| NMT作為生命科學(xué)底層核心技術(shù)，是建立活體創(chuàng)新科研平臺(tái)的必備技術(shù)。2005年~2020年，NMT已扎根中國(guó)15年。2020年，中國(guó)NMT銷往瑞士蘇黎世大學(xué)，正式打開(kāi)歐洲市場(chǎng)。 |
基本信息
主題：?NKCC2（離子轉(zhuǎn)運(yùn)體）參與胃酸分泌的實(shí)時(shí)生理證據(jù)
期刊：European Journal of Pharmacology
影響因子：3.17
研究使用平臺(tái)：NMT活體組織創(chuàng)新科研平臺(tái)
標(biāo)題：Na+-K+-2Cl-?cotransporter 2 located in the human and murine gastric mucosa is involved in secretagogue-induced gastric acid secretion and is downregulated in lipopolysaccharide-treated mice
作者：首都醫(yī)科大學(xué)朱進(jìn)霞、鄭麗飛
檢測(cè)離子/分子指標(biāo)
H+
檢測(cè)樣品
小鼠胃黏膜活體組織
中文摘要（谷歌機(jī)翻）
離子/分子流實(shí)驗(yàn)處理方法
10 μM布美他尼、100 μM組胺、300 μM西咪替丁分別處理小鼠胃黏
離子/分子流實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖1B所示的折線圖是使用NMT技術(shù)監(jiān)測(cè)小鼠胃黏膜H+流速變化的結(jié)果。加入組胺（100 μM）引起H+流速增加，從0.52±0.02增加到0.74±0.03 pmol cm-2?s-1，這被組胺H2受體拮抗劑西咪替?。?00 μM）抑制（圖1C）。布美他尼（10 μM）預(yù)處理可明顯抑制組胺誘導(dǎo)的H+流速，但對(duì)基礎(chǔ)H+流速無(wú)影響，表明NKCC在促酸分泌中起作用。
圖1 不同處理下小鼠胃黏膜H+流速的變化情況
其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果
雙重染色免疫熒光結(jié)果表明，NKCC1的免疫反應(yīng)性（IR）主要出現(xiàn)在表達(dá)H+/K+-ATPase的細(xì)胞的基底外側(cè)膜，NKCC2 IR在小鼠和人胃粘膜中H+/K+-ATPase陽(yáng)性細(xì)胞的頂端側(cè)最為突出。在培養(yǎng)的大鼠胃壁細(xì)胞中也觀察到NKCC2 IR。NKCC2信號(hào)也作為陽(yáng)性對(duì)照在小鼠和大鼠腎臟中進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)在腎小管的頂端觀察到強(qiáng)烈的NKCC2 IR。
在靜息條件下，布美他尼在腔管或漿膜的處理均未顯著抑制胃酸分泌。這些結(jié)果表明，抑制頂端膜上高表達(dá)的NKCC2，可以顯著抑制促分泌素誘導(dǎo)的胃酸分泌。
NKCC2基因敲除可降低forskolin刺激的胃酸分泌。
組胺刺激NKCC2在胃粘膜和培養(yǎng)壁細(xì)胞中的易位。
脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）處理的小鼠中NKCC2和VAMP2表達(dá)降低。
結(jié)論
離子流實(shí)驗(yàn)使用的測(cè)試液
141.8 mM NaCl, 5.9 mM KCl, 1.2 mM MgCl2, 10 mM HEPES acid, 5.6 mM Tris, 2.56 mM CaCl2,? 2 g glucose, pH 7.4