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磁珠法核酸提取常見問題及原因分析

作者:蘇州為度生物技術有限公司 2018-12-06T16:54 (訪問量:19793)

一、磁珠殘留
原因:(1)磁珠:粒徑小、表面基團松散、磁含量低; (2)設備:磁分離方式、磁場弱;(3)操作:參數設置不合適。
解決辦法:(1)篩選、替換匹配的磁珠; (2)更換磁珠 (3)放慢磁介入速度并延長吸附時間。

二、磁珠結塊
原因:(1)微球吸附過多雜質(蛋白、脂質、多糖); (2)微球粒徑太小;(3)洗滌完畢,乙醇干燥時間過長。
解決辦法:(1)優化裂解液、結合液配方; (2)選擇粒徑較大的微球;(3)縮短干燥時間。

三、純度差
原因:(1)裂解不充分; (2)微球分散性不好; (3)微球吸附能力太強。
解決辦法:(1)優化試劑裂解液配方; (2)篩選合適粒徑及表面的磁珠;(3)磁珠表面鈍化處理。

四、得率低
原因:(1)磁珠吸附能力較弱; (2)磁珠洗脫效率較弱;(3)提取試劑(pH、鹽、醇)與磁珠不匹配
解決辦法:(1)改變表面基團種類及密度; (2)減少干燥時間、加熱洗脫;(3)優化試劑配方。

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