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GBT 22221-2008食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測定 高效液相色譜法

Determinatio of fructose,glucose,sucrose,maltose,lactose in foods-High-performance liquid chromatography

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫局總局

中國國家標準化管理委員會? 發布

本標準由中國計量科學研究院提出

本標準由全國食品工業標準化技術委員會歸口

本標準起草單位：中國計量科學研究院、北京市營養源研究所、北京錦繡大地檢測中心

本標準主要起草人：王晶、劉玉峰、唐華澄、傅博強、趙孟彬、尚燕芬、林東下。

1范圍

本標準規定了高效液相色譜法測定食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖。乳糖的條件和詳細分析步驟。

本標準適用用于谷物類、乳制品、果蔬制品、蜂蜜、糖漿、飲料等食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖測定。

本標準果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的最低檢測限為0.4%

2范圍性引用文件

下列文件中條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用于本標準

? GB/T6682分析實驗室用水規格和試驗方法（GB/T6682-1992，neq ISO3695-1987）

3方法提要

試樣經沉淀蛋白質和萃取脂肪后過濾，樣液進高壓也許是色譜儀，經氨基色譜柱分離，外標法定量

4試劑和溶液

除非另有說明，在分析中應使用分析純試劑，水為GB-T6682規定的一級水。

4.1乙*：色譜純

4.2乙酸鋅溶液：稱取21.9g乙酸鋅，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀釋至100ml.

4.4石油醚：沸程30-60℃。

4.5糖：純度≥99%。

4.6糖標準貯備液：分別稱取1g（精準至0.1mg）經過96℃±2℃干燥2h后的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖標準品，加入約50g水溶解，稱量（精準至0.1mg），溶液每克分別相當于20mg果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖，放置4℃密封可貯藏一個月。

4.7糖標準工作液：分別準確吸取糖標準貯備液（4.6）1.00ml、2.00ml、3.00ml、5.00ml于10ml容量瓶，稱量（精確至0.1mg），加水至刻度線，稱量（精確至0.1mg），分別相當于2.0mg/g、4.0mg/g、6.0mg/g、10.0mg/g濃度標準溶液。

5儀器和設備

實驗室常規儀器設備和以下各項。

5.1高效液相色譜儀：具有示差折光檢測器貨相當的檢測器。

5.2色譜柱：Vertex NH2氨基色譜柱（4.6mm×250mm，5um）。

5.3磁力攪拌器。

5.4離心機：4000r/min

以上配置為林老師推薦配置，咨詢聯系參考網址：www.htcoo.com???

以上配置完全按照GBT 22221-2008國家標準執行

6試樣的制備

6.1塊狀或顆粒狀樣品

取有代表性的樣品至少200g，用于粉碎機粉碎，置于密閉的容器內。

6.2粉末狀，糊狀或液體樣品

取有代表性的樣品至少200g，充分混勻，置于密閉的容器內。

7分析步驟

7.1樣品處理

7.1.1脂肪含量小于10%的食品

稱取均勻的食品樣品0.5g-10g（m1,精確至0.1mg），含糖量5%以下稱取10g，含糖量5%-10%以下稱取5g，含糖量10%-40%稱取2g，含糖量40%以上稱取0.5g，于150ml帶有磁力攪拌子的燒杯中，加水約50g溶解，緩慢加入乙酸鋅溶液（4.2）和亞鐵qing化鉀溶液（4.3）各5ml，再加水至溶液總質量約為100g(m2，精確至0.1mg)，磁力攪拌（5.3）30min，放置室溫后，用于干燥濾紙過濾，取約2ml濾液用0.45um微孔濾膜過濾貨離心獲取清液至樣品瓶，待色譜儀測定。

7.1.2糖漿、蜂蜜類

稱取1g-2g均勻樣品（m1，精確至0.1mg）于50ml容量瓶，加水至溶液總質量約為50g（m2，精確至0.1mg），充分搖勻，用0.45um微孔濾膜過濾貨離心獲取清液至樣品瓶中，待色譜儀測定。

7.1.3含二氧化碳的飲料

吸取去除了二氧化碳的樣品50ml（m1），至于100ml容量瓶中，緩慢加入乙酸鋅溶液和亞鐵qing化鉀溶解5ml，放置室溫后，用水定容至刻度（m2），搖勻，靜置30min，然后用于干燥濾紙過濾，取約2ml濾液，用0.45um微孔濾膜過濾貨離心獲取清液至樣品瓶中，待色譜儀測定。

7.1.4脂肪含量大于10%的食品

稱取均勻的食品樣品5g-10g（m1,精確至0.1mg），置于100ml具塞離心管中，加入50ml石油醚（4.4），振搖2min，1800r/min離心（5.4）15min,去除石油醚，重復以上步驟至去除大部分脂肪。蒸發殘留石油醚，用玻璃棒講樣品搗碎，將樣品移至150ml帶有磁力攪拌子的燒杯中，用50g水分兩次沖洗離心管，洗液并入燒杯，以下按7.1.1自“緩慢加入乙酸鋅溶液和亞鐵qing化鉀溶解至5ml”依法操作。

7.2測定

7.2.1色譜參考條件

柱溫40℃；

流動相，乙*-水（85+15，體積比）；

流速：1.0ml/min；

進樣體積：20ul。

7.2.2標準曲線的繪制

分別吸取20ul標準工作液（4.7）注入高效液相色譜儀，在上述色譜條件下測定標準溶液的響應值（峰面積），以濃度為橫坐標/峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。

7.2.3樣品中糖的測定

吸取20ul樣液（7.1）注入高效液相色譜儀，在上述色譜條件下測定試樣的響應值（峰面積）。由標準曲線上查得樣液中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的含量，或利用回歸方程式計算樣液中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的含量。

8結果計算

樣品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖含量以質量分數x計，數值以%表示，按式（1）計算：x=c×m2/m1×1000×100????? ………………………………..(1)

式中：

x-----樣品中糖（果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖）含量，%；

c-----樣液中糖的含量，單位為毫克每克（mg/g）；

m2---水溶液總質量，單位為克（g）或者毫升（ml）；

m1---樣品的質量，單位為克（g）或者毫升（ml）。

平行測定結果用算術平均值表示，保留三位有效數字。

GBT 22221-2008

9允許差

用以樣品獨立進行測試獲取的兩次獨立測試結果的絕對值不得超過算術平均值的10%。

關鍵詞：GBT 22221-2008，食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測定