中和抗體檢測——RSV疫苗評價金標準
呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus，RSV）是一種包膜單股負鏈RNA病毒， RSV可以引起全年齡段人群的呼吸道感染，是世界范圍內引起5歲以下兒童急性下呼吸道感染（ALRTI）最常見的病毒病原，是造成嬰幼兒病毒性呼吸道感染住院的首要因素。
目前對于RSV的防治手段主要是疫苗及抗體藥物，中和抗體檢測是鑒定疫苗有效性的黃金標準，迪福潤絲生物采用的熒光斑點計數法（圖1）通過DIFF-GFP熒光報告病毒檢測標記病毒抗原的熒光抗體，可以識別早期感染和低水平的病毒復制，24小時即可得到結果，無需等待病毒大量復制引起明顯的細胞病變及合胞體影響。
圖1.熒光斑點計數法-RSV中和抗體檢測的實驗結果案例（左上角為熒光數值）
快速準確的熒光斑點計數法
迪福潤絲生物建立了完善的生物資源庫（Bio Database）,可提供豐富的RSV毒株進行更加準確可靠的疫苗評價。檢測用毒株包括RSV A和RSV B兩種亞型共8種毒株，其中兩株為臨床株RSV-B 9393及2444（圖2），有助于準確了解藥物及疫苗對自然感染的有效性。
圖2.迪福潤絲生物RSV臨床株進化樹
一天出結果！RSV中和抗體檢測服務流程
迪福潤絲生物自有的的CRO服務平臺「DIFF+」可針對RSV疫苗效果進行評價，提供基于熒光斑點計數法的RSV中和抗體檢測服務（圖3），該檢測方法能夠與傳統的PRNT檢測方法建立線性相關性，靈敏度高、檢測迅速（24h即可出結果），并且該實驗方法的特異性、重復性均能滿足中和實驗的要求，適用于高通量樣本的檢測。
圖3.RSV中和抗體檢測流程圖
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RSV中和抗體檢測服務案例
基于上文所示的檢測流程，通過DIFF-GFP熒光報告病毒，迪福潤絲生物可進行RSV疫苗中和抗體檢測及抗病毒藥物篩選等服務，24小時可快速得到實驗結果。將待測樣本與RSV病毒共孵育后加入待感染細胞，CC孔為細胞對照，不加病毒，VC孔為病毒對照，只加病毒，檢測結果如圖（圖4）所示。
圖4.RSV中和抗體檢測結果案例
根據熒光斑點計數儀的斑點計數結果，半中和滴度NT50使用GraphPad Prism軟件中的非線性回歸分析計算值（圖5）。
圖5.RSV中和抗體檢測樣本1-2中和濃度曲線圖
服務內容
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RSV真病毒血清中和抗體檢測服務 |
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樣本類型 |
血清、血漿或抗體樣本 |
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檢測方法 |
熒光斑點計數法 |
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質控標準 |
提供自研的陽性對照（單抗） |
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成果交付 |
檢測報告 |