?英文名稱：Calcein Red? AM
產品參數：
Ex (nm)?????562???????Em (nm)??????576
分子量??????1015.79???溶劑??????????DMSO
存儲條件????在零下15度以下保存, 避免光照
產品規格 ???1mg
產品貨號 ???21900
產品概述：
鈣黃綠素紅,AM是美國AAT Bioquest生產的用于檢測活細胞的熒光探針，Calcein AM是用于標記和檢測活細胞細胞功能的流行的熒光探針之一。
然而，Calcein AM的單色使得在多色應用中不可能使用這種有價值的試劑。
例如，由于與GFP相同的顏色，不可能將Calcein AM與GFP-轉化細胞組合使用。
為了解決Calcein AM的這種顏色限制，我們開發了Calcein Orange ，Calcein Red 和Calcein Deep Red 。
這些新的Calcein AM類似物與Calcein AM結合使用，可以對活細胞進行多色標記和功能分析。
非熒光Calcein Red AM可以輕松進入活細胞并水解產生強熒光Calcein Red 染料?？梢允褂贸Ｒ姷腡RITC / Cy3濾波片組檢測Calcein Red 染料。
???????百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優質的鈣黃綠素紅,AM。?
光譜：



2.適用儀器
流式細胞儀
Ex:532/561 nm
Em：585/40? ?nm?
熒光顯微鏡
Ex:???????TRITC 濾波片組
Em：????TRITC 濾波片組
推薦孔板:?黑色透明底板

熒光酶標儀
Ex:540 nm
Em：590 nm
Cutoff：570 nm
推薦孔板:黑色透明底板
讀取模式：底讀模式

3.實驗方案：
操作步驟
1.準備HHBS緩沖液，10％Pluronic?F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高質量無水DMSO中制備2 mM至5 mM Calcein Red AM原液。
2.1使用Calcein Red AM的量：1毫克
2.2所需濃度：2 mM
2.3在合適的容器中，將1mg Calcein Red TM AM與492.23μL無水DMSO混合。
3.使用10μMCalceinRed AM 4在HHBS中制備2X工作溶液，0.08％Pluronic?F-127和2 mM丙磺舒。
3.1終孔內濃度的Calcein Red AM：5μM
3.2Pluronic?F-127的終井內濃度：0.04％
3.3終孔內濃度的丙磺舒：1mM
3.4在合適的容器中，混合16μL的Calcein Red AM，25.6μL的10％Pluronic F-127和256μL的25mM丙磺舒。然后，添加HHBS或您選擇的緩沖液，直到體積為3.2 mL。
注意：對于大多數細胞系，我們建議Calcein Red AM的終度為4至5μM。
注意：推薦的Pluronic F-127孔濃度為0.02％至0.04％。
注意：推薦的濃度為1至2.5 mM的Probenecid。
?
4.將100μL染料工作溶液加入已經含有100μL培養基的所需孔中。
4.1該步驟將染料工作溶液從2X稀釋至1X，并將每種組分的終濃度調節至以下：5μM的Calcein Red AM，0.04％Pluronic F-127,1mM丙磺舒。
5.孵育染料
5.1將染料加載板在細胞培養箱中孵育20-60分鐘。
5.2將染料加載板在室溫下孵育30分鐘。
6.用1.0 mM Probenecid準備HHBS緩沖液（或您選擇的緩沖液）。
6.1在合適的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。然后，添加HHBS或您選擇的緩沖液，直到體積為4 mL。
7.用HHBS緩沖液或您選擇的緩沖液替換染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，從所需孔中除去200μL染料工作溶液和培養基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您選擇的緩沖液）。?
8.運行實驗
8.1為您的樣品添加所需的處理。
8.2以Ex / Em = 560/574 nm運行實驗

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