上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院的研究團隊通過檢測尿液蛋白質(zhì)組（吉凱助力），發(fā)現(xiàn)了成人斯蒂爾病的新型生物標(biāo)志物，并進一步分析了這些蛋白標(biāo)志物與AOSD臨床表現(xiàn)的相關(guān)性。文章以“Urinary Proteomics Identifying Novel Biomarkers for the Diagnosis of Adult-Onset Still’s Disease” 為標(biāo)題，發(fā)表在Frontiers in Immunology （影響因子：7.561）上。本研究為成人斯蒂爾病的無創(chuàng)診斷提供了新的機會。
1. 前期小樣本探索
AOSD組（實驗組）：3個（15個患者，每5個患者的尿液混為1個樣本）
HC組(健康對照組)：3個（15個健康個體，每5個健康個體的尿液混為1個樣本）
特別提示：對于這種發(fā)病原因不明的全身性疾病，體液樣本（如血清、血漿、尿液等）是良好的研究用樣本。
2. ELISA驗證及生物標(biāo)志物有效性分析
（1）驗證蛋白：LRG1、ORM1、ORM2（在尿液蛋白質(zhì)組結(jié)果中前三上調(diào)的蛋白）
（2）驗證隊列仍采用尿液，分組信息：
AOSD組：70個患者
HC組：50個健康人
其他組：24個類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）患者、27個腫瘤(neoplasm)患者和14個有感染的(infection)患者。
3. 分析上調(diào)前三的尿液蛋白與疾病的相關(guān)性
（1）尿液蛋白LRG1、ORM1、ORM2和病理參數(shù)的相關(guān)性
（2）尿液蛋白LRG1、ORM1、ORM2和臨床表現(xiàn)的相關(guān)性
（3）尿液蛋白LRG1、ORM1、ORM2和血清細(xì)胞因子的相關(guān)性
研究結(jié)果
1. 尿液蛋白質(zhì)組學(xué)揭示了能區(qū)分AOSD患者和HC組的特征蛋白
AOSD組和健康對照組（HC）的尿液蛋白質(zhì)組比較共分析得到92個差異蛋白（fc>2,p<0.05），其中上調(diào)蛋白71個，下調(diào)蛋白21個。這些差異蛋白又分為59個功能性蛋白和33個未知功能蛋白。59個功能蛋白富集在固有免疫系統(tǒng)和中性粒細(xì)胞脫顆粒通路，此外還富集在血小板脫顆粒通路。GO分析發(fā)現(xiàn)差異蛋白中有26個蛋白是分泌蛋白。此外，蛋白-蛋白相互作用分析顯示上調(diào)前三的蛋白LRG1、ORM1和ORM2有強相互作用關(guān)系。
2. ELISA驗證及生物標(biāo)志物有效性分析
對尿液蛋白質(zhì)組上調(diào)前三的蛋白LRG1、ORM1、ORM2在更大規(guī)模的尿液樣本中進行ELISA驗證。結(jié)果顯示，AOSD患者尿液LRG1水平高于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者、腫瘤和健康個體。AOSD患者尿液ORM1和ORM2蛋白水平明顯高于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者、腫瘤、感染和健康個體。此外，作者分析了這幾個蛋白作為疾病診斷標(biāo)志物的有效性。LRG1、ORM1和ORM2的AUC分別為0.700、0.837和0.736，三個蛋白構(gòu)成的標(biāo)志物組合的AUC為0.838。這三種尿液蛋白，特別是ORM1，可作為AOSD的診斷標(biāo)志物。
3. 上調(diào)前三的蛋白與疾病的相關(guān)性
（1）尿液蛋白LRG1、ORM1、ORM2和病理參數(shù)的相關(guān)性
結(jié)果表明，LRG1、ORM1和ORM2的水平與疾病的系統(tǒng)性評分呈正相關(guān)。此外，LRG1、ORM1和ORM2的水平與紅細(xì)胞沉降率（ESR）相關(guān)。LRG1與天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶水平以及ORM2與丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶水平均呈正相關(guān)。
（2）尿液蛋白LRG1、ORM1、ORM2和臨床表現(xiàn)的相關(guān)性
結(jié)果表明，淋巴結(jié)病、肺炎、胸膜炎患者的尿液LRG1水平升高，心包炎和肺炎患者的尿液ORM1水平升高。
（3）尿液蛋白LRG1、ORM1、ORM2和血清細(xì)胞因子的相關(guān)性
細(xì)胞因子風(fēng)暴是AOSD的標(biāo)志，因此作者分析了AOSD患者尿液LRG1、ORM1、ORM2水平和血清細(xì)胞因子（包括IL-1β，IL-6、IL-18和TNF-α）之間的相關(guān)性。結(jié)果表明，尿液LRG1水平與IL-1β、IL-6和IL-18呈正相關(guān)；尿液中ORM1水平與IL-1β水平呈正相關(guān)。該結(jié)果意味著，AOSD患者尿液中的LRG1和ORM1水平與AOSD的炎癥條件相關(guān)。
研究總結(jié)
本研究通過比較成人斯蒂爾病患者（AOSD）和健康對照個體的尿液蛋白質(zhì)組學(xué)發(fā)現(xiàn)，異常表達(dá)蛋白主要富集在固有免疫系統(tǒng)和中性粒細(xì)胞脫顆粒途徑。蛋白組學(xué)分析表明LRG1、ORM和ORM2蛋白在AOSD患者尿液中高表達(dá)，并進一步通過ELISA在大樣本規(guī)模中得到驗證。生物標(biāo)志物分析表明，ORM1的生物標(biāo)志物潛質(zhì)更高。此外，作者發(fā)現(xiàn)尿液中LRG1、ORM1和ORM2水平與疾病系統(tǒng)性評分及紅細(xì)胞沉降率呈正相關(guān)；尿液中LRG1水平與IL-1β、IL-6和IL-18水平呈正相關(guān)，而尿液中ORM1水平月IL-1β呈正相關(guān)。總體，作者的研究確定了新的無創(chuàng)和簡單的用于篩查成人斯蒂爾病的尿液標(biāo)志物。
吉凱助力
做蛋白組學(xué)·?找吉凱
吉凱基因憑借多年在靶標(biāo)篩選及驗證服務(wù)領(lǐng)域的技術(shù)積累，建立的標(biāo)準(zhǔn)化 、工程化 、系統(tǒng)化的GRP平臺，為中國研究型醫(yī)生提供科研服務(wù)，加快科研成果轉(zhuǎn)化。其中，蛋白質(zhì)組學(xué)平臺擁有多臺timsTOF Pro、Exploris 480高精度質(zhì)譜儀，專業(yè)的Spectronaut Plusar、Mascot等分析軟件，提供專業(yè)的4D、DIA、TMT、PRM、磷酸化修飾組等檢測服務(wù)，強大的機器學(xué)習(xí)算法、IPA分析、蛋白基因組分析服務(wù)，系統(tǒng)的生物標(biāo)志物、分子分型、藥物靶點、基因功能研究等解決方案，真正讓廣大研究型醫(yī)生的科研工作更省心、更省力、更高效。更多實驗服務(wù)請訪問我們的官網(wǎng)：www.genechem.com.cn
上海吉凱基因醫(yī)學(xué)科技股份有限公司
地址：上海張江高科技園區(qū)愛迪生路332號
郵編：201203
全國熱線：4006210302
售前顧問：18616237127；18616759206
郵箱：service@genechem.com.cn
官網(wǎng)：www.genechem.com.cn