翌圣新品大放送--焦磷酸(PPi)熒光檢測(cè)試劑盒
無機(jī)焦磷酸鹽(PPi, Inorganic pyrophosphate, diphosphate, pyrophosphoric acid),又稱二磷酸鹽或雙磷酸鹽,是許多生化反應(yīng)形成的產(chǎn)物或所需的底物。在多磷酸鹽系列中,PPi是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的,在生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué)、藥物領(lǐng)域和化學(xué)過程等方面起著非常重要的作用。
PPi是一種具有重要生物功能的陰離子, 參與生物體中諸多能量轉(zhuǎn)化和新陳代謝過程,ATP水解、DNA和RNA聚合、環(huán)AMP形成和脂肪酸的酶促活化以形成它們的CoA酯等酶促反應(yīng)都能產(chǎn)生PPi。在關(guān)節(jié)液、血漿以及尿液中有許多PPi來防止鈣化,且在細(xì)胞外液(ECF)中能夠抑制羥基磷灰石的形成,因此在骨代謝、腎結(jié)石疾病和某些類型的關(guān)節(jié)炎的研究中,血漿、血清及生物液體中的PPi含量是一個(gè)非常重要的研究指標(biāo)。
鑒于上述PPi的重要研究?jī)r(jià)值,其選擇性檢測(cè)已經(jīng)成為近年來研究熱點(diǎn)之一。
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目前市場(chǎng)上檢測(cè)PPi的試劑盒分為兩類:比色法和熒光法。
比色法的原理是:無機(jī)焦磷酸酶能夠催化PPi轉(zhuǎn)化為兩分子的磷酸鹽。然后,磷酸鹽被MESG(2-氨基-6-巰基-7-甲基嘌呤核糖核苷)/PNP(嘌呤核苷磷酸化酶)反應(yīng)消耗,可通過在360 nm波長(zhǎng)處的吸光度增加進(jìn)行檢測(cè)(圖1)。
圖1. PPi比色法試劑盒原理圖
熒光法是使用獨(dú)特的PPi熒光感受器(Ex/Em=316/456 nm),其熒光強(qiáng)度與焦磷酸鹽濃度成正比。與至少需要兩種酶的酶偶聯(lián)焦磷酸鹽(比色法)方法相比,熒光法檢測(cè)更容易、特異性更強(qiáng)、更可靠,是篩選酶活性或酶抑制劑的理想方法。
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? PPi高靈敏性!
? 適用范圍廣!
? 高穩(wěn)定性!
? 操作快速簡(jiǎn)單!
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該試劑盒已經(jīng)成功用于高通量篩選(HTS),適用于多種樣本,如:尿液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)提取物、組織裂解物等。
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