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mRNA（信使核糖核酸）作為攜帶遺傳信息、指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的關(guān)鍵分子，在生命活動(dòng)中扮演著核心角色。在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，科學(xué)家們巧妙利用 mRNA 的特性，通過人工合成特定序列的 mRNA，將其遞送至細(xì)胞內(nèi)，指導(dǎo)細(xì)胞合成所需的蛋白質(zhì)，從而實(shí)現(xiàn)疾病治療或預(yù)防的目的。在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，mRNA 技術(shù)正以前所未有的態(tài)勢(shì)重塑著疾病治療與預(yù)防的格局，如今已在傳染病防治、腫瘤治療、罕見病干預(yù)等多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出令人矚目的成果，成為推動(dòng)生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)變革的重要力量。

mRNA藥物開發(fā)的整個(gè)流程大致可以分為幾步：序列確定&設(shè)計(jì)—mRNA體外轉(zhuǎn)錄—包封制備，其中mRNA體外轉(zhuǎn)錄（In Vitro Transcription, IVT）步驟為： 質(zhì)粒DNA 提取&線性化—體外轉(zhuǎn)錄（共轉(zhuǎn)錄加帽）—純化—mRNA原液。化學(xué)共轉(zhuǎn)錄法加帽是目前mRNA藥物開發(fā)的主流方法，通過一步法在IVT反應(yīng)中進(jìn)行加帽，能夠使得后續(xù)開發(fā)過程的體外轉(zhuǎn)錄工藝放大變得尤為簡單。

T7 RNA 共轉(zhuǎn)錄試劑盒通過對(duì)轉(zhuǎn)錄體系的深度優(yōu)化，以 low dsRNA T7 RNA 聚合酶為核心，能夠以含有 T7 啟動(dòng)子序列的線性雙鏈 DNA 為模板，以核苷酸（NTPs）為底物，高效轉(zhuǎn)錄合成 mRNA。其獨(dú)特的設(shè)計(jì)和優(yōu)化的反應(yīng)體系，為 mRNA 的制備帶來了諸多優(yōu)勢(shì)。不僅顯著提升了 RNA 的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量。在標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件下，投入 1μg 模板量，即可產(chǎn)生 150 - 200μg 的 RNA。同時(shí)dsRNA含量相比于野生型T7 RNA 聚合酶，降低至少10倍，一些項(xiàng)目當(dāng)中可達(dá)到上百倍的幅度。

圖1.mRNA藥物開發(fā)及生產(chǎn)流程

共轉(zhuǎn)錄試劑盒優(yōu)勢(shì)

01

操作流程更簡單

共轉(zhuǎn)錄加帽操作更簡單，引入的物質(zhì)更少，工藝流程簡單；

02

產(chǎn)量高

1 µg模板，可產(chǎn)生150-200 µg的Cap 1 mRNA；

03

免疫原性更低

試劑盒采用修飾的N¹-Me-pUTP，low dsRNA T7 RNA聚合酶，可減少自身免疫反應(yīng)；

04

加帽率高

加帽效率高達(dá)99%以上；

03

試劑盒組分全套

試劑盒組分豐富，包含有NTPs，T7酶mix，帽類似物，DNase I 和LiCl等，滿足一步法共轉(zhuǎn)錄所需試劑需求。

驗(yàn)證數(shù)據(jù)

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應(yīng)用范圍廣

針對(duì)于不同長度的片段，20ul體系，1ug質(zhì)粒DNA投入，均可得到9mg/ml的產(chǎn)量，加帽率在100%。

表1.驗(yàn)證數(shù)據(jù)匯總

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完整度高

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dsRNA 含量極低

針對(duì)于8K序列驗(yàn)證數(shù)據(jù)，dsRNA 含量相較與WT T7 RNA聚合酶，降低100倍，其他指標(biāo)未降低。

產(chǎn)品信息

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