selection Beads

DNA純化及分選磁珠

BOX-II

10 x Binding Buffer

細胞捕獲緩沖液

10 x Wash Buffer

細胞洗滌緩沖液

5% Digitonin

增加細胞膜通透性,在細胞表明打孔,便于后續轉座切割

50 x PB Buffer

抗體結合緩沖液

10 x Dig-300 Buffer

轉座酶結合緩沖液

Anti-mouse Tn5

偶聯抗鼠二抗的Tn5復合體

Anti-rabbit Tn5

偶聯抗兔二抗的Tn5復合體

33  Activating Buffer

含鎂離子,激活Tn5轉座活性

15 x Terminate Solution

終止轉座酶活性,同時裂解細胞,釋放DNA

30 x Proteinase K

消化蛋白質,釋放蛋白質結合的DNA

DNA Spike-in Mix (5 ng/μL)

來源于Ecoli.的三段序列,用于后續分析的標準化

2xHiFi Amplification Mix

文庫擴增酶

i5 Universal Primer

文庫接頭

i7 Index Primer (T701)

文庫接頭,含測序index

 

這么寶藏的 DNA - 蛋白質互作研究利器,真的太香了!無論是基礎科研,還是應用研究,Multi-CUT&Tag 都能大顯身手。還在為 DNA - 蛋白質互作研究發愁的寶子們,趕緊碼住,說不定下一個科研突破就靠它啦!

 

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