流式細胞術在癌癥研究中的應用概述-技術前沿-資訊-生物在線

流式細胞術在癌癥研究中的應用概述

作者:北京義翹神州科技有限公司 2019-05-10T16:32 (訪問量:7730)

隨著FCM的不斷發展和完善,它在醫學及其他學科的應用也更加深入和廣泛,涵蓋了從基礎研究到臨床診斷的多個方面,涉及血液學(白血病免疫分型)、免疫學(淋巴細胞亞群檢測)、腫瘤學(腫瘤標志學、循環腫瘤細胞及腫瘤干細胞檢測)、細胞生物學、遺傳學和微生物學等領域。

  • FCM在白血病診斷研究方面的應用

流式細胞免疫分型已經成為血液系統腫瘤診斷、分類及監測的重要工具。FCM通過對骨髓細胞或外周血細胞表面抗原和DNA的檢測分析,在急性白血病的診斷和鑒別中有著舉足輕重的作用。FCM的細胞免疫分型是國際公認的診斷造血細胞疾病必不可少的重要標準之一,也是目前被廣泛接受和認可的免疫分型方法。

各種血細胞系都有其獨特的抗原,FCM以單克隆抗體(McAb)為分子探針,借助熒光素(APC、FITC、PE等)可對白血病細胞的胞膜、胞漿或胞核的免疫表型進行多參數分析,從而了解白血病細胞所屬的細胞系列及分化程度。測定DNA倍體及進行細胞周期分析對治療白血病有一定指導作用,不同患者或同一患者在不同時期細胞增殖狀況不同,定期了解增殖情況以采取相應藥物可以提高療效。

在白血病免疫分型方面,國內外均主張采用FCMCD45/SSC(SideScatter,側向角散射)雙參數散點網設計法進行分型,這種方法可以將骨髓細胞清晰地分成成熟粒細胞、淋巴細胞、幼稚細胞、單核細胞和有核紅細胞群,排除了正常細胞對免疫分型的干擾,可以顯著提高細胞免疫分型的準確性。

  • FCM檢測淋巴細胞亞群

FCM利用其強大的熒光標記技術,可同時檢測一種或幾種淋巴細胞的表面抗原,從而區分不同功能的淋巴細胞亞群。常檢的淋巴細胞亞群包括T細胞(CD3+CD4+、CD3+CD8+)、B淋巴細胞(CD19+CD20+)及NK細胞(CD16+CD56+)等。通過對不同淋巴細胞亞群的相對、絕對計數以及比率觀察,可以評估感染性疾?。ˋIDS/HIV)、免疫性疾病及腫瘤等疾病狀態下機體的免疫狀況,從而輔助診斷、判斷病情變化。

  • FCM在腫瘤臨床診斷研究方面的應用

利用FCM對腫瘤細胞各參數進行檢測、分析,可以進一步提高腫瘤診斷的研究水平。如,通過對腫瘤細胞DNA倍體分類,研究腫瘤細胞的生物學特性;對腫瘤細胞的細胞周期、增殖活性、細胞凋亡水平及細胞分化等進行分析,探討腫瘤細胞動力學標志的特征;分析腫瘤細胞各基因如癌基因,抑癌基因,腫瘤轉移相關基因等表達水平,可以研究腫瘤細胞基因表達特征等。FCM的出現使腫瘤的診斷治療有了質的飛躍。

FCM可以檢測腫瘤細胞的增殖活性標志分子、分化/凋亡標志分子等,用于研究腫瘤的發病機制、制定個性化治療方案以及進行預后判斷。通過FCM檢測細胞DNA含量,是FCM對腫瘤標志物研究中結論最明確、應用價值最大的研究成果之一。通過對DNA進行染色標記,可以精確測定其含量的變化。細胞DNA含量發生異常改變或DNA非整倍體細胞群的出現,可作為細胞發生癌變或具有惡性潛能的癌前病變的重要標志。

FCM憑借其獨特的檢測原理及強大的熒光標記技術仍將在腫瘤診斷研究中發揮重要作用。不久的將來,FCM將與組織學診斷、分子診斷等更完美的結合在一起,為臨床診斷提供更準確、完整的信息。但是,不得不承認,我國FCM的應用研究遲于國外近10年,發展時間較短,還存在許多缺陷和不足,如FCM設備和試劑問題,FCM質量管理問題等,需在以后的發展中不斷優化和完善。

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圖源:北京義翹神州

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