世界首富已入mRNA疫苗賽道，這里的事你需要知道！
據(jù)中新網(wǎng)1月9日報(bào)道：德國默克并購AmpTec以增強(qiáng)mRNA研發(fā)和生產(chǎn)能力[1]，在此之前，有“鋼鐵俠”之稱的埃隆·馬斯克（Elon Musk）在接受美國知名媒體訪談時(shí)表示mRNA疫苗技術(shù)是醫(yī)學(xué)的未來。在今年9月馬斯克就被媒體爆出拜訪CureVac討論特斯拉為其建設(shè)RNA微工廠的事宜。新進(jìn)世界首富和傳統(tǒng)老牌疫苗廠家都競相加入mRNA疫苗賽道。
mRNA疫苗是將RNA在體外進(jìn)行相關(guān)的修飾后傳遞至機(jī)體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)并產(chǎn)生蛋白抗原，從而導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對該抗原的免疫應(yīng)答，進(jìn)而擴(kuò)大機(jī)體的免疫能力[2,3]。mRNA疫苗是第三代的疫苗類型，是繼滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗、DNA疫苗后新型的疫苗技術(shù)路線。與其他類型的疫苗相比，mRNA疫苗具有安全、高效、生產(chǎn)便捷、開發(fā)周期短等優(yōu)點(diǎn)，具有極大的發(fā)展?jié)摿ΑＪ褂?/font>mRNA藥物來指導(dǎo)患者自身的細(xì)胞產(chǎn)生可以預(yù)防、治療疾病的蛋白，可應(yīng)用于蛋白替換療法、腫瘤免疫以及傳染病疫苗領(lǐng)域。
圖：Timeline of some key discoveries and advances in the development of mRNA-based drug technology [4]
mRNA疫苗體外開發(fā)流程包括mRNA體外合成和修飾、純化等操作。由于RNA的不穩(wěn)定性，完整的mRNA結(jié)構(gòu)有利于mRNA的穩(wěn)定性和表達(dá)能力。在體外合成的mRNA添加一些基本結(jié)構(gòu)元件才能達(dá)到與真核細(xì)胞mRNA相似的效果，如在其蛋白編碼的開放閱讀框(ORF) 5’端添加m7GPPPN結(jié)構(gòu)即7-甲基鳥苷帽子結(jié)構(gòu)和3’端poly(A)尾以促進(jìn)mRNA的穩(wěn)定性。其中5’端加帽是重要的過程，此過程常應(yīng)用酶學(xué)法加帽如牛痘病毒加帽酶（Vaccinia Capping Enzyme）。
圖：A typical mRNA construct with supporting untranslated regions, poly(A) tail, and an optional signal peptide sequence attached to the coding sequence[5]
翌圣生物作為國內(nèi)分子酶產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新領(lǐng)導(dǎo)者，通過先進(jìn)的分子酶雙向技術(shù)平臺、大規(guī)模蛋白發(fā)酵純化技術(shù)平臺，提供低殘留和高效加帽的Vaccinia Capping Enzyme（牛痘病毒加帽酶），經(jīng)過GMP工藝生產(chǎn)獲得，完全滿足疫苗生產(chǎn)所需，并提供其他mRNA疫苗相關(guān)的酶類和試劑。
翌圣生物GMP級別Vaccinia Capping Enzyme
|
檢測項(xiàng)目 |
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) |
檢測方法 |
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活性 |
甲基轉(zhuǎn)移酶活性≥1×104U/mL |
高效液相反相柱層析法 |
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蛋白含量 |
≥0.1mg/mL |
BCA法 |
|
蛋白純度 |
≥95% |
SDS-PAGE還原膠 |
|
核酸外切酶 |
陰性 |
參照內(nèi)部方法 |
|
切口酶 |
陰性 |
參照內(nèi)部方法 |
|
RNA酶 |
符合要求 |
參照內(nèi)部方法 |
|
細(xì)菌內(nèi)毒素 |
符合要求 |
凝膠法 |
|
宿主蛋白 |
陰性 |
ELISA法 |
|
宿主DNA |
陰性 |
Q-PCR法 |
|
無菌檢查 |
無菌生長 |
通則1101 |
|
病原體檢查 |
陰性(不得檢出) |
參照內(nèi)部方法 |
|
支原體檢查 |
陰性(不得檢出) |
支原體檢測試劑盒 |
注：具體質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)及數(shù)據(jù)參考具體批次COA
加帽效率測定
質(zhì)譜測定兩種酶的加帽效率，并與對照品的酶加帽效率進(jìn)行對比，可以發(fā)現(xiàn)翌圣的加帽效率較高，獲得的產(chǎn)物的純度也較高。
對照組Cap0 實(shí)驗(yàn)組Cap0
殘留檢測
分別檢測Rnase、核酸酶、切口酶、大腸桿菌DNA殘留，經(jīng)檢測結(jié)果顯示，成品無相關(guān)酶的殘留，且表達(dá)的宿主DNA殘留也達(dá)到了使用要求標(biāo)準(zhǔn)。
RNase殘留檢測 核酸酶殘留檢測
切口酶殘留檢測 宿主DNA殘留檢測
翌圣生物作為分子酶領(lǐng)域創(chuàng)新領(lǐng)導(dǎo)者，專注為您提供高品質(zhì)的分子酶產(chǎn)品及mRNA疫苗相關(guān)試劑，為您的mRNA疫苗研究和生產(chǎn)開發(fā)提供更多選擇和方便。
相關(guān)產(chǎn)品
|
產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
|
UCF.METM mRNA Vaccinia Capping Enzyme GMP-grade |
10614ES84/92 |
2000/10000U |
|
UCF.METM mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase GMP-grade |
10612ES84/92 |
2000/10000U |
|
UCF.METM T7 RNA Polymerase GMP-grade（1 KU/μl） |
10613ES92/97 |
10/50KU |
|
UCF.METM Murine RNase inhibitor GMP-grade |
10621ES10/20 |
10/20 KU |
|
UCF.METM Pyrophosphatase,Inorganic GMP-grade |
10620ES10/60 |
10/100U |
|
UCF.METM DNase I , RNase-free ，GMP-grade |
10611ES76/84 |
500/2000U |
|
Hifair? T7 High Yield RNA Synthesis Kit |
10623ES50/60 |
50/100T |
|
S-adenosylmethionine (SAM) |
10619ES02 |
0.5ml |
|
GTP Solution(100mM) |
10132ES03 |
1ml |
|
NTP Set Solution(ATP, CTP, UTP, GTP, 100 mM each） |
10133ES03 |
1 Set (4 vial) |
【1】中新網(wǎng)https://www.chinanews.com/gj/2021/01-09/9382627.shtml
【2】苗鶴凡, 郭勇, 江新香. mRNA疫苗研究進(jìn)展及挑戰(zhàn)[J]. 免疫學(xué)雜志, 2016(05):446-449.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) Introduction to RNA Vaccines. In: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA Vaccines. Methods in Molecular Biology, vol 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Xu S, Yang K, Li R, Zhang L. mRNA Vaccine Era-Mechanisms, Drug Platform and Clinical Prospection. Int J Mol Sci. 2020;21(18):6582. Published 2020 Sep 9. doi:10.3390/ijms21186582
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