流式檢測——抗體的選擇-其它資料-資訊-生物在線

流式檢測——抗體的選擇

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2016-07-22T00:00 (訪問量:9351)

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常用熒光素:FITC,PE,PE-Cy5 為目前流式細胞儀的常用熒光染料
熒光素的搭配主要由3個因素決定
1)???????? 流式細胞儀能檢測多少個通道:
標配的FACSCalibur只有一根488nm的激光,能做FL1、FL2FL3三個熒光通道/三個顏色;
而選配的Calibur配有488nm635nm兩根激光,可以檢測FL1-FL4四個通道。
2)???????? 需要同時檢測多少個指標:
一般3個或4個,常用的搭配是FITC(FL1)+PE(FL2)+PerCP(FL3)+APC(FL4)
3)???????? 廠家的抗體有多少種熒光標記
2.同型對照的選擇
一般選擇與一抗的成分完全相同種屬來源、相同亞型和亞鏈、相同熒光標記的抗體,如抗人的CD56 APC標記的抗體,Mouse IgG, k;則同型對照是APC標記的Mouse IgG, k。
如果是純化的抗體+熒光標記二抗,那么應該選擇一抗的同型對照。
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