HSV-2潛伏感染與復(fù)發(fā)
HSV-2（生殖器皰疹病毒）感染后，病毒會沿著神經(jīng)到人體神經(jīng)根部長期潛伏。藏身期間，病毒通過特定基因保持休眠，藥物也難以清除。當(dāng)人免疫力下降、壓力大或生病時，病毒會被激活，順著神經(jīng)重新返回皮膚，導(dǎo)致水皰復(fù)發(fā)（圖1）。首次感染后約90%的人一年內(nèi)會復(fù)發(fā)，平均每年發(fā)作5-9次。免疫力越差（如艾滋病患者），復(fù)發(fā)越頻繁。病毒休眠時不產(chǎn)生新病毒，因此常規(guī)藥物無法徹底消滅它。
圖1.HSV病毒的感染形式
HSV-2豚鼠復(fù)發(fā)模型的評估
評估HSV-2豚鼠復(fù)發(fā)模型通常是單個水泡或紅色病變，在不同的時間段內(nèi)可作為累積評分來衡量（圖2）。隨著時間的推移，病變的發(fā)生率逐漸降低，因此典型的觀察期為從急性期恢復(fù)后的7-8周，即15-64天或71天。類似地，可以通過獲得觀察動物復(fù)發(fā)性疾病期間陰道拭子來量化對復(fù)發(fā)性病毒脫落的影響。與人類一樣，存在或不存在生殖器病變的情況下都可能發(fā)生脫落。由于反復(fù)脫落是最重要的傳播來源，所以這是評估疫苗和其他干預(yù)措施的關(guān)鍵終點。推斷一種有效的疫苗或早期抗病毒干預(yù)措施將限制病毒在早期感染期間在DRG中的傳播和復(fù)制，這種減少將影響隨后的復(fù)發(fā)性疾病和復(fù)發(fā)性病毒的傳播。
圖2.顯示復(fù)發(fā)性病變的時間進程以平均復(fù)發(fā)性病變評分(line)表示，反復(fù)脫落的過程以PCR檢測HSV陽性的陰道拭子百分比表示
使用豚鼠作為HSV生殖器疾病動物的優(yōu)勢
在眾多的HSV生殖器疾病動物模型中，豚鼠與人類疾病最為相似，在評價藥物、生物制劑和疫苗方面比其他小動物模型具有許多優(yōu)勢。如自發(fā)性復(fù)發(fā)、無癥狀脫落及潛伏感染特征與人類HSV-2感染高度相似，可同時評估急性病變、病毒復(fù)制、潛伏載量及免疫反應(yīng)等。
HSV中和抗體檢測服務(wù)流程
迪福潤絲生物中和抗體檢測是鑒定疫苗、抗體藥物等有效性的黃金標(biāo)準(zhǔn)，迪福潤絲生物自有的CRO服務(wù)平臺「DIFF+」可針對HSV疫苗及藥物進行評價，提供基于細(xì)胞病變效應(yīng)法（Cytopathic Effect, CPE）的RSV中和抗體檢測服務(wù)（圖3），該檢測方法能夠與傳統(tǒng)的PRNT檢測方法建立線性相關(guān)性，靈敏度高、檢測迅速（24h即可出結(jié)果），實驗方法的特異性、重復(fù)性均能滿足中和實驗的要求，適用于高通量樣本的檢測。
圖3. HSV中和抗體檢測流程圖
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除中和抗體檢測外，迪福潤絲生物還可以提供豚鼠動物模型評價，進一步驗證疫苗或藥物在動物體內(nèi)的抗病毒效果。
HSV-2豚鼠模型服務(wù)
迪福潤絲生物采用豚鼠進行HSV-2動物攻毒可產(chǎn)生明顯的體重變化（圖4）與病變（圖5），根據(jù)實際癥狀，設(shè)置了相應(yīng)的評分標(biāo)準(zhǔn)，具體的案例模型評分如下（圖6）：
· 1分：生殖器紅腫并產(chǎn)生皰疹，
· 2分：多個皰疹融合成片，
· 3分：皰疹潰爛流膿，
· 4分：皰疹潰爛流膿發(fā)黑+大小便失禁，
· 5分：皰疹潰爛流膿發(fā)黑+大小便失禁+四肢無力或癱瘓，
圖4. HSV-2豚鼠攻毒體重變化（不同劑量攻毒）
圖5. HSV-2豚鼠攻毒實際癥狀變化
圖6. HSV-2豚鼠攻毒模型案例評分
HSV-2豚鼠攻毒毒株信息
迪福潤絲生物正在構(gòu)建HSV-2豚鼠復(fù)發(fā)模型，預(yù)計今年6月完成。該模型通過免疫抑制、物理刺激精準(zhǔn)模擬病毒潛伏-復(fù)發(fā)周期，可評估病變評分與病毒脫落動態(tài)，為抗病毒藥物及疫苗研發(fā)提供關(guān)鍵支持。相關(guān)科研服務(wù)即將開放，敬請期待！
參考文獻：
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3.Nisha Dhanushkodi, Swayam Prakash1, Ruchi Srivastava1, et al. A Prime/Pull RR2/CXCL11Therapeutic Vaccine that Bolsters the Number and Function of Dorsal Root Ganglia Tissue-Resident HSV-Specific CD8+TRM Cells Protects Latently Infected Guinea Pigs from Recurrent Genital Herpes. Laboratory of Cellular and Molecular Immunology, Gavin Herbert Eye Institute, University of California Irvine, School of Medicine, lrvine, CA,92697.