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| NMT作為生命科學底層核心技術，是建立活體創新科研平臺的必備技術。2005年~2020年，NMT已扎根中國15年。2020年，中國NMT銷往瑞士蘇黎世大學，正式打開歐洲市場。 |
基本信息
主題：納米銅毒理評價新體系——活體斑馬魚皮膚細胞排氫排銨速率
期刊：Chemosphere
影響因子：5.778
研究使用平臺：NMT斑馬魚創新科研平臺
標題：Exposure to copper nanoparticles impairs ion uptake, and acid and ammonia excretion by ionocytes in zebrafish embryos
作者：臺灣師范大學林豊益、Chih-Ying Lee
檢測離子/分子指標
H+、NH4+
檢測樣品
斑馬魚胚胎皮膚離子細胞
摘要
銅納米顆粒（CuNPs）對魚類早期階段的潛在毒性尚不清楚，關于其對離子細胞及相關功能的影響也知之甚少。本研究使用斑馬魚胚胎作為模型來研究CuNPs對兩種亞型離子細胞的毒性作用。斑馬魚胚胎暴露在0.1、1和3 mg L-1?CuNPs中96 h。暴露后，≥0.1 mg L-1時全身Na+和Ca2+含量顯著降低，而≥1 mg L-1時K+含量降低。當≥1 mg L-1時，皮膚分泌的H+和NH4+明顯減少。當CuNPs≥0.1 mg L-1時，用若丹明-123標記的活離子細胞數量顯著減少。用免疫組織化學法標記富含H+-ATPase（HR）和富含Na+/K+-ATPase（NaR）的離子細胞亞型在≥1 mg L-1時呈下降趨勢。通過掃描電子顯微鏡發現離子細胞的頂端開口的收縮。功能損傷還反映在基因表達的變化上，包括離子轉運蛋白/通道和Ca2+調節激素。該研究表明，CuNPs暴露可損害斑馬魚胚胎中兩種亞型的離子細胞及其相關功能，包括Na+/Ca2+吸收和H+/NH4+分泌。
離子/分子流實驗處理方法
納米銅顆粒（CuNPs）處理斑馬魚胚胎96 h
使用非損傷微測技術（NMT）檢測斑馬魚胚胎皮膚離子細胞對H+和NH4+的分泌。
林豊益《NMT在斑馬魚離子細胞的應用：從生理到環境毒理》
如圖1A所示，H+和NH4+分泌水平通過計算卵黃囊和背景溶液之間（距離10 mm）的濃度梯度（Δ[H+]和Δ[NH4+]）來測量。先前的研究表明卵黃囊皮膚中有豐富的離子細胞，其測量值可以反映離子細胞的功能。胚胎暴露于CuNPs 96 h后，1和3 mg L-1CuNPs組的H+和NH4+分泌水平被顯著抑制（圖1B, C）。H+分泌減少了29%（1 mg L-1）和30%（3 mg L-1）。NH4+分泌減少了47%（1 mg L-1）和61%（3 mg L-1）。
圖1.?斑馬魚胚胎暴露于CuNPs 96 h后的H+和NH4+分泌
其他實驗結果
CuNPs處理會使斑馬魚胚胎Na+、K
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