核酸提取—我們是認真的
核酸提取大致分為3大部分:破碎、提取、純化。核酸提取是其中很重要的一個環節,核酸模板的質量很大程度上決定了下游PCR檢測結果的準確性。在目前的分子診斷實驗室當中,磁珠法提取和硅膠膜離心柱法提取是最常用的兩種提取方法。那么,這兩種提取方法各有什么特點?提取流程與原理又是什么呢?
柱式篇
硅膠膜離心柱法原理:硅膠膜表面的硅醇基團呈弱酸性,其水化后帶負電。當溶液中存在一定濃度的陽離子后,形成的陽離子橋能夠中和DNA和硅醇基團之間的表面負電荷,從而使DNA牢固地吸附在硅膠膜表面。反之,處于低鹽水溶液狀態下時,由于硅膠膜的硅醇基團與DNA磷酸基團之間的靜電排斥,硅膠膜釋放DNA。
硅膠膜離心柱法核酸提取流程:

硅膠膜離心柱法提取特點:
1、實驗流程操作簡單
2、價格低廉
3、提取濃度效果好,濃度高。
翌圣生物根據不同樣本的提取方法提供了不同的產品選擇:
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分類 |
樣本類型 |
產品名稱/貨號 |
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多類型樣本 |
動物細胞、組織、常規植物樣本 |
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各類液體樣本 |
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醫療樣本 |
細胞、組織 |
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血液、血清、血漿 |
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拭子類 |
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醫療樣本中及培養物中的病毒 |
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植物樣本 |
常規植物樣本 |
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細菌樣本 |
細菌培養物 |
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真菌樣本 |
真菌培養物 |
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宏基因組樣本 |
土壤中的全微生物 |
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糞便中的全微生物 |
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質粒樣本 |
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DNA產物 |
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Yeasen柱式核酸提取試劑盒數據展示:
1.MolPure? Cell/Tissue DNA Kit 細胞/組織DNA提取試劑盒(18700ES)
適用樣本類型
各類動物的肝臟、肌肉等臟器或培養細胞
產品特點
得率高:產量高達40 μg
DNA純度高:無蛋白質和RNA污染,可直接用于PCR、酶切和雜交等實驗
快速簡便:無需傳統乙醇沉淀標準操作,全程30min可完成單個樣本核酸提取
安全環保:無需使用酚、氯仿等有機物抽提
下游應用
動物基因型鑒定、基因克隆等
應用案例
MolPure? Cell/Tissue DNA Kit可用于小鼠基因組提取
取等量的小鼠不同組織,使用MolPure? Cell/Tissue DNA Kit和T品牌同類產品提取基因組DNA,50 μL ddH2O洗脫。并取1 μL洗脫液作為模板,進行擴增實驗。結果顯示,MolPure? Cell/Tissue DNA Kit提取產量高,提取產物對下游擴增實驗無干擾,可有效擴增4 kb基因。

圖1. 瓊脂糖電泳判定提取的基因組產量

圖2. 瓊脂糖電泳檢測小鼠2 kb和4 kb的擴增條帶
2.MolPure? Plant DNA Kit 植物DNA提取試劑盒(18800ES)
產品信息
MolPure? Plant DNA Kit采用MolPure? DNA Column P1和新型的溶液體系。提取過程不需要用到有毒的酚、氯仿等有機物抽提,也不需要用到耗時的異丙醇或乙醇沉淀。操作簡便,可在30 min內完成植物樣品(100 mg新鮮植物組織或20 mg干燥植物樣本)的DNA提取和純化工作。試劑盒內的MolPure? DNA Column P1可選擇性吸附核酸,不吸附蛋白質、多糖和其它非核酸類物質,得到的DNA純度高,可直接用于PCR、酶切和雜交等實驗。
適用樣本類型
擬南芥、小麥、水稻、大豆、玉米、煙草、棉花等植物葉片、根莖、種子等;不建議用于復雜多糖多酚,次級代謝產物多的植物
產品特點
適用性廣:可從多種植物樣品中提取基因組DNA
DNA純度高:無蛋白質和RNA污染,可直接用于酶切、PCR、文庫構建等實驗
快速簡便:操作過程30 min即可完成
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