在呼吸系統疾病研究、免疫機制探索等科研領域，小鼠鼻腔灌洗液（Nasal Lavage Fluid, NLF）和肺泡灌洗液（Bronchoalveolar Lavage Fluid, BALF）是極具價值的實驗樣本。通過檢測灌洗液中的細胞成分、細胞因子、抗體等指標，能為相關研究提供關鍵數據支撐，而實驗操作的規范性，直接決定了樣本質量與后續實驗結果的可靠性。今天為大家詳細拆解小鼠NLF和BALF的完整獲取流程，干貨滿滿，建議收藏備用！

 01 實驗材料準備

實驗動物：SPF 級小鼠，體重 20-25g，雌雄不限

核心試劑：無菌生理鹽水（0.9% NaCl）；可根據實驗需求添加抗凝劑（如 EDTA）或蛋白酶抑制劑，防止樣本中蛋白降解

實驗器械：1ml 注射器、氣管插管、眼科剪、眼科鑷、醫用酒精

02 實驗操作流程

（一）小鼠肺泡灌洗液（BALF）獲取

動物固定：將小鼠麻醉后，仰臥固定，充分暴露頸部和胸部區域，做好操作區域的消毒處理。

頸部插管：用眼科剪在小鼠頸部正中做長約 1cm 的切口，逐層分離皮膚、皮下組織和肌肉，暴露白色氣管；將 1ml 注射器連接氣管插管，針頭平行插入氣管內，插入深度控制在 0.8-1cm。

肺泡灌洗：緩慢推注無菌生理鹽水，劑量為 0.5-1ml / 次（可根據小鼠體重靈活調整）；推注完成后停留 5-10s，可輕按摩小鼠胸部，促進生理鹽水與肺泡充分接觸，隨后輕柔回抽灌洗液。

重復灌洗：肺泡灌洗液自然回收率較低，通常為 50%-70%，可重復灌洗 3-4 次；全程需將收集的灌洗

液置于冰上保存，避免樣本變質影響后續檢測。

樣本處理：將收集到的 BALF 離心，分離上清液和沉淀細胞。沉淀細胞可用于細胞涂片、流式細胞術分析等，上清液可用于蛋白定量、細胞因子檢測等實驗。

動物固定：將小鼠麻醉后，仰臥固定于手術臺上，暴露頸部和下頜區域，做好操作區域消毒。

解剖操作：將眼科剪伸進口腔，沿小鼠一側下頜剪開臉頰部，剪掉舌根及喉頸部相關組織，分離并暴露小鼠上腭；可見軟腭內的后鼻道管道，其開孔位置接近舌根部。

灌洗操作：將吸有灌注液的注射器連接氣管插管，沿后鼻道開孔插入約 3-5mm，緩慢推注液體；同時用離心管在小鼠鼻孔下方承接流出的灌洗液。

重復灌洗：為提高樣本回收率，可重復灌洗 3-5 次，每次灌洗后輕輕按壓小鼠鼻部兩側，促進灌洗液充分流出，灌洗液同樣需全程冰上保存。

樣本處理：立即將收集的灌洗液離心，分離上清液和沉淀細胞，根據實驗需求分別進行后續檢測分析。

靈賦拓普專業技術支持

小鼠NLF和BALF的獲取操作，對實驗人員的操作熟練度、流程把控度要求較高，稍不注意易導致樣本回收率低、樣本變質等問題，影響后續科研實驗。深圳靈賦拓普生物科技有限公司可提供標準化的小鼠鼻腔灌洗液、肺泡灌洗液獲取技術服務，由經驗豐富的實驗人員嚴格遵循實驗規范操作，全程把控樣本保存與處理關鍵環節，較大程度保障樣本回收率與質量，為呼吸系統疾病研究、免疫機制探索等科研工作提供可靠的樣本支撐。

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