親和層析介質(zhì)
高效+簡單+快速



親和層析是應(yīng)用生物高分子與配基可逆結(jié)合的原理,將配基通過共價鍵牢固結(jié)合于載體上而制得的層析系統(tǒng)。這種可逆結(jié)合的作用主要是靠生物高分子對它的配基的空間結(jié)構(gòu)的識別。常用的生物親和關(guān)系有酶-底物、底物類似物、抑制劑、激活劑、輔因子,抗體-抗原,激素-受體蛋白、載體蛋白,外源凝集素-多糖、糖蛋白、細胞表面受體,核酸-互補核苷酸序列、組蛋白、核酸結(jié)合蛋白等,具有高效、簡單、快速的優(yōu)點,是當前最為理想的分離純化蛋白的方法。
博奧龍純化填料
高效+簡單+快速
蛋白純化是一項復(fù)雜的過程,包括粗分離、初步純化和精細純化等多個步驟。實驗方法包括抽提、沉淀、離心、層析等多種手段。博奧龍純化填料純化方式主要采用親和層析方式,它是以高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠為基質(zhì),通過化學(xué)偶聯(lián)方式或在天然蛋白的基礎(chǔ)上進行生物加工獲得穩(wěn)定配體,此層析介質(zhì)(基質(zhì)+配體組成)具有高流通、高載量、特異性優(yōu)良、耐壓等特點,可以在相對較高的流速下對目的蛋白進行純化。目前,博奧龍擁有蛋白A、蛋白G、蛋白L、YFP標簽、RFP標簽、MYC標簽、HA標簽、HIS標簽、離子交換、抗原親和等純化填料可供選擇,如下表所示:
純化填料測試效果
高效+簡單+快速

實驗小貼士
在對目標蛋白的特性或樣品成分不太了解,可嘗試幾種不同的純化方法:
一、使用最通用的凝膠過濾方法,選擇分離范圍廣泛的介質(zhì)如Superose、Sephacryl HR根據(jù)分子量將樣品分成不同組份。
二、用含專一配體或抗體的親和層析 介質(zhì)結(jié)合目標蛋白。也可用各種活化偶聯(lián)介質(zhì)偶聯(lián)目標蛋白的底物、受體等自制親和介質(zhì),再用以結(jié)合目標蛋白。一部即可得到高純度樣品。
三、大體積的樣品、常使用離子交換層析 加以濃縮及粗純化。高鹽洗脫的樣品,可再用疏水層析純化。疏水層析利用高鹽吸附、低鹽洗脫的原理,洗脫樣品又可直接上離子交換等吸附性層析。兩種方法常被交替使用于純化流程中。
