巨噬細胞在身體的不同部位發揮著獨特而關鍵的作用，然而，為了更深入地研究特定部位巨噬細胞的具體功能以及它們在疾病發生發展中的影響，精準地清除巨噬細胞成為了關鍵的研究手段。氯磷酸鹽脂質體（Clodronate Liposomes）是目前最為成熟，最為經濟且最為理想的一種有效的巨噬細胞清除工具。借助腹腔，尾靜脈等多種給藥方式實現不同組織部位中巨噬細胞的清除。
接下來，我們將通過一系列專題分享，為大家展示在不同部位進行巨噬細胞清除的方法與成效，希望能為各位科研工作者提供有益的參考和借鑒。
注射方法介紹
尾靜脈注射
尾靜脈注射在24h后即達到最大耗竭，應注意檢測時間節點。
01
將小鼠放在倒扣的飯盒內，從孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2條動脈和3條靜脈，2條動脈分別在尾部的背側面和腹側面，3條靜脈呈品字型分布，一般采用左右兩側的靜脈；
02
將紗布浸泡于約70℃溫水中（或浸泡在酒精中），拿出后包裹尾巴，以達到使尾部血管擴張及軟化表皮角質的目的；
03 進行尾部靜脈注射時，以左手拇指和食指前后摁住鼠尾，留出約2 cm一段，使皮膚緊張，靜脈更為充盈，右手持1 mL針頭注射器，使針頭與靜脈平行(小于30°角)，從尾巴的下1/4處進針，開始注入藥物時應緩慢，仔細觀察，如果無阻力，無白色皮丘出現，說明已刺入血管，可正式注入藥物；04
有的實驗需連日反復尾靜脈注射給藥，注射部位應盡可能從尾端開始，按次序向尾根部移動，更換血管位置注射給藥。拔出針頭后，用棉球按住注射部位輕壓1-2 min，止血；
腹腔注射
腹腔注射在48-72h后達到最大耗竭，應注意檢測時間點。
01
首先采用背側保定法抓取小鼠，使其頭部稍向后仰，腹部向上，小鼠左后肢用小指固定住，再用75%酒精棉球消毒注射部位；
02
小鼠腹腔注射的位置在：下腹部腹中線兩側0.5cm（與大腿根部平齊）處，未免傷及臟器，保定小鼠時需使其頭部稍向后仰，以使其下腹部臟器上移；
03 將注射器針頭刺入皮膚，進入皮下后，沿皮下向前推進2-3mm，針頭與皮膚呈45度角刺入小鼠腹腔。注意：穿透腹膜后，針尖的阻力消失；04
回抽針栓，如無回血或液體即可注入藥物；
05
注射完畢后，輕輕旋轉針頭，再緩慢拔出注射器，以免液體外漏。
不同研究部位，也會有不同的注射方法，如：皮下注射、氣管給藥、顱內注射等。實驗前應參考相關文獻及咨詢Yeasen技術團隊。
給藥周期及計量
短期給藥即注射一次氯磷酸鹽脂質體200 μl（20-25g體重），在特定時間檢測巨噬細胞清除效率或進行下游實驗。 長期給藥
即需要超過一周或以上實現巨噬細胞清除。以WT小鼠為例，一般首次給藥200 μl（20-25g體重），之后每2 - 3天給藥一次，每次用量100μl-150μl。
參考試驗方案
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器官/ 巨噬細胞 |
劑量用法 (20-25g/每只小鼠 ) |
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脾臟/紅髓區巨噬細胞 |
單次給藥：200 µl/小鼠 (靜脈注射或腹腔注射)。 長期耗竭：第一次給藥劑量200 µl/小鼠（25g左右），以后按2-3天一次給藥100 µl/小鼠 |
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肝臟/Kuffer細胞 |
單次給藥：200 µl/小鼠 (靜脈注射或腹腔注射)。 長期耗竭：第一次給藥劑量200 µl/小鼠，以后按2-3天一次給藥100 µl/小鼠 |
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肺/肺泡巨噬細胞 |
靜脈注射（150-200 µl）聯合氣管內或鼻內（50 µl）獲得最佳效果。 |
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淋巴結 |
注射(100-200 µl)/小鼠，具體給藥方案可參考文獻。 |
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腦/小膠質細胞 |
腦室內進入腦脊液，10 µl/小鼠，50 µl/大鼠。 |
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血液/單核細胞 |
150-200 µl/小鼠（靜脈注射），24小時內可達最大耗竭率，但1-7天的最大耗竭率與小鼠品系有關。 |
注：以上僅參考，實驗前應參考相關文獻及咨詢YEASEN技術團隊
產品推薦
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產品名稱 |
貨號 |
規格 |
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Clodronate Liposomes(From Vrije Universiteit Amsterdam) 體內巨噬細胞清除劑 |
40337ES08 |
5 mL |
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40337ES10 |
10 mL |
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40338ES08 |
5 mL |
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40338ES10 |
10 mL |