動物模型的前序檢測--中和抗體檢測

中和抗體（nAb）可以通過多種機制介導抗病毒功能，包括中和作用和抗體效應功能，可用于指導病毒疫苗設計，或作為抗病毒藥物用于預防和治療病毒性疾病中。中和抗體檢測可快速檢測樣本（24h即可出結果），并適用于高通量的檢測方式，可快速了解候選化合物的有效性。單純皰疹病毒（herpes simplex virus，HSV，圖1）是皰疹病毒的典型代表，由于感染急性期發生水皰性皮炎即單純皰疹而得名。一般認為HSV病毒通過附著（attachment）和融合（fusion）兩個步驟完成入侵細胞，這一過程涉及多種宿主細胞表面受體和病毒包膜蛋白相互作用。

圖1. HSV病毒結構示意圖

 迪福潤絲生物自有的CRO服務平臺「DIFF+」可針對HSV疫苗及藥物進行評價，提供基于細胞病變效應法（Cytopathic Effect, CPE）的HSV中和抗體檢測服務（圖2）。

圖2. HSV中和抗體檢測流程圖

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單純皰疹疫苗動物模型

一般而言，通過中和抗體檢測篩選出中和效果理想的候選物后，可以利用動物模型進行進一步的評價，利用合適的實驗動物來評估急性或持續性感染的情況。研究HSV的常用模型有近交小鼠模型、大鼠模型和豚鼠模型，小鼠模型的主要優點是可利用多種試劑來研究免疫和分子生物學反應；生殖器棉鼠模型服用甲羥孕酮后四天，可在陰道中感染HSV-1和HSV-2，目前該模型正用于評估臨床試驗中使用的gD疫苗；備受關注的還有HSV-2生殖器豚鼠模型，主要優點是受感染的動物會發展出易于量化的急性自限性疾病，有很容易發現的自發性復發。

具體來說，使用豚鼠模型來進行HSV疫苗評價時，研究人員通常關注以下幾方面：

1. 急性期感染的癥狀：豚鼠在感染HSV后會表現出類似于人類的局部皮膚或黏膜損傷，這可以幫助評估疫苗對初次感染的預防效果。

2. 復發性病變：HSV在人體中可以進入潛伏期，并在特定條件下復發。豚鼠模型也會出現類似的復發現象，通過研究復發頻率和嚴重程度，可以評估疫苗對抑制病毒復發的作用。

3. 免疫反應：豚鼠模型能夠產生人類相似的體液免疫和細胞免疫反應，這有助于評估疫苗誘導的免疫保護機制。

4. 病毒載量和排毒：研究人員可以通過檢測豚鼠體內的病毒載量和病毒從黏膜中的排毒量，來評估疫苗對病毒復制的抑制作用。

HSV豚鼠模型是當前有效的研究工具，用于測試HSV疫苗的保護效果和免疫機制，并幫助研究人員改進疫苗設計。

HSV-2豚鼠模型服務

迪福潤絲生物采用豚鼠進行HSV-2動物攻毒可產生明顯的體重變化（圖3）與病變（圖4），根據實際癥狀，設置了相應的評分標準，具體的案例模型評分如下（圖5）：

· 1分：生殖器紅腫并產生皰疹，

· 2分：多個皰疹融合成片，

· 3分：皰疹潰爛流膿，

· 4分：皰疹潰爛流膿發黑+大小便失禁，

· 5分：皰疹潰爛流膿發黑+大小便失禁+四肢無力或癱瘓，

圖3. HSV-2豚鼠攻毒體重變化（不同劑量攻毒）

圖4. HSV-2豚鼠攻毒實際癥狀變化

圖5. HSV-2豚鼠攻毒模型案例評分

HSV-2豚鼠攻毒毒株信息