產品簡介：
??? 對微量的雙鏈DNA進行定量在各種生物學應用中都顯得非常重要。例如cDNA文庫的構建，亞克隆的DNA
片段的純化，定量DNA擴增產物，在藥物中DNA分子殘留的測定等。檢測核酸濃度最常用的方法就是檢測
核酸再260nm (A260)處的光吸收，此方法主要的缺點是單鏈核酸和單核苷酸會產生干擾信號，核酸樣品中的雜質也會影向結果。光吸收不能區分DNA和RNA，靈敏度也相對較低（用1cm的比色杯在A260值為0.1時相對應的雙鏈DNA濃度為5μg/mL）。Peko Green(TM) 染料是一種新型的dDNA染料。其檢測靈敏度高，可檢測到pg級DNA。檢測范圍寬，可跨越4個數量級。特異性好，基本不受ssDNA和RNA的影響，并且可以耐受一定濃度的鹽，尿素，已醇，氯仿，去垢劑，蛋白等干擾。目前使用Peko Green(TM) 染料定量檢測DNA已經廣泛用于生物學檢測。

光學性質:
激發波長= 502 nm
發射波長= 523 nm

實驗方法：
1. 試劑準備
Peko Green是以1毫升的濃縮液形式保存在無水DMSO（二甲基亞砜）中。實驗當天，配制2x Peko
Green試劑的工作溶液,用1xTE液（10mM的Tris-HCl，1mM EDTA中，pH值為7.5）按1:200的比例稀釋濃縮液。如果要準備好足夠的工作液檢測20個樣品，可在20毫升1xTE加入100mL Peko Green dsDNA定量試劑。由于試劑容易吸附到玻璃表面，要在一個塑料容器中配制。Peko Green試劑容易光降解，所以應將配好的溶液用箔包主或放置暗處避光保存。

溶液最好在配制數小時內使用，以保證最佳結果。
2.DNA標準曲線
* 標準品工作液的配制：Sigma小牛胸腺DNA干粉（貨號：D4522-1MG）1mg (Tris,
NaCL等濃度已成標準體系)，加入1mL雙蒸水，配制成1mg/mL的標準工作液。
* 標準品工作液的稀釋：
* 母液稀釋：取10mL(1mg/mL) 標準品工作液加入到990
mLTE溶液中，稀釋成10mg/mL。再取10mL（10mg/mL）標準品工作液加入到990
mLTE溶液中，稀釋成100ng/mL。
* 倍比稀釋：取800mL(100ng/mL) 標準品工作液加入到200
mLTE溶液中，稀釋成80ng/mL（藥典規定：熒光染色方法DNA含量在。25-
80ng/mL范圍線性較好，此方法DNA檢出限為0.3ng/mL）。再取500mL（80ng/mL）標準品工作
液加入到500
mLTE溶液中，濃度稀釋到40ng/mL。然后按倍比稀釋成20ng/mL，10ng/mL，5ng/mL，2.5ng/m
L，1.25ng/mL，0.625ng/mL的標準品溶液，見表1。
1標準品工作液及樣品排續在一個實心的黑色96孔板*
S0 DS0? …. ….
樣品 樣品
S1? DS1? …. …. …. ….
S2? DS2
S3? DS3
S4? DS4
S5? DS5
S6 DS6
S7 DS7注: DS= 標準品工作液從0到40ng/mL平行樣品。
雙鏈DNA樣品分析：
* 倍比稀釋后的各梯度標準品溶液，樣品，和染料工作液各取100mL混勻，避光室溫放置5分鐘見表1。
備注: 如果用 384孔板, 則倍比稀釋后的各梯度標準品溶液，樣品，和染料工作液各取25mL即可。
* 用熒光酶標儀在激發/發射波長= 490/525 nm（截止波長為510 nm）檢測熒光強度。
* 樣品DNA 含量可根據標準品曲線算出。
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