做小鼠、大鼠的藥代動力學實驗，方案寫得再漂亮，上手一哆嗦，數據全白費。今天不講理論，只講落地操作—— 怎么做、注意什么、哪里最容易翻車，新手照著做也能穩出數據。
一、給藥操作：IV / PO 核心手法
靜脈注射（IV，尾靜脈最常用）
小鼠必須充分加溫擴血管：用紅外燈或42℃水浴袋熱敷尾巴1-2分鐘，血管呈粉紅色再扎。
進針點選尾側靜脈（左右兩側），30G胰島素針，針尖斜面朝上，與尾約10-15°角進針。
標志：推注時阻力小，藥液走行一段后消失。若局部發白鼓包 → 失敗，數據不能用。
推注速度：10秒左右推完（體積5-10 mL/kg），太快會一過性低血壓/死亡。
口服灌胃（PO）
用彎頭灌胃針（小鼠20-22G，大鼠16-18G），針頭長度按動物大小預量：小鼠約2.5-3 cm，大鼠約5-6 cm。
關鍵手法：小鼠頭頸與身體成一直線，針沿上顎入，過喉頭時有“落空感”，進針無阻力。
二、采血操作：不同部位怎么選？
采血通用原則
采血順序：先采時間點早的（藥物濃度高），優先用肝素鈉或EDTA抗凝管。
全血采集后立即4℃離心（3000-4000 rpm，10 min），取上清血漿，1小時內離心完畢，否則藥物降解。
三、樣本處理與保存：別讓辛苦白費
血漿分離后：分裝到標記好的離心管，-80℃保存（短期可-20℃，但推薦-80℃）。
避光藥物：全程使用棕色管或在暗處操作（如硝苯地平、氯丙嗪等光敏藥物）。
溶血樣本：肉眼可見紅色血漿 → 作廢，必須重采（溶血會釋放胞內酶和藥物結合蛋白）。
四、時間點操作節奏（以IV+PO交叉設計為例）
密集采血期（前 30 分鐘）：每個點誤差 不超過≤30 秒 ，建議 2 人操作：1人固定動物+采血，1人計時記錄；
中后期（1–8 小時）：誤差可放寬至 2–5 分鐘，但仍需準確記錄實際采血時間（用于后續PK計算）；
小技巧：提前按時間點 / 動物編號標記離心管，按順序擺冰盒，采一個走一個，不慌亂。
五、最容易翻車的 3 個細節
IV推注后拔針出血 → 用干棉球輕壓尾靜脈進針點30秒，否則藥液隨血流出，劑量不準；
小鼠眼眶采血后死亡 → 進針深度過深（＞5 mm）損傷視神經或腦組織?？刂粕疃?-4 mm，旋轉進針而非直捅；
血漿反復凍融 → 每次凍融降解約10-30%，全程最多凍融1次，分裝成單次用量小管。
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