在免疫組化檢測(cè)過(guò)程中，許多樣本組織會(huì)產(chǎn)生可通過(guò)各種波長(zhǎng)濾光片的組織內(nèi)源性自發(fā)熒光，干擾抗體標(biāo)記的目的蛋白熒光的觀察，甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。為了解決免疫組化實(shí)驗(yàn)中的自發(fā)熒光，VectorLabs公司專門(mén)開(kāi)發(fā)了一款Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit試劑盒，該產(chǎn)品旨在去除組織切片中由于醛固定、紅細(xì)胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結(jié)構(gòu)造成的自發(fā)熒光。該試劑使用方便，無(wú)需稀釋操作，為即用型試劑。 該試劑盒中含有防自發(fā)熒光效果excellent的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑（含或不含DAPI兩種）?？蛻魺o(wú)需單獨(dú)購(gòu)買封片劑，經(jīng)濟(jì)、實(shí)用。
注意：該試劑盒對(duì)脂褐素造成的組織自發(fā)熒光無(wú)效。
● 試劑盒組成：
a. Vector®TrueVIEW™ Reagent A 5ml b. Vector®TrueVIEW™ Reagent B 5ml c. Vector®TrueVIEW™ Reagent C 5ml d. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 2ml e. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media with DAPI 2ml
其中，貨號(hào)SP-8400包含a,b,c,d四個(gè)組分；貨號(hào)SP-8500包含a,b,c,e四個(gè)組分
● 產(chǎn)品使用方法：
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將ReagentA、B、C以1:1:1的比例混合。（注意混合順序，先將A和B以1:1比例混合10s，再加入C,混勻10s） |  |
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將混好后的TrueView試劑滴加到組織樣本切片上，將樣本完全覆蓋，孵育2-5min |  |
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使用PBS緩沖液洗片5次，除去多余緩沖液，VECTASHIELD Vibrance Media封片后觀察 |  |
● 產(chǎn)品特征
A 顯著降低背景染色并保留特異性抗原染色； B 提高信噪比； C 產(chǎn)品穩(wěn)定，儲(chǔ)存在滴瓶中，使用方便； D 操作簡(jiǎn)單，快速；整個(gè)染色過(guò)程僅需2-5min； E 為使用者提供清晰、明確、真實(shí)的染色結(jié)果； F 適用于多種熒光染料的自發(fā)熒光去除，包括Alexa488，Alexa 594，DyLight 488，DyLight 594，F(xiàn)ITC，Cyanine 5和GFP；
G SP-8500試劑盒中的封片劑中DAPI濃度較高，可對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行清晰的染色。
● 產(chǎn)品對(duì)自發(fā)熒光淬滅效果:
| ◆ 右圖為經(jīng)Vector®TrueVIEW™kit處理后，人腎臟組織切片中自發(fā)熒光淬滅的百分比與處理時(shí)間之間的關(guān)系。 ◆ Note：2分鐘內(nèi)即可達(dá)到最大淬滅效果。 |  |
● 產(chǎn)品應(yīng)用舉例：
＞ 案例一
| 未經(jīng)任何處理 | 使用Vector®TrueVIEW™處理 |
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| ◆ 上圖為人脾臟組織染色結(jié)果：使用VectaFluor TM Duet試劑盒（DK-8818）檢測(cè)的mouse anti-CD20（red）和rabbit anti-Ki67（green）對(duì)人脾組織切片的染色。 ◆ 左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果， ◆ 右圖為使用TrueVIEW™Autofluorescence Quenching試劑盒染色結(jié)果。于未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比，經(jīng)TrueVIEW™Autofluorescence Quenching試劑盒處理后，自發(fā)熒光顯著減少。 | |
＞ 案例二
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◆ A-D圖為人腎臟切片（石蠟切片）染色結(jié)果，實(shí)驗(yàn)中使用anti-AE1 /AE3抗體對(duì)角蛋白進(jìn)行染色（綠色）。◆ A圖未經(jīng)處理， ◆ B-D圖經(jīng)TrueVIEW™Quencher Kit處理。自發(fā)熒光明顯減弱。延長(zhǎng)曝光時(shí)間，陽(yáng)性信號(hào)強(qiáng)度也隨之增強(qiáng)。 | |
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＞ 案例三
| 未經(jīng)任何處理 | 使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI處理 |
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| ◆ 上圖為人胰腺組織染色結(jié)果：綠色為insulin的染色。 ◆ 左圖為未經(jīng)任何處理的染色結(jié)果， ◆ 右圖為使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI（SP-8500）試劑盒染色結(jié)果。與未經(jīng)處理的染色結(jié)果相比，經(jīng)該試劑盒處理后，自發(fā)熒光顯著減少，核染色顯著增強(qiáng)。 |
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＞ 案例四
| 未經(jīng)處理（內(nèi)源性自發(fā)熒光） | 經(jīng)TrueVIEW™Quencher Kit處理 |
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| Company A | Company B | Company C |
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| Copper Sulfate Solution | Sodium Borohydride | Sudan Black B |
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● 產(chǎn)品訂購(gòu)信息 Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit
| 產(chǎn)品 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 染色切片數(shù) |
| Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit |
SP-8400 | 15ml | 100-150 |
| Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit |
SP-8500 | 15ml | 100-150 |
| VECTOR TrueVIEW Autofluorescence Quenching Kit (3ml) |
SP-8403 | 3ml | ~30 |
| VECTASHIELD® HardSet™ Antifade Mounting Medium |
H-1400 | 10ml | 100-150 |
| VECTASHIELD® HardSet™ with DPI Antifade Mounting Medium |
H-1500 | 10ml | 100-150 |
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