核酸電泳是分子生物學研究中的一項基本技術，廣泛應用于基因克隆、DNA指紋分析、RNA表達研究等領域。這項技術的核心在于利用電場驅動DNA或RNA分子通過凝膠基質，實現不同大小分子的分離。盡管核酸電泳的原理相對簡單，但其往往影響最終的成果展示。所以在實際操作過程中，如何提高電泳效率、獲得更清晰的條帶一直是研究人員追求的目標。小翌將分享一些實用的實驗室小竅門，以幫助各位科研小伙伴們提高電泳效率~

小竅門1 

選擇合適的凝膠濃度和電泳緩沖液

凝膠濃度對電泳分離效率有著直接影響。瓊脂糖是最常用的凝膠材料，其濃度通常在0.7%至2%之間選擇。濃度越高，凝膠的分子孔徑越小，DNA遷移速率越慢，但分辨率越高。反之，濃度越低，DNA遷移速率越快，但分辨率較低。電泳緩沖液的組成對DNA的遷移速度和分離效率同樣重要。因此，針對實驗目的不同，選擇合適的凝膠濃度與適配的電泳緩沖液。

TAE緩沖液

TAE緩沖液含有乙酸（Acetic acid）、EDTA和Tris，適合用于快速電泳和大片段DNA的分離。乙酸的存在降低了凝膠的pH值，有助于提高電泳速度。

TBE緩沖液

TBE緩沖液含有硼酸（Boric acid）、EDTA和Tris，其離子強度較高，適合用于小片段DNA的高分辨率分離。硼酸根離子的存在增強了凝膠的穩定性，有助于提高分離效率。因此凝膠濃度越大，需采用TEB緩沖液，便于分離條帶。

小翌有多種瓊脂糖，適合不同的應用場景，供大家選擇~

小竅門2 

樣品準備

DNA純化

確保DNA樣品的純度，避免蛋白質、多糖和其它雜質的污染，這可以通過適當的純化步驟實現。純化的DNA樣品能夠提供清晰的電泳條帶，減少背景干擾。

DNA Marker

選擇背景干凈、帶型穩定、大小精準的DNA Marker，如翌圣GoldBand系列DNA Marker（Cat#10501ES-10518ES）。

小竅門3 

均勻加樣

加樣技巧

使用加樣器時保持平穩，右手執移液槍，左手扶在移液槍前方細柄處，斜角45℃懸空插入點樣孔中2-3 mm處點樣。盡量避免戳破凝膠，避免樣品接觸凝膠表面，減少樣品擴散。均勻的加樣能夠確保DNA片段在凝膠中的一致遷移，避免條帶扭曲或模糊。

加樣量

控制適當的加樣量，過量的樣品會導致條帶模糊。適量的加樣能夠保證條帶的清晰度和可讀性，其上樣量與核酸電泳制膠時的梳子大小相關。

小竅門4 

電泳條件

電壓控制

根據凝膠長度和厚度調整電壓，過高的電壓會導致熱量積累，影響DNA的遷移。適宜的電壓設置有助于保持恒定的電泳速度，避免條帶扭曲。

恒壓電泳

優先選擇恒壓電泳而非恒流電泳，以保持電場強度的穩定。恒壓電泳能夠減少電泳過程中的熱效應，提高分離效率。但需注意電壓控制在110-130v為佳，過高電壓易造成不穩定脈沖，影響電泳效果。

小竅門5 

預電泳

如果是新鮮配制的緩沖液，在加樣前進行預電泳，可以清除凝膠中的雜質和氣泡，平衡凝膠孔隙中的離子濃度，減少樣品遷移過程中的阻力，提高電泳效率。預電泳時間一般建議5-10分鐘。

小竅門6 

使用新鮮凝膠

避免重復使用

重復使用的凝膠可能會因緩沖液的滲入而改變孔隙大小，影響分離效果。新鮮凝膠能夠提供一致的孔隙率，保證電泳結果的可重復性。

小竅門7 

核酸染料的選擇

安全染料

使用YeaRed（Cat#10202ES）或YeaGreen（Cat#10204ES）無毒核酸染料，避免使用EB等有毒染料，減少紫外光暴露風險。安全染料不僅對操作人員更安全，而且對環境的影響更小。

小翌希望通過上述小竅門的實施，可以幫助大家顯著提高核酸電泳的分離效率和結果的清晰度，進一步提高實驗的效率和安全性~

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