在神經科學、神經退行性疾病（如阿爾茨海默病）以及藥物代謝研究中，腦脊液（CSF） 是一類價值極高的樣本。
但是，做小鼠實驗的你肯定知道：取腦脊液太難了！ 小鼠腦脊液總量僅約35–40 μL，單次能穩定采集的通常只有10–15 μL。稍有不慎，就會面臨采集量不足、樣本發紅（血污染）甚至動物狀態不佳等問題。
別擔心，結合資深實驗經驗，我們整理了這份“枕大池穿刺”實操指南，幫你避開那些容易失敗的環節！
腦脊液由脈絡叢產生，環繞在中樞神經系統周圍，不僅能營養腦組織、緩沖保護，還能反映腦內的代謝狀態。
它常用于：
-
生物標志物檢測： 如阿爾茨海默病相關的 Aβ、tau 蛋白。
-
藥物研究： 檢測藥物在中樞的濃度。
-
組學分析： 代謝組學、蛋白質組學研究。
來源王平宇教授主編的《大鼠腦讀片提要及圖譜》
-
樣本量極少： 相比人類（約100-200mL）和大鼠，小鼠全身腦脊液才35-40 μL，屬于“限量版”資源。
-
純凈度難保： 蛛網膜下腔狹窄且血管豐富，操作偏差極易導致血液污染或組織液混入，直接影響后續檢測數據。
枕大池穿刺· 5步實操要點
動物： 選20–30g的小鼠，使用舒泰麻醉，待角膜反射消失（或角膜+翻正反射均消失）后開始。
器械： 顯微剪、精細鑷、31G胰島素針（針尖可套硅膠套）、4-0縫合線等。
環境： 務必配合37℃恒溫墊，防止體溫流失。
體位： 頭低位俯臥，讓頭部自然垂落，這一步很關鍵，能打開枕大池空間。
消毒： 酒精-碘伏-酒精順序消毒。
切口： 沿中線做約1cm縱向皮膚切口，鈍性分離肌肉和脂肪墊，暴露枕大池及蛛網膜。
進針： 沿中線，與脊柱呈約30°角進針。
手感： 針尖穿透蛛網膜時會有明顯的“落空感”。
深度： 停止深入，進針深度約1mm即可。
抽取： 緩慢抽取，切忌負壓過大，以免造成血管損傷。
拔針： 干棉簽輕壓穿刺點。
縫合： 肌肉和皮膚分層縫合（或用皮夾）。
術后： 放回恒溫墊直至清醒，可皮下注射37℃生理鹽水0.5-1mL，單籠飼養觀察24h。
-
如需多次取樣，建議間隔不少于2周。
常見問題急救站
抽不出來/量太少？
排查點： 頭部屈曲角度夠嗎？進針點偏了沒？針頭堵了沒？
對策： 調整頭位，確認在枕骨后緣正中凹陷處進針，緩慢微調深度。
樣本變紅（血污染）？
排查點： 損傷了椎動脈或肌肉小血管。
對策： 嚴格沿中線進針，避開兩側血管；采用低負壓或自然流出方式。
術中呼吸異常？
排查點： 麻醉過深？針尖太深傷到延髓？
對策： 優化麻醉，限制進針深度（<1.5mm），緩慢采集。
術后出現神經癥狀？
排查點： 針尖損傷脊髓或神經根。
對策： 進針方向保持向頭側約30°，嚴禁垂直插入椎管。
規范化的取材流程是獲得高質量樣本的關鍵。希望這份指南能幫你穩定獲取清亮的腦脊液樣本，為你的神經科學研究打下堅實基礎！
后臺私信：“腦脊液取材” 獲得完整資料哦！
