一、分子生物學常用貯存液的配制

??????1、30%丙烯酰胺溶液

【配制方法】將29g丙烯酰胺和1g N,N'-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補加水至終體積為100ml.用濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，查證該溶液的pH值應不大于7.0,置棕色瓶中保存于室溫。

【注意】丙烯酰胺具有很強的神經毒性并可以通過皮膚吸收，其作用具累積性。稱量丙烯酰胺和亞甲雙丙烯酰胺時應戴手套和面具?？烧J為聚丙烯酰胺無毒，但也應謹慎操作，因為它還可能會含有少量未聚合材料。

一些價格較低的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺通常含有一些金屬離子，在丙烯酰胺貯存液中加入大約0.2體積的單床混合樹脂（MB-1Mallinckrodt），攪拌過夜，然后用Whatman 1號濾紙過濾以純化之。

在貯存期間，丙烯酰胺和雙丙烯酰胺會緩慢轉化成丙烯酰和雙丙烯酸。

????? 2、40%丙烯酰胺

【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA測序級）和20g N,N'-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為600ml的蒸餾水中。繼續按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法處理，但加熱溶解后應以蒸餾水補足至終體積為1L.

【注意】見上述配制30%丙烯酰胺的說明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列測定。

????? 3、放線菌素D溶液

【配制方法】把20mg放線菌素D溶解于4ml 100%乙醇中，1:10稀釋貯存液，用100%乙醇作空白對照讀取OD440值。放線菌素D（分子量為1255）純品在水溶液中的摩爾消化系數為21,900，故而1mg/ml的放線菌素D溶液在440nm處的吸光值為0.182,放線菌素D的貯存液應放在包有箔片的試管中，保存于-20℃。

【注意】放線菌素D是致畸劑和致癌劑，配制該溶液時必須戴手套并在通風櫥內操作，而不能在開放在實驗桌面上進行，謹防吸入藥粉或讓其接觸到眼睛或皮膚。

藥廠提供的作治療用途的放線菌素D制品常含有糖或鹽等添加劑。只要通過測量貯存液在440nm波長處的光吸收確定放線菌素D的濃度，這類制品便可用于抑制自身引導作用。

?????4、0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液

【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH調至pH值至7.0,用蒸餾水定容1ml,分裝成小份保存于-70℃

???? 5、10mol/L乙酸酰溶液

【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后過濾除菌。

6、10%過硫酸銨溶液

【配制方法】把1g過硫酸銨溶解于終量為10ml的水溶液中，該溶液可在4℃保存數周。

7、BCIP溶液

【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二鈉鹽（BCIP）溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃

8、2×BES緩沖鹽溶液

【配制方法】用總體積90ml的蒸餾水溶解1.07g鹽溶液BES[N,N-雙（2-羥乙基）-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na₂HPO₄，室溫下用HCl調節該溶液的pH值至6.96、然后加入蒸餾水定容至100ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成小份，保存于-20℃。

9、1mol/L CaCl₂溶液

【配制方法】在200ml蒸餾水中溶解54g CaCl₂·6H₂O，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成10ml小份貯存于-20℃。

【注意】制備感受態細胞時，取出一小份解凍并用蒸餾水稀釋至100ml,用Nalgene濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，然后驟冷至0℃。

10、2.5mol/L CaCl₂溶液

【配制方法】在20ml蒸餾水中溶解13.5g CaCl₂·6H₂O，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于-20℃。

11、1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）溶液

【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸鈉溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT,過濾除菌后分裝成1ml小份貯存于-20℃。

【注意】DTT或含有DTT的溶液不能進行高壓處理。

12、脫氧核苷三磷酸（dNTP）溶液

【配制方法】把每一種dNTP溶解于水至濃度各為100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris堿分別調節每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH試紙檢測），把中和后的每種dNTP溶液各取一份作適當稀釋，在下表中給出的波長下讀取光密度計算出每種dNTP的實際濃度，然后用水稀釋成終濃度為50mmol/L的dNTP,分裝成小份貯存于-70℃。

比色杯光徑為1cm時，吸光度=εM。

13、0.5mol/l EDTA（pH8.0）溶液

【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-Na·2H₂O），在磁力攪拌器上劇烈攪拌，用NaOH調節溶液的pH值至8.0（約需20g NaOH顆粒）然后定容至1L，分裝后高壓滅菌備用。

【注意】EDTA二鈉鹽需加入NaOH將溶液的pH值調至接近8.0，才能完全溶解。

14、溴化乙錠（10mg/ml溶液）

【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙錠，磁力攪拌數小時以確保其完全溶解，然后用鋁箔包裹容器或轉移至棕色瓶中，保存于室溫。