基孔肯雅熱疫情突襲
近期，廣東佛山出現一起輸入引起的基孔肯雅熱疫情。截至7月20日，佛山全市累計報告確診病例2285例。
信息來源：南方都市報
什么是基孔肯雅熱？
基孔肯雅熱是由基孔肯雅病毒（CHIKV）引起，通過伊蚊（俗稱花斑蚊）叮咬傳播的急性傳染病，各年齡段人群都有可能感染發病。健康人被帶毒蚊子叮咬后，病毒將在人體內潛伏1到12天，一般為3到7天。
病毒通過受感染蚊蟲叮咬侵入人體后，啟動皮膚感染階段（圖1）。首先感染皮膚駐留細胞，包括：真皮巨噬細胞、成纖維細胞、間充質基質細胞、朗格漢斯細胞等并在這些細胞內完成初期復制。后續病毒擴散至全身從而出現病癥（圖2）。
圖1.基孔肯雅病毒感染機制：皮膚感染階段
圖2.基孔肯雅病毒感染機制：全身擴散與癥狀演變
急性期(發病后0-10天):典型表現為突發高熱(39℃以上)、劇烈關節痛和皮疹。關節疼痛呈對稱性，主要累及腕、踝和指間關節，嚴重時導致活動障礙，約80%患者因此無法完成日?；顒印Ｆふ钔ǔＴ诎l熱后2-5天出現，多為斑丘疹（圖3），先見于軀干后蔓延至四肢。此期常伴肌痛、頭痛、惡心和極度乏力，部分患者出現淋巴結腫大。
慢性期(>3個月):約30-40%患者發展為慢性基孔肯雅關節炎（圖4），癥狀可持續數月甚至數年。腕關節和踝關節最常受累，影像學可見關節侵蝕性改變，類似類風濕關節炎。老年患者、 HLA-B27陽性者及存在基礎關節疾病者更易遷延為慢性。
圖3.急性感染期出現斑丘疹
圖4.慢性基孔肯雅關節炎
盡管基孔肯雅病毒已在多地區呈地方性流行，但目前國內尚無已上市可用疫苗。
迪福潤絲生物助力基孔肯雅熱病毒（CHIKV）創新藥研發，提供整合型解決方案
基孔肯雅熱假病毒中和抗體檢測
迪福潤絲生物提供基于CPE法的中和抗體檢測服務（圖5），該檢測方法靈敏度高、檢測迅速，并且該實驗方法的特異性、重復性均能滿足中和實驗的要求，適用于高通量樣本的檢測。
圖5. 基孔肯雅熱假病毒中和抗體檢測流程圖
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服務內容
表2.CHIKV血清中和抗體檢測服務
針對基孔肯雅熱假病毒的蛋白酶抑制劑篩選
新型基孔肯雅熱病毒蛋白酶抑制劑的發現對于抗基孔肯雅熱病毒藥物研發至關重要，其蛋白酶抑制劑靶點為nsP2半胱氨酸蛋白酶。在大量化合物中尋找CHIKV蛋白酶抑制劑的過程中，行業急需一種可實現無需活病毒參與的細胞水平的正向篩選方式，以助力新藥研發。
由迪福潤絲生物獨家開發的蛋白酶抑制劑篩選系統，可在細胞水平直接模擬病毒自然感染過程，杜絕漏篩和假陽性等情況。我們以檢測和篩選SARS—COV—2藥物為例，展示迪福潤絲生物開發的蛋白酶抑制劑篩選系統的一系列優勢：
1）最簡便
肉眼觀測
DIFF蛋白酶抑制劑篩選系統可通過肉眼直接觀察藥物反應的熒光變化（圖6），進行定性判斷。
圖6. SARS—COV—2陽性藥物GC376添加不同濃度SARS—COV—2的3CL蛋白酶抑制劑后24h,48h,72h細胞GFP表達情況
2）最準確
原理可靠
本系統基于特制質粒的共表達機制，以SARS—COV—2為例，結合重組綠色熒光蛋白（rGFP）和SARS—COV—2的3CL蛋白酶。在該系統中，rGFP序列中嵌入了3CL蛋白酶的特異性切割位點。當3CL蛋白酶功能正常時，會特異性裂解rGFP，導致其熒光功能喪失，熒光強度減弱。相反，當抑制劑有效抑制了3CL蛋白酶的活性時，rGFP無法被切割，維持其完整性并正常發出熒光，熒光強度增強（圖7）。藥物有效性與熒光強度成正相關，是一種更直觀的正向篩選方式。
圖7. DIFF蛋白酶抑制劑篩選系統原理圖
結果準確
系統實驗結果與真病毒檢測結果高度一致。使用活病毒進行檢測，GC376的IC50值為4.69μM；而采用DIFF篩選系統，IC50值為6.44μM，兩種方法測得的IC50值高度相近（圖8）。
圖8. 使用活病毒和DIFF篩選系統測得的IC50值
圖9. 添加不同濃度SARS—COV—2蛋白酶抑制劑72h后熒光檢測值
3）可進行高通量篩選
系統檢測的熒光值低而信噪比好，可聯合現有藥物庫，一周即可篩選1-10萬個基孔肯雅熱病毒藥物候選化合物，快速鎖定有效藥物（圖10）。
圖10. 高通量篩選操作示意圖
參考文獻：
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5.基孔肯雅熱急診診療與防控策略：急診醫生實戰手冊（2025最新版）