中和抗體檢測——為狂犬病防控加保險

狂犬病毒（Rabies virus，RABV）是高度致命的病毒，主要通過咬傷、抓傷或接觸感染的動物唾液傳播給人類，且大多由犬只傳播。該病毒會攻擊中樞神經系統，引發嚴重的神經癥狀，導致急性腦脊髓炎。一旦發病，病死率接近100%，目前尚無有效治愈手段，但通過疫苗接種可以有效預防。

近些年，狂犬病在發展中國家，尤其是亞洲和非洲部分地區仍然嚴重。根據世界衛生組織（WHO）的數據，每年約有5.9萬人死于狂犬病，約95%的病例發生在亞洲和非洲，印度、中國、菲律賓等國家的流行情況尤為嚴重。許多國家已經通過推進寵物和流浪動物疫苗接種、提高暴露后預防性疫苗（PEP）覆蓋率來控制狂犬病，然而由于疫苗接種者自身免疫等因素的影響，任何疫苗都不能100%確保接種者體內產生足夠的保護性抗體，即疫苗接種≠100%有效保護，狂犬疫苗也是如此。即使全程規范接種疫苗，也可能由于自身免疫等個體差異原因仍有免疫失敗的風險，接種疫苗后免疫效果評價至關重要。

DIFF-狂犬假病毒中和抗體檢測方法

狂犬病病毒中和抗體檢測，具有早檢測、早知情、早保護的作用。通過狂犬病病毒中和抗體檢測可量化疫苗效果，判斷狂犬疫苗接種是否產生中和抗體，中和抗體的滴度是否能達到保護水平，將發病風險降至最低。

根據世界衛生組織（WHO）狂犬病專家咨詢委員會的信息，狂犬中和抗體水平等余或高于0.5IU/ml時，受種者才具備了有效的保護能力。當前的狂犬中和抗體檢測方法通常有小鼠中和實驗（MNT）、快速熒光灶抑制試驗（RFFIT）、熒光抗體病毒中和試驗（FAVN）等，然而除了對生物安全等級的要求較高外，還有許多其他差異（圖1）。

圖1. 當前的狂犬中和抗體檢測方法對比

迪福潤絲生物采用的狂犬假病毒中和抗體檢測方式通過熒光斑點計數法，只需簡單操作，無需染色，可通過假病毒的熒光特性定量檢測樣本中的中和抗體含量（圖2、圖3）。檢測結果與第三方檢測結果高度一致（圖4）。

圖2. DIFF假病毒狂犬中和抗體檢測案例

圖3. DIFF假病毒狂犬中和抗體檢測案例（中和曲線）

圖4. DIFF假病毒狂犬中和抗體檢測與第三方結果對比

服務與方法優勢

安全方便

DIFF狂犬假病毒是經過人工編輯后的病毒顆粒，而不是活狂犬病毒進行實驗可以顯著降低實驗的生物安全風險，無需尋求高生物安全等級實驗室。

結果直觀

假病毒表達GFP，陰陽性區分明顯；梯度稀釋抗體，無需估算感染面積。

數據可靠

DIFF狂犬假病毒作為復制型的假病毒，可以更真實模擬RABV感染，中和抗體檢測結果可完全對標國家標準。

關于DIFF-狂犬假病毒

DIFF-狂犬假病毒是迪福潤絲生物通過對病毒的定向改造，使得其可以表達狂犬病毒保護性抗原G蛋白，同時表達熒光報告基因eGFP（圖5）。經研究，DIFF-狂犬假病毒能夠感染細胞，還原真病毒感染細胞的過程，是一種用于代替狂犬病毒進行中和抗體檢測的優質模型，大大降低狂犬中和抗體檢測的生物安全風險。

圖5.DIFF-狂犬假病毒構造原理示意圖