做小鼠、大鼠的藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，方案寫得再漂亮，上手一哆嗦，數(shù)據(jù)全白費(fèi)。今天不講理論，只講落地操作—— 怎么做、注意什么、哪里最容易翻車，新手照著做也能穩(wěn)出數(shù)據(jù)。
一、給藥操作：IV / PO 核心手法
靜脈注射（IV，尾靜脈最常用）
小鼠必須充分加溫?cái)U(kuò)血管：用紅外燈或42℃水浴袋熱敷尾巴1-2分鐘，血管呈粉紅色再扎。
進(jìn)針點(diǎn)選尾側(cè)靜脈（左右兩側(cè)），30G胰島素針，針尖斜面朝上，與尾約10-15°角進(jìn)針。
標(biāo)志：推注時(shí)阻力小，藥液走行一段后消失。若局部發(fā)白鼓包 → 失敗，數(shù)據(jù)不能用。
推注速度：10秒左右推完（體積5-10 mL/kg），太快會(huì)一過性低血壓/死亡。
口服灌胃（PO）
用彎頭灌胃針（小鼠20-22G，大鼠16-18G），針頭長度按動(dòng)物大小預(yù)量：小鼠約2.5-3 cm，大鼠約5-6 cm。
關(guān)鍵手法：小鼠頭頸與身體成一直線，針沿上顎入，過喉頭時(shí)有“落空感”，進(jìn)針無阻力。
二、采血操作：不同部位怎么選？
采血通用原則
采血順序：先采時(shí)間點(diǎn)早的（藥物濃度高），優(yōu)先用肝素鈉或EDTA抗凝管。
全血采集后立即4℃離心（3000-4000 rpm，10 min），取上清血漿，1小時(shí)內(nèi)離心完畢，否則藥物降解。
三、樣本處理與保存：別讓辛苦白費(fèi)
血漿分離后：分裝到標(biāo)記好的離心管，-80℃保存（短期可-20℃，但推薦-80℃）。
避光藥物：全程使用棕色管或在暗處操作（如硝苯地平、氯丙嗪等光敏藥物）。
溶血樣本：肉眼可見紅色血漿 → 作廢，必須重采（溶血會(huì)釋放胞內(nèi)酶和藥物結(jié)合蛋白）。
四、時(shí)間點(diǎn)操作節(jié)奏（以IV+PO交叉設(shè)計(jì)為例）
密集采血期（前 30 分鐘）：每個(gè)點(diǎn)誤差 不超過≤30 秒 ，建議 2 人操作：1人固定動(dòng)物+采血，1人計(jì)時(shí)記錄；
中后期（1–8 小時(shí)）：誤差可放寬至 2–5 分鐘，但仍需準(zhǔn)確記錄實(shí)際采血時(shí)間（用于后續(xù)PK計(jì)算）；
小技巧：提前按時(shí)間點(diǎn) / 動(dòng)物編號(hào)標(biāo)記離心管，按順序擺冰盒，采一個(gè)走一個(gè)，不慌亂。
五、最容易翻車的 3 個(gè)細(xì)節(jié)
IV推注后拔針出血 → 用干棉球輕壓尾靜脈進(jìn)針點(diǎn)30秒，否則藥液隨血流出，劑量不準(zhǔn)；
小鼠眼眶采血后死亡 → 進(jìn)針深度過深（＞5 mm）損傷視神經(jīng)或腦組織。控制深度3-4 mm，旋轉(zhuǎn)進(jìn)針而非直捅；
血漿反復(fù)凍融 → 每次凍融降解約10-30%，全程最多凍融1次，分裝成單次用量小管。
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