HSV-2潛伏感染與復發
HSV-2（生殖器皰疹病毒）感染后，病毒會沿著神經到人體神經根部長期潛伏。藏身期間，病毒通過特定基因保持休眠，藥物也難以清除。當人免疫力下降、壓力大或生病時，病毒會被激活，順著神經重新返回皮膚，導致水皰復發（圖1）。首次感染后約90%的人一年內會復發，平均每年發作5-9次。免疫力越差（如艾滋病患者），復發越頻繁。病毒休眠時不產生新病毒，因此常規藥物無法徹底消滅它。
圖1.HSV病毒的感染形式
HSV-2豚鼠復發模型的評估
評估HSV-2豚鼠復發模型通常是單個水泡或紅色病變，在不同的時間段內可作為累積評分來衡量（圖2）。隨著時間的推移，病變的發生率逐漸降低，因此典型的觀察期為從急性期恢復后的7-8周，即15-64天或71天。類似地，可以通過獲得觀察動物復發性疾病期間陰道拭子來量化對復發性病毒脫落的影響。與人類一樣，存在或不存在生殖器病變的情況下都可能發生脫落。由于反復脫落是最重要的傳播來源，所以這是評估疫苗和其他干預措施的關鍵終點。推斷一種有效的疫苗或早期抗病毒干預措施將限制病毒在早期感染期間在DRG中的傳播和復制，這種減少將影響隨后的復發性疾病和復發性病毒的傳播。
圖2.顯示復發性病變的時間進程以平均復發性病變評分(line)表示，反復脫落的過程以PCR檢測HSV陽性的陰道拭子百分比表示
使用豚鼠作為HSV生殖器疾病動物的優勢
在眾多的HSV生殖器疾病動物模型中，豚鼠與人類疾病最為相似，在評價藥物、生物制劑和疫苗方面比其他小動物模型具有許多優勢。如自發性復發、無癥狀脫落及潛伏感染特征與人類HSV-2感染高度相似，可同時評估急性病變、病毒復制、潛伏載量及免疫反應等。
HSV中和抗體檢測服務流程
迪福潤絲生物中和抗體檢測是鑒定疫苗、抗體藥物等有效性的黃金標準，迪福潤絲生物自有的CRO服務平臺「DIFF+」可針對HSV疫苗及藥物進行評價，提供基于細胞病變效應法（Cytopathic Effect, CPE）的RSV中和抗體檢測服務（圖3），該檢測方法能夠與傳統的PRNT檢測方法建立線性相關性，靈敏度高、檢測迅速（24h即可出結果），實驗方法的特異性、重復性均能滿足中和實驗的要求，適用于高通量樣本的檢測。
圖3. HSV中和抗體檢測流程圖
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除中和抗體檢測外，迪福潤絲生物還可以提供豚鼠動物模型評價，進一步驗證疫苗或藥物在動物體內的抗病毒效果。
HSV-2豚鼠模型服務
迪福潤絲生物采用豚鼠進行HSV-2動物攻毒可產生明顯的體重變化（圖4）與病變（圖5），根據實際癥狀，設置了相應的評分標準，具體的案例模型評分如下（圖6）：
· 1分：生殖器紅腫并產生皰疹，
· 2分：多個皰疹融合成片，
· 3分：皰疹潰爛流膿，
· 4分：皰疹潰爛流膿發黑+大小便失禁，
· 5分：皰疹潰爛流膿發黑+大小便失禁+四肢無力或癱瘓，
圖4. HSV-2豚鼠攻毒體重變化（不同劑量攻毒）
圖5. HSV-2豚鼠攻毒實際癥狀變化
圖6. HSV-2豚鼠攻毒模型案例評分
HSV-2豚鼠攻毒毒株信息
迪福潤絲生物正在構建HSV-2豚鼠復發模型，預計今年6月完成。該模型通過免疫抑制、物理刺激精準模擬病毒潛伏-復發周期，可評估病變評分與病毒脫落動態，為抗病毒藥物及疫苗研發提供關鍵支持。相關科研服務即將開放，敬請期待！
參考文獻：
1.鄒暉.CTCF在HSV-2潛伏復發中結合位點的鑒定與驗證[D].華南理工大學. 2020.005105.
2.David I. Bernstein. Use of the Guinea pig model of genital herpes to evaluate vaccines and antivirals: Review. Antiviral Research. Volume 180,2020,104821, ISSN 0166-3542.
3.Nisha Dhanushkodi, Swayam Prakash1, Ruchi Srivastava1, et al. A Prime/Pull RR2/CXCL11Therapeutic Vaccine that Bolsters the Number and Function of Dorsal Root Ganglia Tissue-Resident HSV-Specific CD8+TRM Cells Protects Latently Infected Guinea Pigs from Recurrent Genital Herpes. Laboratory of Cellular and Molecular Immunology, Gavin Herbert Eye Institute, University of California Irvine, School of Medicine, lrvine, CA,92697.