一步法合成高得率、低雙鏈RNA(dsRNA)的加帽mRNA
TriLink的CleanCap® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT 試劑盒包含通過體外轉(zhuǎn)錄 (IVT) 生產(chǎn) mRNA 所需的所有組分，并采用 CleanCap® 共轉(zhuǎn)錄加帽技術(shù)。該試劑盒整合了創(chuàng)新的 mRNA 技術(shù)，可顯著提升實驗結(jié)果。
試劑盒中的核心組分CleanCap AG (3′ OMe)可產(chǎn)生 Cap 1 mRNA，其體內(nèi)活性優(yōu)于由傳統(tǒng)共轉(zhuǎn)錄加帽方法(如 ARCA)產(chǎn)生的 Cap 0 mRNA。此外，與酶法加帽相比，使用 CleanCap AG (3′ OMe) 進(jìn)行加帽，可提供更簡化和高效的 mRNA 生產(chǎn)流程。
三大優(yōu)勢：
1?? 超過95%的加帽效率
采用 CleanCap® AG (3' OMe) (CleanCap® AG 的改良版本)進(jìn)行共轉(zhuǎn)錄加帽，用于提高蛋白表達(dá)，可一步高效地生成帶有Cap 1結(jié)構(gòu)的 mRNA 產(chǎn)物。
2?? mRNA產(chǎn)量提升高達(dá)2倍
按照 TriLink 的 CleanScript® IVT 針對高產(chǎn)率和低雙鏈 RNA (dsRNA) 進(jìn)行優(yōu)化過的方案合成mRNA，其產(chǎn)量可比標(biāo)準(zhǔn) IVT 方案提升高達(dá)兩倍，達(dá)到 10 mg/mL。
3?? dsRNA降低幅度高達(dá)85%
試劑盒中的酶混合物包含新型的 CleanScribe™ RNA 聚合酶，替代野生型 T7 RNA 聚合酶，可進(jìn)一步減少 dsRNA 的形成。
最大化 mRNA 產(chǎn)量，同時最小化 dsRNA 形成
圖一：按照 TriLink 的 CleanScript IVT 方案，在四種構(gòu)建體上獲得的 mRNA 產(chǎn)量均顯著高于標(biāo)準(zhǔn)方案，提升幅度高達(dá)兩倍，達(dá)到約10 mg/mL。
圖二：在 IVT 中使用 CleanScribe RNA 聚合酶替代野生型 (WT) T7 RNA 聚合酶后，通過 ELISA 檢測三種 mRNA 構(gòu)建體(無論是否含有 N1-甲基假尿苷 (N1MePsU) 修飾)的 dsRNA 形成量均顯著降低，可減少高達(dá)85%。
使用TriLink的IVT試劑盒，可獲得更穩(wěn)定的 mRNA
TriLink 的CleanCap AG (3' OMe) CleanScript IVT 試劑盒提供低 dsRNA 水平的 mRNA，可以最大程度減少由先天免疫系統(tǒng)激活引起的不良炎癥反應(yīng)，并增強(qiáng)蛋白表達(dá)。
圖三：在 A549-Dual® 細(xì)胞中，使用 CleanScribe RNA 聚合酶比使用 WT T7 RNA 聚合酶合成的 mRNA 引發(fā)的免疫應(yīng)答更低。Poly(I:C) 和 3p-hpRNA 為陽性對照。
圖四：使用CleanScribe RNA聚合酶合成的mRNA在A549細(xì)胞中表達(dá)的蛋白高于使用野生型T7 RNA聚合酶合成的mRNA。
訂購信息：
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產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
反應(yīng)規(guī)格 |
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CleanCap® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT Kit |
K-7413-25 |
25x100μL 或 125x20μL |
試劑盒中組分信息：
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Component |
Concentration |
Amount |
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CleanCap® Reagent AG (3′ OMe) |
100mM |
10µmol |
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Adenosine-5′-Triphosphate |
100mM |
100µmol |
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Cytidine-5′-Triphosphate |
100mM |
100µmol |
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Guanosine-5′-Triphosphate |
100mM |
100µmol |
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Uridine-5′-Triphosphate |
100mM |
100µmol |
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N1-Methyl-Pseudouridine-5′-Triphosphate |
100mM |
100µmol |
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AG CleanScribe™ RNA Polymerase Mix |
10X |
250µL |
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10X AG CleanScript™ IVT Buffer |
10X |
1mL |
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FLuc Control Plasmid |
0.5µg/µL |
25µg |
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