細胞治療如何逆境前行
近年來腫瘤的免疫治療取得了巨大進步，尤其是嵌合體抗原受體修飾T細胞(Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy, CAR-T)技術在治療白血病、神經膠質瘤、淋巴瘤、神經母細胞瘤等惡性腫瘤，取得了較大的成果。
CAR-T技術治療腫瘤的步驟包括提取患者T細胞，進行體外基因轉染操作將腫瘤相關抗原的單鏈抗體表達于T細胞膜表面，在體外擴增CAR-T 細胞，并回輸CAR-T細胞到患者體內對腫瘤進行殺傷。來自耶魯大學的Patrick等科學家則將這一技術更加推動一步，十分巧妙的設計和合成了模擬抗體類似特性的化合物SyAM-P，該化合物一端可以結合到前列腺癌細胞表面抗原PSMA，一端結合免疫細胞表面FcγRI，通過這種方式可以使免疫細胞靶向殺傷前列腺癌細胞，如圖1所示。
圖1. 抗體特性模擬化合物
當SyAM-P引導單核細胞靶向前列腺癌細胞后，單核細胞通過吞噬效應進行前列腺癌細胞的殺傷。與傳統流式不同的是，Amnis可以結合圖像清晰的觀察到效應免疫細胞對腫瘤細胞的吞噬過程，如圖2所示。其中Target為綠色熒光標記的前列腺癌細胞，Effector為紅色熒光標記的單核細胞，圖2上方是單核細胞已經完成對前列腺癌細胞吞噬后的細胞圖像，可見綠色的前列腺癌細胞位于單核細胞內部，而圖2下方則是單核細胞正在進行吞噬過程的細胞圖像，可見單核細胞與前列腺癌細胞之間吞噬杯的形成。
圖2. 在SyAM-P的作用下，單核細胞對前列腺癌細胞進行吞噬，上圖為吞噬完成后，下圖為吞噬過程中吞噬杯的形成
在另一項研究中，來自美國Medimmune公司的M Jack Borrok等科學家發現賦予人表皮生長因子Her2-IgG1 FcαRI 以提高抗體依賴性細胞介導的細胞毒性。他們利用成像流式Amnis觀察到Celltrace violet （活細胞紫色熒光染料）標記的巨噬細胞對CFSE （活細胞綠色熒光染料）標記的乳腺癌靶細胞進行吞噬的過程，并對吞噬比例進行統計。如圖3所示，在散點圖中可以看見，1為紫色熒光標記的單個吞噬細胞，2為早期吞噬過程中的巨噬細胞和乳腺癌靶細胞，3為吞噬完成的巨噬細胞和乳腺癌靶細胞，4為綠色熒光標記的巨噬細胞。通過成像流式細胞儀Amnis的分析，可以很好的評價改造后抗體對提升吞噬細胞吞噬腫瘤細胞的能力。
圖3. 利用成像流式Amnis評價抗體改造前后吞噬細胞對腫瘤細胞的吞噬能力
利用成像流式Amnis讓腫瘤免疫治療研究更加生動，富有樂趣，流式細胞儀的快速靈敏和成像分析的大數據則讓文章充滿亮點，喜歡的科學家快動手吧，讓成像流式Amnis成為您科研的好幫手。
參考文獻：
Patrick J. et al. Chemically Synthesized Molecules with the Targeting and Effector Functions of Antibodies. J. Am. Chem. Soc. 2014, 136 (52), 18034–43
M Jack Borrok, et al. Enhancement of antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity by endowing IgG with FcαRI (CD89) binding, mAbs, (2015) 7:4, 743-751