絕對定量時代——引領慢病毒行業新標準
高大上的慢病毒是怎樣煉成的（一）
?
?
慢病毒活性滴度用什么單位？
看TU！看TU！看TU！
?
TU=transducing units，即每毫升中含有的具有生物活性的病毒顆粒數。其他的VG/mL，VP/mL都是所有病毒顆粒數，死的活的都算上，一片虛假繁榮，請自由玩兒去！
?
慢病毒活性滴度怎么標定最準？
絕對定量！絕對定量！絕對定量！
?
又絕對又定量的方法，準到不要不要的！再說了，這“絕對定量”是醫療級病毒產品的公認滴度檢測方法，諾華、Juno，這些CarT大佬們都用！不準？不準的話FDA能認嗎？
復雜又昂貴的方法，為了準，咱們忍啦！
?
1. 標準品檢定繪制標準曲線，精確定量病毒基因組DNA拷貝數 2. 測定插入細胞基因組的5’LTR—3’LTR病毒基因組拷貝數 3. 工具細胞 293T基因組中的病毒特征單拷貝基因A和宿主特征單拷貝基因B 4. TU=N*C/V=（初始細胞/感染病毒體積）×（2×A基因拷貝/B基因拷貝），計算感染效率 5. 不要反轉錄，不要受RNA降解或反轉錄效率影響。 6. 如果病毒有熒光或者抗性，再結合表型聯合判斷
?
準！準！準！重復性杠杠滴！
處女座實驗狗都無法抵抗的滴度標定方法！
?
?
慢病毒滴度標那么準，有用嗎？
?
我！@#￥%&*……
有人問我，為啥我的細胞用慢病毒一感就死？
為啥我的細胞用慢病毒感染后會出現小黑點？
很可能是，過感染啦！過感染啦！過感染啦！
?
有木有先做預實驗確定細胞的MOI？有沒有根據病毒滴度準確計算病毒用量？
越是高濃度高純度的病毒，越是需要精確計算滴度，以避免感染不足或者過量感染，保證最好的細胞狀態，以繼續下游實驗，這樣才能省時省力省病毒啊啊?。。?！
最后，附贈感染預實驗步驟詳解，請叫我雷鋒！
吉凱基因引領慢病毒行業新標準——慢病毒活性標定從此進入新時代，不絕對定量的慢病毒，拜拜！
? ? ? 長按加關注