【免疫染色技術】IHC, ICC & IF的區分-技術前沿-資訊-生物在線

【免疫染色技術】IHC, ICC & IF的區分

作者:StressMarq 2015-07-29T02:22 (訪問量:95471)

??? 免疫組織化學、免疫細胞化學和免疫熒光是生物學中經常用到的三種應用,他們的英文名分別是Immunohistochemistry (IHC),Immunocytochemistry (ICC) Immunofluorescence (IF)。對于實驗室新手來說可能是很容易搞混的,即便是技術大拿們可能在寫英文文獻的時候也會不小心用錯,因為這三個應用確實有些相似,那么下面就隨小編一起來看一下他們到底區別在哪里吧。

詞根意義:

Immuno-指的是免疫技術 (例如,抗體和抗原的結合)

Histo-指的是組織(細胞以及它周圍的細胞外基質)

Cyto-指的是細胞(不包含細胞外的基質)

Chemistry-在這里指的是化學檢測方法(例如,顏色的變化)

Fluorescence-對被激發的熒光團的檢測

????? 對于這三個應用,有一個部分大家肯定不會搞混的就是“免疫-”,因為這三個應用都涉及到使用抗體,問題出在當你使用熒光劑來標記一抗或者使用熒光標記二抗的時候。IHCICC應用用中文來看很好區分,一個應用的樣本類型是組織(IHC),另一個樣本類型是細胞(ICC),可是一旦使用了熒光標記,大家似乎就有點不知道該用哪個了,因為免疫熒光指的就是使用了熒光標記,這時就很容易只寫一個IF,而不去寫明到底是組織(IHC)還是細胞(ICC)。這也是為什么小編個人不太喜歡用免疫熒光(IF)來作為一個應用命名的原因,因為免疫熒光不能提供給你足夠的信息,只是告訴讀者你用了熒光劑,可是這個一抗到底是用在組織上的還是細胞上的呢?所以小編認為,應用了熒光劑的IHCICC應該更名為IHFICF分別意為Immunohistofluorescence(免疫組織熒光)和Immunocytofluorescence(免疫細胞熒光),雖然這兩個詞匯在英文文獻中應用的還不是很廣泛,但絕對不是小編自己杜撰的哦,已經有些學者在使用了,規范化應該也只是時間的問題,現在來看幾幅圖片更好的區分他們吧!

先不看答案,你能看出這些分別是什么應用嗎?

A. IHC (免疫組織化學) 使用小鼠抗HCN1單克隆抗體 (SMC-304) 對小鼠小腦的免疫組化分析. 固定: 室溫下10% 福爾馬林溶液處理 12-24小時. 一抗: 小鼠抗HCN1單克隆抗體, 1:1000, 室溫下孵育1小時. 二抗: HRP/DAB 檢測系統:生物素偶聯的山羊抗小鼠, 鏈霉親和素過氧化物酶, DAB 色原 (棕色), 室溫下孵育30分鐘. 復染色: Mayer氏蘇木素 (紫色/藍色) 細胞核染色, 250-500uL, 室溫下5分鐘.

B. ICC(免疫細胞化學)使用小鼠抗Hsp70單克隆抗體 (SMC-100) 對小鼠熱休克的黑素瘤細胞的免疫細胞化學分析. 固定: 福爾馬林. 一抗: 小鼠抗Hsp70單克隆抗體, 1:1000, 室溫下隔夜孵育. 二抗: Biotin 山羊抗小鼠. 圖片來自: Dr. Ewa Malusecka, Maria Sklodowska-Curie Memorial Cancer Ceter and Inst. Of Oncology, Poland.

C. IHF (免疫組織熒光) 使用小鼠抗Neuroligin 4單克隆抗體 (SMC-469) 對小鼠齒狀回的免疫組織熒光分析. 固定: 甲醛固定石蠟包埋. 一抗: 小鼠抗Neuroligin 4單克隆抗體, 1:100. 二抗: FITC 山羊抗小鼠 (綠色). 復染色: DAPI (藍色) 細胞核染色, 1:1000. 圖片來自: Rachel Reith, NIH/NIMH.

D. ICF (免疫細胞熒光) 使用小鼠抗HO-1單克隆抗體 (SMC-131) 對人HeLa Cells的免疫細胞熒光分析. 固定: 室溫下2% 甲醛處理20分鐘. 一抗: 小鼠抗HO-1單克隆抗體, 1:100, 4℃下孵育12小時. 二抗: FITC 山羊抗小鼠 (

StressMarq 商家主頁

地 址: 加拿大

聯系人: 劉

電 話: 4008197199;010-59871930;027-84621823;4006-800-892;0755-8619668;024-86202344

傳 真: 123456

Email:hedyl@stressmarq.com

相關咨詢

新品A53T突變型α-突觸核蛋白五折促銷 (2019-03-14T02:13 瀏覽數:7971)

STRESSMARQ獨家TAU活性蛋白上線五折促銷 (2018-10-11T04:44 瀏覽數:8056)

StressMarq全球獨家活性α-突觸核蛋白 (2016-12-16T05:50 瀏覽數:9177)

【免疫染色技術】IHC, ICC & IF的區分 (2015-07-29T02:22 瀏覽數:95471)

選擇抗體,單克隆還是多克隆? (2015-07-16T03:33 瀏覽數:16219)

熱休克蛋白90α在急性白血病細胞中的高度表達 (2014-06-06T03:47 瀏覽數:7242)

StressMarq Biosciences熒光標記抗體,二抗終極替代 (2014-03-21T06:38 瀏覽數:7332)

ADVERTISEMENT