在 DNA - 蛋白質互作研究的 “江湖” 里,有一款超牛的技術 ——Multi-CUT&Tag !它憑借獨特的優勢,迅速成為科研 er 們探索生命奧秘的得力助手,今天就帶大家一探究竟!
技術原理超硬核
傳統研究 DNA - 蛋白質互作的方法或多或少存在一些局限,而 Multi-CUT&Tag 技術則另辟蹊徑!它巧妙地利用 Tn5 轉座酶和特異性抗體。抗體與目標蛋白質結合后,引導 Tn5 轉座酶精準定位到 DNA - 蛋白質互作位點,然后 Tn5 轉座酶對 DNA 進行切割并添加測序接頭,直接高效地捕獲互作信息。相比于傳統的 ChIP-seq,Multi-CUT&Tag 無需超聲破碎,大大減少了樣本損耗,還能降低背景信號干擾,讓研究結果更加準確可靠!
應用場景超豐富
01
神經科學領域
2022 年 12 月,Gonçalo Castelo - Branco 課題組在《Nature Biotechnology》上發表研究 ,通過 anti - mouse Tn5 和 anti - rabbit Tn5,針對鼠抗和兔抗在鼠腦中實現特異性的 Multi - CUT&Tag 技術應用。此研究非常詳細地剖析大腦中的祖細胞如何特化成少突膠質細胞,為我們在疾病背景下如何刺激少突膠質細胞群的恢復提供線索,幫助我們深入了解大腦神經細胞的分化機制。
02
免疫學研究
美國紐約基因組中心 Ivan Raimondi 團隊于 2022 年 12 月在《Nature Biotechnology》發表成果 ,在不同免疫細胞,如 PBMCs 和 BMMCs 中,使用納米抗體偶聯的 Tn5 酶實現了單細胞多靶標的 CUT&Tag 研究。不僅獲得了高分辨率的多模態圖,還擴展了技術,能同時分析細胞表面蛋白表達和多模態染色質狀態,極大推動了免疫系統細胞的研究進展。03
發育生物學
在研究細胞分化和發育過程中,Multi - CUT&Tag 可同時檢測多種染色質特征的變化,助力了解基因調控網絡在單細胞水平如何協調細胞發育命運。相關研究成果可參考發表于《Nature Protocols》的論文 “Multi - CUT&Tag to simultaneously profile multiple chromatin proteins” 。該研究展示了 Multi - CUT&Tag 在小鼠胚胎干細胞和滋養層干細胞中的應用,為探究胚胎發育早期細胞分化機制提供了關鍵數據 。
產品優勢超給力
01
多靶標同時檢測
Multi-CUT&Tag 最大的亮點之一就是能夠同時檢測多個蛋白質與 DNA 的互作。一次實驗就能獲取多種蛋白質的結合信息,不僅節省了大量的樣本、時間和實驗成本,還能更全面地解析復雜的調控網絡,讓研究效率直線飆升!
02
超高靈敏度與特異性
得益于獨特的酶切和標記方式,即使是微量樣本,Multi-CUT&Tag 也能精準捕獲 DNA - 蛋白質互作信號。并且,它對目標位點的識別特異性極高,能夠有效區分特異性結合和非特異性結合,確保研究數據真實有效,為科研成果保駕護航。
03
操作簡便易上手
翌圣全球首發的 Multi-CUT&Tag 試劑盒配套完善(貨號12592ES),包含了實驗所需的各種關鍵試劑。科研人員只需按照標準化的操作流程,準備好樣本和簡單的實驗設備,就能輕松開展實驗。即使是實驗新手,也能快速掌握,大大降低了技術門檻。
表1.翌圣Multi-CUT&Tag試劑盒組分原理
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組分名稱 |
組分原理 |
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BOX-I |
ConA Beads |
ConA beads為包被了伴刀豆球蛋白A的磁珠,結合細胞膜糖蛋白,從而捕獲細胞 |
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DNA Extract Beads |
提取DNA的磁珠 |
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DNA Selection Beads |
DNA純化及分選磁珠 |
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BOX-II |
10 x Binding Buffer |
細胞捕獲緩沖液 |
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10 x Wash Buffer |
細胞洗滌緩沖液 |
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5% Digitonin |
增加細胞膜通透性,在細胞表明打孔,便于后續轉座切割 |
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50 x PB Buffer |
抗體結合緩沖液 |
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10 x Dig-300 Buffer |
轉座酶結合緩沖液 |
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Anti-mouse Tn5 |
偶聯抗鼠二抗的Tn5復合體 |
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Anti-rabbit Tn5 |
偶聯抗兔二抗的Tn5復合體 |
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33 Activating Buffer |
含鎂離子,激活Tn5轉座活性 |
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15 x Terminate Solution |
終止轉座酶活性,同時裂解細胞,釋放DNA |
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30 x Proteinase K |
消化蛋白質,釋放蛋白質結合的DNA |
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DNA Spike-in Mix (5 ng/μL) |
來源于Ecoli.的三段序列,用于后續分析的標準化 |
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2xHiFi Amplification Mix |
文庫擴增酶 |
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i5 Universal Primer |
文庫接頭 |
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i7 Index Primer (T701) |
文庫接頭,含測序index |
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這么寶藏的 DNA - 蛋白質互作研究利器,真的太香了!無論是基礎科研,還是應用研究,Multi-CUT&Tag 都能大顯身手。還在為 DNA - 蛋白質互作研究發愁的寶子們,趕緊碼住,說不定下一個科研突破就靠它啦!
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產品定位 |
產品名稱 |
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