1.?百螢 Annexin V-iFluor 633標記參數:
E x (nm) ??????640
E m (nm) ??????654
分 子 量 ??????~36000
溶 ???劑 ??????Water
存儲條件 ??????在零下15度以下保存,避免光照
2.?百螢 Annexin V-iFluor 633標記概述及應用
Annexin V-iFluor 633標記是美國AAT Bioquest研發的用于檢測細胞功能的探針,膜聯蛋白是鈣依賴性磷脂結合蛋白家族。 它們富含真核生物,屬于參與信號轉導的普遍存在的細胞質蛋白家族。 膜聯蛋白V的優先結合配偶體是磷脂酰絲氨酸(PS),其通常保持在細胞膜的內葉(細胞質側)。 在細胞凋亡中,PS被轉移到質膜的外部小葉。 磷脂酰絲氨酸在細胞表面上的出現是細胞凋亡的初始/中間階段的通用指示,并且可以在觀察到形態變化之前檢測到。 我們的膜聯蛋白V結合物是一組監測細胞功能的工具,旨在通過測量磷脂酰絲氨酸的易位來監測細胞凋亡。
膜聯蛋白V結合物在Ca2+存在下與凋亡細胞表面上的PS結合,它也可以通過壞死細胞膜或死細胞并與細胞內部的PS結合。 因此,我們建議將細胞不可滲透的核染色與膜聯蛋白V結合物結合使用,以區分死細胞和凋亡細胞。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供優質的Annexin V-iFluor 633檢測試劑。?
3.?數據分析
??下圖是使用流式細胞儀檢測膜聯蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸在Jurkat細胞凋亡中的結合活性的實例。 在活的非凋亡細胞中,膜聯蛋白V-mFluor Violet 450檢測非誘導細胞中的先天性細胞凋亡,其通常為所有細胞的2-6%。 在凋亡細胞中,膜聯蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸結合,磷脂酰絲氨酸位于細胞膜的外部小葉上,導致染色強度增加。
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圖1.在Jurkat細胞中檢測膜聯蛋白VmFluor Violet 450和磷脂酰絲氨酸的結合活性。 將Jurkat細胞在37℃,5%CO2培養箱中不用(藍色)或用1μM星形孢菌素(紅色)處理5小時,然后用Annexin V-mFluor Violet 450染色30分鐘。 使用FACSCalibur(Becton Dickinson,San Jose,CA)流式細胞儀,使用紫外激光在Ex / Em = 405 / 450nm下測量膜聯蛋白V-mFluor Violet 450的熒光強度。
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4.參考文獻
Resources-Application Notes Phenotypic and Epigenetic Mechanism of Action Determinations of Histone Methylase and Demethylase Inhibitors using Digital Widefield Microscopy
Authors:?Brad Larson, Peter Banks
Journal:?Experimental Biology (2017)
Targeted Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia produces lysosomal reactive oxygen species and causes Caspase-1 dependent cell death
Authors:?Pascal Clerc, Pauline Jeanjean, Nicolas Halalli, Michel Gougeon, Bernard Pipy, Julian Carrey, Daniel Fourmy, Véronique Gigoux
Journal:?Journal of Controlled Release (2017)
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