DTNB介紹及應用(DTNB Ellman’s Reagent)
產品描述:
DTNB為Ellman試劑。它用于比色法測定生物樣品中巰基。它易溶于水。在巰基化合物的存在下,無色的DTNB將被轉變成黃? 色的5-巰基-2-硝基苯甲酸。由于5-巰基-2-硝基苯甲酸在412 nm處具有最大吸收,DTNB的吸收光譜并不干擾巰基的測定。???
配置方法:
準確稱取0.198gDTNB用50mMNa2HPO4(pH=7.0)配制成50ml溶液,存放于棕色瓶中,于暗處低溫保存?zhèn)溆谩撟⒁獾氖桥渲镁彌_、濃度,儲存時要避免見光。??????
應用舉例:
???? ?半胱氨酸中自由巰基的定量檢測方法
?????? ?一、試劑的配制:
1、Tris-HCL緩沖液(0.25M):DDW準確配制后,用鹽酸調節(jié)pH=8.3;
2、半胱氨酸標準溶液(1mM):準確稱取0.017563gL-半胱氨酸(175.63),用1ml甲酸溶解,以DDW定容至100ml;
3、DTNB(分子量:396.35)標準溶液(10mM):準確稱取0.198175gDTNB用50mMNa2HPO4(pH=7.0)配制成50ml溶液,存放于棕色瓶中,于暗處低溫保存?zhèn)溆茫?/SPAN>
4、DTNB分析溶液(0.1mM):由1體積10mMDTNB標準液加99體積0.25M的Tris緩沖液配制而成,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二、標準曲線的制作;
1、25℃條件下,用Tris緩沖液稀釋半胱氨酸標準液配成梯度的稀釋液(5.0ml),其濃度分別為:0.00mM、0.025mM、0.05mM、0.1mM、0.15mM、0.2mM;
2、取上述各濃度溶液1ml分別加入到5ml預先恒溫于25℃水中的DTNB分析溶液,搖勻,準確靜止10min,立即于波長412nm處測定吸光度值(A)。根據(jù)目的蛋白的吸光度在標準曲線上讀出對應的濃度即可
前塵公司提供的DTNB相關參數(shù):
Product Name:DTNB
Product Number:D8130
Product Brand:Sigma
CAS Number:69-78-3
Molecular Formula:[-SC6H3(NO2)CO2H]2
Molecular Weight:396.35
APPEARANCE:YELLOW POWDER
SOLUBILITY:CLEAR YELLOW TO YELLOW-GREEN SOLUTION
AT 40MG PLUS 5ML OF ETHANOL
IR SPECTRUM:CONSISTENT WITH STRUCTURE
PURITY BY THIN LAYER CHROMATOGRAPHY:NLT 98%
SUITABILITY:SUITABLE FOR USE AS A REAGENT IN SULFHYDRYL
GROUP DETERMINATION
RECOMMENDED RETEST:5 YEARS
??? 5g售價優(yōu)惠價:558??? 原料廠家和經(jīng)銷商,量大請直接聯(lián)系:13918775203
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