RAW264.7細胞，也被稱為小鼠單核巨噬細胞白血病細胞，常被用作研究巨噬細胞功能和生物學特性的模型，細胞可表現出與原發性巨噬細胞相似的功能。因此，RAW264.7細胞在多個研究領域中都有廣泛的應用：
Raw264.7細胞20X展示圖（啟達生物:CD0168）
1. **骨骼疾病研究**：RAW264.7細胞在體外可以對刺激產生反應，并隨后產生具有破骨細胞完全分化的特征的多核細胞。因此，它被廣泛用于研究骨骼疾病，如風濕性關節炎、骨質疏松癥、骨質溶解、牙周炎等。RAW264.7已被證明在RANKL誘導下容易分化為破骨細胞，使其成為破骨細胞生成研究的常用體外模型。
2. **炎癥研究**：RAW264.7細胞也是篩選抗炎活性物和研究炎癥最常用的體外研究模型。在誘導劑（如脂多糖LPS）的作用下，RAW264.7細胞會模擬炎癥反應，釋放或上調多種炎癥介質，如一氧化氮（NO）、環氧合酶-2（COX-2）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素6（IL-6）等。這使得RAW264.7細胞成為研究炎癥過程和開發抗炎藥物的寶貴工具。
3. **免疫學研究**：RAW264.7細胞還可以用于研究各種刺激物（如細菌、病毒、寄生蟲、細胞因子等）對巨噬細胞的影響，以及巨噬細胞在免疫反應中的作用。
4. **藥物篩選和毒理學研究**：RAW264.7細胞也被廣泛用于藥物篩選和毒理學研究，以評估藥物對巨噬細胞功能和生存能力的影響。
Raw264.7如何誘導成破骨細胞呢？
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破骨細胞誘導和檢測步驟
1. RAW264.7 細胞培養與接種的密度和梯度稀密會導致RAW264.7細胞生長迅速且容易分化，而狀態較好的RAW264.7細胞是誘導破骨細胞的關鍵。
,細胞復蘇后直到密度到90%以上并且換液后第二天發現培養基泛黃，立即終止細胞培養并開始傳代，使用瓶內發黃的培養基先輕輕吹打細胞，之后再用PBS吹打一次即可完全收集細胞，若瓶內還貼有不是橢圓形的細胞，一般棄之不用，因為這些raw264.7已經分化，不適合破骨誘導了。
2. RAW 264.7細胞生長較快，且誘導需要4天,誘導前密度梯度培養4天,將RAW264.7細胞按(0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50)x10 ^4/cm²”的密度接種到24孔板中，培養4天后用1%的甲苯胺藍染色觀察細胞生長狀態，找出RAW264.7細胞的最佳誘導密度。
3-1： TRAP 染色:根據密度梯度培養結果將RAW264.7細胞以5x10^3/cm²的密度接種到48孔板中,用50ng/ml的高濃度RANKL誘導破骨細胞，并于24、48、72、96小時分別進行TRAP染色，觀察破骨細胞形態變化。同樣密度將RAW264.7細胞接種到48孔板中，設置對照組與不同RANKL濃度誘導組，過夜貼壁后，對照組正常培養，未加任何處理，誘導組分別加用5、10、20、50ng/mI的RANKL誘導破骨細胞，每2天換液。4天后鏡下觀察到融合的破骨細胞取出48孔板，去除培養液，進行 TRAP 染色；
Raw264.7TRAP 染色，分別是4X,10X,100X拍攝
3-2:破骨細胞吸收功能檢測實驗 RAW264.7細胞以5x10^3/cm²的密度接種于24孔骨細胞培養板中，設立對照組與誘導組，對照組正常培養，未加任何處理，誘導組加20ng/ml的RANKL誘導破骨細胞，換液2天/次，誘導4天后拿出骨細胞培養板，移除培養液，dd水洗第1遍，加人4%的次氯酸鈉漂洗5min,移除次氯酸鈉，用dd水沖洗第2遍，加人1%的甲苯胺藍染色10min后，dd水洗第3遍，室溫晾干，光鏡下進行觀察拍照。
RAW264.7誘導成破骨細胞的甲苯胺藍染色
3-3：骨吸收實驗：RAW264.7細胞經誘導4天后骨細胞培養板上出現大量的圓形、橢圓形、不規則形狀的白色吸收瘢痕，對照組未見吸收瘢痕
對照組 誘導組
Raw264.7細胞炎癥模型構建
構建炎癥模型對RAW264.7細胞的形態沒有要求，終于不用在乎細胞是否長角了
1.細胞鋪板:以96孔板為例，選擇生長狀況良好的小鼠巨噬細胞RAW264.7消化，離心后重懸計數，選擇合適的細胞濃度稀釋(2~3x10^4/孔)
2、鋪板:將重懸好的細胞液倒入加樣槽中，吹打細胞，混勻加樣，每孔加入100 ul，2~3列加樣后重新吹打均勻(細胞易沉降)，邊緣孔每孔加入100ulPBS.
3、放入細胞培養箱，5 % CO2、37'C條件下繼續培養過夜
4、配藥:樣品A，配制10 mg/mL溶于1 mL無菌水;樣品：B.C，配制10mg/mL溶于1ml DMSO，分別用高糖DMEM(含10%FBS)稀釋成不同濃度(0.2、0.5、5.0、1.0和10ug/mL)
5、將96孔板過夜培養后將完全培養液倒出，按設置的濃度梯度加藥，每個濃度設置3個重復樣，培養 24 h。
6、將已加藥培養過夜(加藥時細胞接近平鋪滿孔底)的 96 孔板中培養基吸出，每個孔中加入50 μL亞甲基藍染液。
7、放入細胞培養箱孵育 1小時后取出，洗去亞甲基藍染色液。
8、測 OD 值:每孔加100ul洗脫液，培養液震蕩15 min，放入酶標儀，繼續.蕩3 min后595 nm 波長讀數。
9分析數據，需要先得出對照組的平均值，各個實驗數據/對照平均值x100%得出細胞存活率，算出各個數值之間的偏差，分析。
不同質量濃度脂多糖對RAW264.7細胞活力的影響
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