B細胞在免疫發展中發揮中心作用。他們在骨髓中最初進入血液作為幼稚B細胞，其可以遷移到淋巴組織，諸如脾，淋巴結，扁桃體，為進一步發展，一些幼稚B細胞遷移到淋巴濾泡，其中生發中心B細胞可以分化成記憶B細胞和plasmablasts(PBS)/漿細胞(PC)的。雖然大多數PBS/PC最終進入血液，少數最終駐留在骨髓經受終端分化為長壽命的漿細胞。
先上B細胞的提取吧：
1. 靜脈取血 2ml，加入含肝素溶液(50ug／ml血樣本)的試管中，混勻，使血液抗凝。用 PBS溶液1：1稀釋。
2、吸取 2ml 淋巴細胞分離液（啟達生物，貨號：SD0059）置于刻度離心管中，然后將離心管傾斜 45°角，用毛細滴管將稀釋的全血沿管壁緩慢加至分離液上面，應注意保持兩者界面清晰。
3、在 18℃～20℃下，使用水平離心機以 1500r/min 離心 20min。
4、小心取出離心管，用1ml移液器緩慢吸取第二層淋巴細胞，配平再次離心，若有紅細胞，可多用PBS洗滌一次。
5、棄上清，將沉淀細胞懸于培養基中備用。
再來B細胞的純化：
(a) 取1mg羧基磁珠(約100μl磁懸液，取用前超聲充分混勻)于1.5ml Ep管中，渦旋振蕩5-10min；
(b)取適量磁珠懸液，用 20 倍體積的 PBS+0.2%BSA 溶液重懸細胞后，置磁架上 5min，待磁珠完全被吸附
備注：（磁珠與單個核細胞或全血的比例為：0.5mg 磁珠/1×107 個單個核細胞或 1ml 全血）;
（c)用移液器小心吸去上清，以去除在儲存過程中從磁珠上脫落的二抗。用 100ul PBS+0.2%BSA 溶液重懸磁珠。加入一抗（一抗與磁珠的比例為：5ug 一抗/1mg 磁珠）混合均勻，室溫條件，在樣品混合儀上活化30min
(D)加入 2ml PBS+1.2%BSA 溶液，再置磁架上 5min。吸去上清，以去除未與二抗結合的一抗。重復操作一次。用 100ul PBS+0.2%BSA 溶液重懸磁珠。
（E）用B細胞完全培養基（啟達生物，貨號：P3901)調整待分離細胞的濃度為 1×107 細胞/ml，將細胞加入磁珠懸液中，置室溫 15min，中間輕微晃動一次。然后置磁架上 10min。吸去上清。
(F)用B細胞完全培養基重懸磁珠結合的細胞后直接進行培養。
好啦，看下圖，B細胞提取成功啦！
Bcells 培養第一天 Bcells 培養第7天