細胞活性檢測除了CCK8和MTT外還有一個XTT檢測方法哦！
細胞活性檢測XTT法是一種檢測細胞增殖和活性的方法。其檢測原理是：XTT是一種與MTT類似的四唑氮衍生物，可被活細胞線粒體脫氫酶還原成水溶性的棕色甲肷產物。當XTT與電子耦合共同使用時，甲肷的生成量與細胞的增殖程度呈正相關。
在細胞活性檢測實驗中，將XTT試劑和電子偶聯試劑按一定比例混合后，加入到待測細胞中，然后進行孵育。在孵育過程中，活細胞會將XTT試劑還原成甲肷產物，而死細胞則無法進行這種還原反應。通過檢測甲肷產物的生成量，可以判斷細胞的增殖程度和細胞活力。
使用XTT法進行細胞活性檢測具有操作簡便、靈敏度高、重復性好等優(yōu)點。同時，該方法對細胞毒性低，適用于各類哺乳動物細胞活性的檢測。
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試劑與材料：
（1） XTT：用60℃預熱培養(yǎng)液配制成6.6mmol/L，過濾除菌，現配現用；?
（2） 吩嗪二甲酯硫酸鹽（PMS）：用PBS配制成220mmol/L，4℃避光保存20天；?
（3） XTT/PMS：XTT與PMS按1：1混合（臨用時混合）。
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XTT法操作步驟：
（1）刺激增殖反應，按照一定比例將XTT試劑與電子耦合試劑混合，加入到細胞培養(yǎng)液中，繼續(xù)培養(yǎng)一定時間；
（2） 于終止培養(yǎng)前2h，每孔加入XTT/PMS 20μl，混勻后再培養(yǎng)2h；?
（3） 在酶標儀上450nm處測定光吸光度，參考波長為655nm。?
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【結果分析】?
計算SI：SI＝試驗孔OD均值/對照孔OD均值?
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XTT法操作注意事項：
（1）絲裂原的質量和活性是測定淋巴細胞增殖反應的關鍵因素。不同廠家的產品，質量、活性不同，其使用的最佳刺激量也不同，因而在實驗前，應事先確定其最佳刺激量。?
（2） 檢測T細胞增殖反應，絲裂原用PHA或ConA；B細胞增殖反應用LPS或SPA；T、B細胞增殖反應則用PWM。?
（3） 增殖反應的細胞應保持高活性，一般應≥95％。應用單抗分離制備的反應細胞因保存劑（如NaN3）或抗體的直接作用可抑制細胞的增殖。此外，增殖細胞的濃度過高或過低均不利于細胞生長。?
（4） 細胞培養(yǎng)液應無菌、無支原體污染，特別是小牛血清應加熱滅活補體，避免LPS或其他能促進細胞增殖物的污染。因此，實驗前應選擇本底低的小牛血清。用人"AB"型血清或自體血清也應加熱滅活補體。