科海觀潮—Rh糖蛋白的功能研究-自主發布-資訊-生物在線

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科海觀潮—Rh糖蛋白的功能研究

作者:旭月(北京)科技有限公司 2015-12-30T17:58 (訪問量:4633)

胺跨膜的轉運是維持生物體氮代謝和氮平衡的關鍵因素。虹鱒魚腮的胺轉運可能通過Rh糖蛋白調節。

2010年,加拿大的科學家使用非損 傷微測技術研究了虹鱒魚不同的Rh糖蛋白(R Rhag, Rhbg1, Rhbg2, Rhcg1, Rhcg2, Rh30-like)在卵母細胞中表達后的胺轉運。除Rh30-like外,其他的Rh蛋白都能夠促進甲胺的吸收,吸收可達到飽和,Km值在 4.6-8.9mM。胞外的pH值從7.5升高到8.5,導致甲胺的最大流速(Jmax)增加了3-4倍。當糖蛋白全部表達或者質子化甲胺時Km值沒有變 化。pH梯度刺激甲胺外流和內流的比率和H+梯度的增加成正相關。

本研究使用非損傷微測技術證實了Rhag和Rhcg2促進胺的吸收,但是Rh30-like蛋白不能促進吸收。在低底物濃度下,胺的吸收速率比甲胺高。胺的Km值在虹鱒魚的生理范圍之內。

這 項研究發現虹鱒魚腮的Rh糖蛋白具有低親和力,以及高的胺轉運能力形成的pH梯度,當胞漿胺濃度升高的時候,促進了胺的快速外流。這項研究為我們認識胺的 轉運提供了直接的證據,非損傷微測技術能夠直接測定活體的NH4+以及NO3-的流速,對于研究氮的轉運,研究蛋白的功能有很大的意義。

圖注:用非損傷微測技術測定H2O2, Rhag-, Rhcg2-和Rh30-like注射進卵母細胞后對NH4+的吸收以及NH4+吸收的動力學.

關鍵詞:胺轉運,Rh糖蛋白,卵母細胞,虹鱒魚,非損傷微測技術。

參考文獻:Nawata CM, et al. Journal of Experimental Biology, 2010: 213, 1049-1059.

注:非損傷微測技術(NMT)包括:SIET、SVET、SPET、SERIS、SERP、SERE、SRET、MIFE?等。

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