篩選用抗生素

1. G418 Sulfate(Geneticin) 遺傳霉素

G-418遺傳霉素是一種結構類似于慶大霉素B1（Gentamycin B1）的氨基糖苷類抗生素，通過影響80S核糖體功能和阻斷延伸步驟來干擾蛋白合成，對原核和真核等細胞都有毒性，包括細菌、酵母、高等植物和哺乳動物細胞 ，也包括原生動物和蠕蟲。

G418篩選濃度：通常情況，哺乳動物細胞篩選范圍200-2000 μg/mL；植物細胞：10-100 μg/mL；酵母細胞：500-1000 μg/mL，通常用在實驗室研究中用于篩選基因工程細胞。

2. Puromycin Dihydrochloride (嘌呤霉素)

Puromycin dihydrochloride是一種氨基糖苷類抗生素，通過抑制蛋白質合成而殺死革蘭氏陽性菌，各種動物和昆蟲細胞。某種特殊情況下有效作用大腸桿菌。在原核細胞和真核細胞中，嘌呤霉素都是有效的翻譯抑制劑。嘌呤霉素作用迅速，在低濃度下即可快速導致細胞死亡。常用于篩選通過質粒轉染/轉化、病毒感染等方法能表達pac基因（puror）的真核或原核多克隆或單克隆細胞。嘌呤霉素亦可以用來篩選轉化攜帶pac基因質粒的大腸桿菌菌株。

嘌呤霉素篩選濃度：哺乳動物細胞一般對1-10 µg/mL濃度敏感，最佳濃度需要殺滅曲線來確定；LB瓊脂培養基篩選穩定轉化pac基因的大腸桿菌，使用濃度一般為125 µg/mL。

3. Hygromycin B 潮霉素B

潮霉素B（Hygromycin B）是一種氨基糖苷類抗生素，通過破壞易位和促進80S核糖體的錯譯來抑制蛋白質合成，常被用作真核細胞的選擇劑。主要用來篩選和維持培養穩定轉染Hph載體的原核細胞或真核細胞（植物細胞和哺乳動物細胞）。常與G418（Geneticin），Zeocin和Blasticidin S聯合使用進行雙抗性陽性細胞株的選擇。它的作用模式與Geneticin，Blasticidin S或Zeocin不同，所以非常適合在雙選實驗中與另一種選擇性抗生素結合使用。

潮霉素B用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型、培養基、生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000 μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線，即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。一般而言，哺乳動物細胞：50-500 μg/mL；細菌/植物細胞：20-200 μg/mL；真菌：300-1000 μg/mL。

4. Blasticidin S 殺稻瘟菌素S(滅瘟素)

Blasticidin S是一種核苷類抗生素，通過干擾核糖體中肽鍵的形成來特異性地抑制原核和真核生物的蛋白質合成。用于篩選攜帶brs或BSD抗性基因的轉染細胞。

Blasticidin S具有快速而強效的作用效果，在很低的抗生素濃度下便能導致細胞快速死亡。大腸桿菌通常對50-100 μg/mL的濃度敏感，而哺乳動物細胞對低至1-50 µg/mL的濃度敏感，通常可在不到一周的時間內即可形成具有Blasticidin S抗性的穩定哺乳動物細胞系。Blasticidin S通常使用濃度為10 μg/mL。

5. 鹽酸博來霉素

鹽酸博來霉素是從Streptomyces verticillus中分離的水溶性、銅離子螯合糖蛋白抗生素。

鹽酸博來霉素作用譜非常廣，其對細菌，真菌（包括酵母菌）、植物和哺乳動物細胞都有很強的抗菌活性，因此鹽酸博來霉素常用作一種非常有效的工具抗生素，用來篩選攜帶Sh ble抗性基因并能穩定表達分子量為13.665 kDa的一種鹽酸博來霉素抗性蛋白的細胞株。鹽酸博來霉素篩選濃度：大腸桿菌（E. coli）：25-50 µg/mL，用低鹽LB培養基篩選（NaCl濃度不能超過5 g/L)；哺乳動物細胞：50-1000 µg/mL，根據細胞選擇合適的培養基。

6. Timentin 特美汀

特美汀對革蘭陽性菌、陰性菌、需氧及厭氧菌的抗菌范圍甚廣，多種革蘭氏陽性菌（G+）和陰性菌（G-）都能產生β-內酰胺酶，這類酶能在青霉素作用于病原體之前將其破壞，在科研中常用于抑制農桿菌生長，特別在胚性愈傷組織再生系統中，能達到很好的抑菌和再生效果。

抑制用抗生素

1. 硫酸博來霉素（Bleomycin sulfate）

硫酸博來霉素是一種糖肽類抗生素，是DNA損傷劑，能抑制DNA合成，作用譜很廣，對細菌、真菌（包括酵母菌）、植物和哺乳動物細胞都有很強的抗菌活性，因此常用作一種非常有效的工具抗生素，也可用作轉化細胞的選擇劑，特別是對于植物細胞的轉化。

在氧和金屬離子（尤其是銅和鐵）的存在下，博萊霉素形成一種誘導DNA裂解的偽酶。

Bleomycin sulfate作用于鱗狀細胞癌，400 µg/mL培養24小時，會降低NTera-2細胞的活性，增加caspase-3，-8和-9的活性，增加Bax和細胞質細胞色素C水平，并降低Bcl-2水平。暴露于Bleomycin sulfate的細胞處理10天后，端粒融合體的外觀表明Bleomycin sulfate能夠誘導延遲的端粒失穩。

2. Wortmannin渥曼青霉素

Wortmannin是一種真菌代謝物，選擇性的PI3K抑制劑，IC50為3 nM，可抑制自噬體的形成，通過抑制PI3K/Akt信號轉導級聯通路，Wortmannin增強了輻射或血清饑餓誘發的細胞凋亡以及阻斷細胞因子介導的抗凋亡效應。大鼠脂肪細胞中，wortmannin能夠阻斷胰島素受體激活的許多短期代謝活動，而且不會影響胰島素受體酪氨酸激酶活性。與LY188011聯合使用時，Wortmannin顯著提高細胞凋亡，并抑制腫瘤生長。

3. Staurosporine (Antibiotic AM-2282,Stsp) 星孢菌素

Staurosporine，又稱星形孢菌素，是一種強效的、ATP競爭性激酶抑制劑，有效抑制PKC活性，在大鼠腦組織實驗中，IC50為2.7 nM。Staurosporine強效抑制PKC-α，除此之外，Staurosporine還抑制PKA、PKG、p60v-src酪氨酸蛋白激酶和鈣調蛋白激酶II等。Staurosporine抑制多種人癌細胞增殖，主要作用表現為誘導癌細胞G2/M期阻斷，調整G1期阻斷，并誘導細胞凋亡。另外，Staurosporine具有多種生物學作用，如細胞毒性、松弛平滑肌和調節eNOS基因表達等。

4. Trichostatin A 曲古柳菌素A

Trichostatin A（TSA，曲古柳菌素A）是一種有效的組蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制劑，也是一種具有細胞抑制和分化特性的抗真菌抗生素，選擇性、有效抑制HDAC活性（IC50≈1.8 nM）。TSA抑制哺乳動物細胞生長和分化，對癌細胞具有非常高的選擇性，抑制多種癌細胞增殖，包括MCF-7、T-47D和ZR-75-1等，并引起組蛋白H4高度乙?；Ａ硗?，TSA具有抗炎癥和神經保護作用。

5. Actinomycin D放線菌素D 

Actinomycin D放線菌素D（更生霉素），是一種從鏈霉菌屬的土壤細菌中的分離的多肽抗生素，與雙鏈DNA結合形成穩定復合物，從而抑制DNA修復，還會導致DNA的單鏈斷裂，抑制RNA的合成，作用于mRNA干擾細胞的轉錄過程，還可使細胞周期停滯在G1期，進而抑制細胞增殖。放線菌素D可提高放射敏感性，與放射治療同時使用，可提高腫瘤對放射的敏感性。

6. Mitomycin C絲裂霉素C

Mitomycin C（絲裂霉素C, Ametycine）是一種抗腫瘤類抗生素，也是DNA交聯劑(DNA cross-linking agent)，通過抑制DNA合成發揮作用，誘導DNA損傷，可用于癌癥治療。Mitomycin C是一種ADC毒性分子(ADC Cytotoxin)，可誘導半胱氨酸蛋白酶依賴性和Fas/CD95非依賴性的凋亡 (Apoptosis) 作用。

調節細胞用抗生素

1. Ionomycin,Free Base 離子霉素,游離酸

離子霉素(Ionomycin)，一種聚醚類窄譜抗生素，有效作用于G+菌。常用作一種有效的鈣離子載體，高度選擇性結合鈣離子(Ca2+ >Mg2+ >>Sr2+=Ba2+)，通過直接刺激鈣池調控鈣內流(Store- operated calcium entry)跨越生物膜而增強鈣離子內流。離子霉素可動員細胞內鈣離子存儲，提高胞內鈣離子水平，常作為一種工具用以鈣離子介導的細胞內信號通路研究。

細胞信號通路研究中，Ionomycin常與PMA (Cat# 50601ES)聯合使用刺激細胞產生細胞因子，以及與蛋白轉運抑制劑如Monensin(Cat# 50501ES)和Brefeldin A(Cat# 50502ES、50504ES)連用研究細胞因子在細胞內的滯留等。

2. Brefeldin A 布雷非德菌素A

Brefeldin A，簡稱BFA，一種常用的可逆性蛋白轉運抑制劑，是一種真菌代謝產物，可破壞高爾基體的結構并抑制其功能，進而特異地阻斷蛋白質從內質網(ER)向高爾基體(Golgi)的轉運。BFA 可抑制coat proteins（如β-COP and ADP-ribosylation factor (ARF)）與高爾基體的結合并抑制GDP-GTP交換。

Brefeldin A也常被用于抑制細胞因子等蛋白的分泌，并用于增強分泌蛋白的免疫染色檢測。Brefeldin A可激活神經鞘磷脂循環(sphingomyelin cycle)，還可誘導一些腫瘤細胞發生凋亡。

其他常用抗生素合集