要做動物實驗了，你是否會焦慮的不知從何下手??！
實驗室沒有做AAV的動物實驗，沒人指導，我需要首先了解和確定哪些基礎信息呢？
別急，小編這就帶你理理思路：
對AAV你了解多少？它有哪些優勢和不足？
明確自己的目的細胞類型或者靶向器官是什么？
針對目的部位，哪種注射方式效果更佳？
目的細胞類型或器官是否有特異性啟動子呢？啟動子該怎么選？
那么多血清型，用哪個合適呢？
AAV的滴度多少合適呢？應該注射多少的量呢？
什么時候取樣觀察呀？
AAV有哪些優勢和不足？
目前尚未發現野生型AAV對人體致?。?0%的人感染過AAV），重組AAV去除了野生型AAV基因組的96%，進一步保證了安全性，是目前最理想的基因治療載體。
AAV作為基因載體有多方面的優勢：
A.NIH對于生物技術制品的相關評級，腺相關病毒載體（AAV）屬于RG1，最安全等級：腺相關病毒（AAV）不插入基因組，不改變基因組結構，因而沒有潛在的致瘤性。
B.AAV具有廣泛的宿主范圍，對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。有比較強的靶向性，可以選擇特定的器官進行轉染。物理性質穩定。在60℃不能被滅活，能抗氯仿。
C.AAV的免疫原性低，基本不引起機體免疫排斥和炎癥反應，能保持持久的體內留存能力和表達能力。
D.AAV可以保持基因長期轉錄表達，在體內表達一般在3-4周可以達到高峰，隨后持續表達，作用時間＞5個月；甚至有臨床實驗2年后仍可以檢測到其表達。
E:在體內感染特異性效果好，包括感染能力和感染的特異性。
局限性：
A.不適合大片段基因的導入：AAV載體一般只能帶不超過4.7kb外源基因，這還包括了啟動子的長度。
B.體外實驗表達水平較低：AAV病毒的基因組是單鏈 DNA，在體外環境形成雙鏈并轉錄翻譯外源基因的效率非常低。
C.需較長時間開始表達：AAV在感染后需要較長的時間來表達外源基因，所以感染AAV后建議至少 1 周后做檢測。
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怎么確定合適的注射方式
病毒的注射方式大大影響其感染效率，常見的注射方式有：尾靜脈注射、腹腔注射、灌腸、腦立體定位注射、原位注射等等?？梢酝ㄟ^選擇合適的注射方式來實現組織特異性基因調控，對于特定部位，通常采用局部原位注射的方式，比如腦立體定位注射、肌肉定點注射、肝實質注射、心肌原位注射、眼原為注射、關節內注射等。
常見部位注射方式可以參考下表：
2如何選擇啟動子
組織特異性啟動子通常由特定細胞專一表達基因的啟動子鑒定得來的，因此組織特異性啟動子種類較多，且細胞特異性更好。根據自己的細胞類型或組織，可以選擇特異性啟動子，沒有特異性啟動子的可以用常規啟動子。
目前已報道的組織特異性啟動子種類繁多，吉凱基因已累積開發出數十種針對不同組織、細胞的特異性啟動子。根據針對的細胞類型，靶向器官類型，選擇適合的啟動子，具體選擇可參考下表：
3那么多血清型該選擇哪個呢？
AAV可分為12種血清型(AAV-1~AAV-12)和100多種變異體。血清型的一些位點突變后特異性提高；不同血清型的AAV之間也可以雜交，雜交后的AAV會兼有雜合雙方的特點，因此，更多的AAV亞型順勢誕生。
可通過查閱文獻，參考前人研究中哪種血清型更合適；如果還不確定選擇哪種血清型，可嘗試使用AAV試用裝進行預實驗，通過比較不同血清型對目標組織的感染效果，摸索最佳實驗條件（注射方法、注射位點、病毒用量等），以便獲得更理想的結果。
吉凱基因持續開發適用于不同組織或細胞的特異性血清型，目前已開發出多種特異性血清型，目前客戶使用效果反饋均比較好，具體見下表：
4 病毒注射劑量及檢測時間
表達效果與注射劑量有一定的相關性，但注射劑量過大時會對肝臟造成損害。小鼠尾靜脈注射用量大，注射體積一般在100-200ul，小范圍局部注射或原位注射用量少。
AAV在感染后需要較長的時間來表達外源基因，一般7-14天開始表達，細胞分裂不旺盛的部位會需要更長時間表達。因此感染AAV后建議至少 1 周后再做檢測。在體內表達一般在3-4周可以達到高峰，這個時間檢測效果會較好。
5 怎么稀釋病毒？
稀釋病毒產品的等滲溶液沒有其他特殊要求，常規動物試驗用的等滲溶液即可，如 PBS、生理鹽水等。
用完后怎么處理？
對 AAV 最有效的消毒劑是新鮮配制的 1% 次**鈉溶液，將 84 消毒液原液加水稀釋，浸泡 15 min 可以達到消毒目的。
其他的處理方式包括用 2% 戊二醛溶液或是 0.25% SDS 溶液。
也可以 121℃ 高溫消毒 1 小時。
腺相關病毒是動物實驗常用的病毒載體，使用特異性啟動子靶向轉錄能力結合AAV血清型靶向感染能力，可實現更精準、高效的基因操作。目前已被廣泛應用于神經、肌肉、骨骼、心血管、眼科、肝臟、腎臟、脂肪、胰腺等多個研究領域。