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核酸提取—我們是認真的

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2022-07-06T09:23 (訪問量:3457)

核酸提取—我們是認真的

核酸提取大致分為3大部分:破碎、提取、純化。核酸提取是其中很重要的一個環節,核酸模板的質量很大程度上決定了下游PCR檢測結果的準確性。在目前的分子診斷實驗室當中,磁珠法提取和硅膠膜離心柱法提取是最常用的兩種提取方法。那么,這兩種提取方法各有什么特點?提取流程與原理又是什么呢?

柱式篇

硅膠膜離心柱法原理:硅膠膜表面的硅醇基團呈弱酸性,其水化后帶負電。當溶液中存在一定濃度的陽離子后,形成的陽離子橋能夠中和DNA和硅醇基團之間的表面負電荷,從而使DNA牢固地吸附在硅膠膜表面。反之,處于低鹽水溶液狀態下時,由于硅膠膜的硅醇基團與DNA磷酸基團之間的靜電排斥,硅膠膜釋放DNA。

硅膠膜離心柱法核酸提取流程:


71.png

硅膠膜離心柱法提取特點:

1、實驗流程操作簡單

2、價格低廉

3、提取濃度效果好,濃度高。

翌圣生物根據不同樣本的提取方法提供了不同的產品選擇:

分類

樣本類型

產品名稱/貨號

多類型樣本

動物細胞、組織、常規植物樣本

總RNA提取試劑(同TRIzol)(10606ES)

總RNA提取試劑盒(帶離心柱)(19211ES)

各類液體樣本

液體總RNA提取試劑(同TRIzol LS)(19201ES)

醫療樣本

細胞、組織

細胞/組織DNA提取試劑盒(18700ES)

海洋動物DNA提取試劑盒(18725ES)

微量樣本DNA提取試劑盒(18780ES)

細胞/組織總RNA提取試劑盒(19221ES)

培養細胞RNA提取試劑盒(19231ES)

細胞/組織miRNA提取試劑盒(19331ES)

血液、血清、血漿

血液DNA提取試劑盒(18730ES)

血液/血清RNA提取試劑盒(19241ES)

血清/血漿miRNA提取試劑盒(19332ES)

拭子類

拭子樣本DNA提取試劑盒(18790ES)

醫療樣本中及培養物中的病毒

病毒DNA/RNA提取試劑盒(19321ES)

植物樣本

常規植物樣本

植物DNA提取試劑盒(18800ES)

多糖多酚植物DNA提取試劑盒(18801ES)

植物RNA提取試劑盒(19291ES)

多糖多酚植物RNA提取試劑盒(19292ES)

細菌樣本

細菌培養物

細菌DNA提取試劑盒(18806ES)

細菌RNA提取試劑盒(19301ES)

真菌樣本

真菌培養物

真菌DNA提取試劑盒(18812ES)

宏基因組樣本

土壤中的全微生物

土壤DNA提取試劑盒(18815ES)

糞便中的全微生物

糞便DNA提取試劑盒(18820ES)

質粒樣本

質粒小量提取試劑盒(19001ES)

無內毒素質粒小量提取試劑盒(19021ES)

無內毒素質粒大量提取試劑盒(19036ES)

DNA產物

瓊脂糖凝膠回收試劑盒(19101ES)

PCR產物純化試劑盒(19106ES)

Yeasen柱式核酸提取試劑盒數據展示:

1.MolPure? Cell/Tissue DNA Kit 細胞/組織DNA提取試劑盒(18700ES)

適用樣本類型

各類動物的肝臟、肌肉等臟器或培養細胞

產品特點

得率高:產量高達40 μg

DNA純度高:無蛋白質和RNA污染,可直接用于PCR、酶切和雜交等實驗

快速簡便:無需傳統乙醇沉淀標準操作,全程30min可完成單個樣本核酸提取

安全環保:無需使用酚、氯仿等有機物抽提

下游應用

動物基因型鑒定、基因克隆等

應用案例

MolPure? Cell/Tissue DNA Kit可用于小鼠基因組提取

取等量的小鼠不同組織,使用MolPure? Cell/Tissue DNA Kit和T品牌同類產品提取基因組DNA,50 μL ddH2O洗脫。并取1 μL洗脫液作為模板,進行擴增實驗。結果顯示,MolPure? Cell/Tissue DNA Kit提取產量高,提取產物對下游擴增實驗無干擾,可有效擴增4 kb基因。

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圖1. 瓊脂糖電泳判定提取的基因組產量

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圖2. 瓊脂糖電泳檢測小鼠2 kb和4 kb的擴增條帶

2.MolPure? Plant DNA Kit 植物DNA提取試劑盒(18800ES)

產品信息

MolPure? Plant DNA Kit采用MolPure? DNA Column P1和新型的溶液體系。提取過程不需要用到有毒的酚、氯仿等有機物抽提,也不需要用到耗時的異丙醇或乙醇沉淀。操作簡便,可在30 min內完成植物樣品(100 mg新鮮植物組織或20 mg干燥植物樣本)的DNA提取和純化工作。試劑盒內的MolPure? DNA Column P1可選擇性吸附核酸,不吸附蛋白質、多糖和其它非核酸類物質,得到的DNA純度高,可直接用于PCR、酶切和雜交等實驗。

適用樣本類型

擬南芥、小麥、水稻、大豆、玉米、煙草、棉花等植物葉片、根莖、種子等;不建議用于復雜多糖多酚,次級代謝產物多的植物

產品特點

適用性廣:可從多種植物樣品中提取基因組DNA

DNA純度高:無蛋白質和RNA污染,可直接用于酶切、PCR、文庫構建等實驗

快速簡便:操作過程30 min即可完成

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