前沿進(jìn)展
目前以過繼性T細(xì)胞療法（ACT）和免疫檢查點(diǎn)阻斷（ICB）為代表的腫瘤免疫療法主要依賴于誘導(dǎo)1型免疫，盡管在臨床上取得了革命性突破，卻仍然面臨響應(yīng)率低和復(fù)發(fā)率高的挑戰(zhàn)。近期Nature發(fā)表兩篇背靠背論文，指出增強(qiáng)2型免疫與1型免疫的協(xié)同將為長效抗腫瘤帶來新曙光。
其中題為“The type 2 cytokine Fc–IL-4 revitalizes exhausted CD8+ T cells against cancer”的論文，聚焦于臨床前機(jī)理研究，發(fā)現(xiàn)2型免疫竟然能夠喚醒抗腫瘤的“沉睡戰(zhàn)士”——終末耗竭CD8+ T細(xì)胞（TTE），使其重新煥發(fā)強(qiáng)大的抗腫瘤活力。
研究結(jié)果
作者首先制備了小鼠IL-4（一種典型的2型免疫細(xì)胞因子）與突變的IgG2a Fc融合的重組蛋白（Fc-IL-4），其生物活性與IL-4相當(dāng)，同時(shí)半衰期大大延長。
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在黑色素瘤YUMM1.7-OVA模型中，聯(lián)合OT1細(xì)胞療法實(shí)現(xiàn)100%腫瘤清除；
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結(jié)腸癌MC38-HER2模型中聯(lián)合HER2-CAR-T細(xì)胞療法實(shí)現(xiàn)86%腫瘤清除；
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MC38模型中聯(lián)合PD-1加CTLA-4的ICB治療實(shí)現(xiàn)100%腫瘤清除；
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人源Fc–IL-4聯(lián)合CD19-CAR-T細(xì)胞療法，在Raji人淋巴瘤的NSG小鼠模型中實(shí)現(xiàn)了75%的腫瘤清除。
圖1 Fc-IL-4在結(jié)腸癌MC38小鼠模型中增強(qiáng)ICB療法的功效并提供持久保護(hù)。從上至下依次為實(shí)驗(yàn)時(shí)間表、平均腫瘤生長曲線、Kaplan-Meier生存曲線，以及初次和二次接種腫瘤后的生存曲線。
圖2 體內(nèi)選擇性清除免疫細(xì)胞揭示Fc-IL-4對抗腫瘤活性的增強(qiáng)依賴于CD8+細(xì)胞。
圖3 敲除LDHA之后的OT1細(xì)胞療法不受Fc-IL-4增強(qiáng)。
研究方法亮點(diǎn)
除了突破性的結(jié)論，這項(xiàng)研究還在實(shí)驗(yàn)中大量地使用了小鼠模型和功能級抗體，獲得了翔實(shí)的臨床前研究數(shù)據(jù)。文章一共使用了10種來自Bio X Cell的高品質(zhì)功能級抗體，覆蓋四大類應(yīng)用，貫穿研究的各個(gè)階段，為研究人員提供了可靠而高效的工具：
阻斷Blocking
論文首次投遞Nature的稿件中只檢查了Fc-IL-4聯(lián)合ACT療法的效果，有審稿人提出測試聯(lián)合ICB的效果，作者使用PD-1抗體（RMP1-14，#BE0146）和CTLA-4抗體（9H10，#BE0131）在結(jié)腸癌小鼠模型中體內(nèi)阻斷，證實(shí)Fc-IL-4對ICB同樣具有抗腫瘤增強(qiáng)效應(yīng)（上圖1）。
清除Depletion
為了探究Fc-IL-4作用的具體細(xì)胞類型，作者分別使用Bio X Cell的anti-CD8（YTS 169.4，#BE0117）、anti-CD4（YTS 177，#BE0003-3）、anti-NK1.1（PK136，#BP0036）和anti-Ly6G/Ly6C（NIMP-R14，#BE0320）抗體在小鼠體內(nèi)清除不同免疫細(xì)胞，并以IgG抗體（LTF-2，#BP0090）作為對照，發(fā)現(xiàn)只有清除CD8+ T細(xì)胞完全消除Fc-IL-4對ACT的增強(qiáng)作用（上圖2）。
中和Neutralization
第一輪審稿意見的另一個(gè)問題是，既然Fc-IL-4能夠增強(qiáng)抗腫瘤，那么內(nèi)源IL-4在腫瘤免疫中有什么功能？為了回答這個(gè)問題，作者用IL-4抗體（11B11，#BE0045）在小鼠體內(nèi)中和內(nèi)源IL-4，觀察到對療效基本沒有影響，可能的原因是治療用的Fc-IL-4濃度高達(dá)內(nèi)源IL-4的103-106倍。
激活/刺激Activation/Stimulation
CD3和CD28的抗體組合是體外激活T細(xì)胞的常用方案，這篇論文在構(gòu)建HER2-CAR-T細(xì)胞和基因編輯T細(xì)胞時(shí)多次使用CD3抗體（17A2，#BE0002）加CD28抗體（PV-1，#BE0015-5）的方案來激活T細(xì)胞（比如上圖3）。同樣的CD3抗體還被用于離體誘導(dǎo)TTE，為深入的分子機(jī)制研究提供了關(guān)鍵的分析對象。
下表是這篇論文使用的Bio X Cell抗體匯總。
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參考文獻(xiàn)
Feng, B., Bai, Z., Zhou, X., Zhao, Y., Xie, Y., Huang, X., Liu, Y., Enbar, T., Li, R., Wang, Y., et al. (2024). The type 2 cytokine Fc–IL-4 revitalizes exhausted CD8+ T cells against cancer. Nature 634, 712-720. 10.1038/s41586-024-07962-4.