類器官（organoids）是指一種利用干細胞、祖細胞等在體外培養出的3D細胞培養物并具有一定的空間結構組織類似物。2021年，類器官技術被列為“十四五”國家重點研發專項[1]，作為疾病模型，相比于傳統2D疾病模型，類器官在闡明疾病的發展、穩態性和發病機理等與體內環境更加接近，在多領域將發揮重要，諸如細胞治療、藥物研發、基因工程、免疫研究、組織再生等領域。基質膠作為類器官和3D培養的重要載體，在其中發揮著舉足輕重的作用。
圖：類器官培養發展歷史過程[2]
基質膠是從富含胞外基質蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長因子。在室溫條件下，基質膠聚合形成具有生物學活性的三維基質，能模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能，有利于體外細胞的培養和分化。
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翌圣生物開發生產的CeturegelTM?Matrix基質膠不含LDEV（乳酸脫氫酶增高病毒），超低內毒素含量，包括基本濃度、高濃度、低生長因子和干細胞和類器官專用不同類型的基質膠。
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安全性高：不含LDEV（乳酸脫氫酶增高病毒）
濃度多樣性：濃度范圍在8~20 mg/ml之間
批次穩定性好：嚴格生產質檢過程保證批次間性能穩定
低內毒素：內毒素含量<4 EU/ml
污染物檢測：?經檢測無支原體和細菌、真菌殘留
單批產量高：單批產量在L級別以上
兼容性好：可與任何類型的細胞培養基兼容
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凝膠制備方法
1）基質膠融化后，用預冷的槍頭混勻基質膠。
2）將需要使用的培養板置于冰上，然后將培養的細胞與基質膠混合，用遇冷的槍頭使細胞懸浮均勻。按照150-200 μL/cm2生長面積的濃度加入基質膠制備3D培養使用的凝膠，詳見表1。
3）在37℃放置30min，此時即可加入細胞培養液。
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圖：3D細胞及類器官培養過程
表1：3D細胞培養基質膠使用參考：
|
培養板（皿）類型 |
細胞培養面積（cm2） |
推薦量(濃度≥3 mg/mL)* |
|
6孔板 |
9.6 |
200 μL/cm2 |
|
12孔板 |
4.5 |
180 μL/cm2 |
|
24孔板 |
2.0 |
180 μL/cm2 |
|
96孔板 |
0.32 |
160 μL/cm2 |
|
35mm培養皿 |
11.78 |
200 μL/cm2 |
|
100mm培養皿 |
58.95 |
200 μL/cm2 |
注：不同批次基質膠有一定的濃度差異，推薦量僅供參考
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1、拿到的基質有色差的變化（淡黃色到深紅色）是什么原因？
對于含酚紅的基質膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的，但是與5％CO2平衡后色差即會減少。凍融后，輕輕搖晃試劑瓶使基質膠分散均勻。
2、基質膠的操作要注意哪些事項？
所有操作需在無菌環境下進行，應使用預冷的器材以保證基質膠正常操作。
3、基質膠的如何分裝凍存使用？
可將凍融后的CeturegelTM?Matrix基質膠分裝在多個凍存管，凍存管需預冷，分裝后迅速冷凍并保存，避免多次凍融。
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產品類型 |
產品名稱 |
產品編號 |
規格 |
|
基本濃度 |
40183ES08/10 |
5/10 mL |
|
|
CeturegelTM?Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free?基質膠 |
40184ES08/10 |
5/10 mL |
|
|
低生長因子 |
CeturegelTM?Matrix GFR，LDEV-Free?基質膠 |
40185ES08/10 |
5/10 mL |
|
CeturegelTM?Matrix GFR，?Phenol Red-Free，LDEV-Free?基質膠 |
40186ES08/10 |
5/10 mL |
|
|
? 高濃度 |
CeturegelTM?Matrix High Concentration，LDEV-Free?基質膠 |
40187ES08/10 |
5/10 mL |
|
CeturegelTM?Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free?基質膠 |
40188ES08/10 |
5/10 mL |
|
|
CeturegelTM?Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free?
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