中和抗體檢測——為狂犬病防控加保險
狂犬病毒(Rabies virus,RABV)是高度致命的病毒,主要通過咬傷、抓傷或接觸感染的動物唾液傳播給人類,且大多由犬只傳播。該病毒會攻擊中樞神經(jīng)系統(tǒng),引發(fā)嚴(yán)重的神經(jīng)癥狀,導(dǎo)致急性腦脊髓炎。一旦發(fā)病,病死率接近100%,目前尚無有效治愈手段,但通過疫苗接種可以有效預(yù)防。
近些年,狂犬病在發(fā)展中國家,尤其是亞洲和非洲部分地區(qū)仍然嚴(yán)重。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)的數(shù)據(jù),每年約有5.9萬人死于狂犬病,約95%的病例發(fā)生在亞洲和非洲,印度、中國、菲律賓等國家的流行情況尤為嚴(yán)重。許多國家已經(jīng)通過推進(jìn)寵物和流浪動物疫苗接種、提高暴露后預(yù)防性疫苗(PEP)覆蓋率來控制狂犬病,然而由于疫苗接種者自身免疫等因素的影響,任何疫苗都不能100%確保接種者體內(nèi)產(chǎn)生足夠的保護(hù)性抗體,即疫苗接種≠100%有效保護(hù),狂犬疫苗也是如此。即使全程規(guī)范接種疫苗,也可能由于自身免疫等個體差異原因仍有免疫失敗的風(fēng)險,接種疫苗后免疫效果評價至關(guān)重要。
DIFF-狂犬假病毒中和抗體檢測方法
狂犬病病毒中和抗體檢測,具有早檢測、早知情、早保護(hù)的作用。通過狂犬病病毒中和抗體檢測可量化疫苗效果,判斷狂犬疫苗接種是否產(chǎn)生中和抗體,中和抗體的滴度是否能達(dá)到保護(hù)水平,將發(fā)病風(fēng)險降至最低。
根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)狂犬病專家咨詢委員會的信息,狂犬中和抗體水平等余或高于0.5IU/ml時,受種者才具備了有效的保護(hù)能力。當(dāng)前的狂犬中和抗體檢測方法通常有小鼠中和實(shí)驗(yàn)(MNT)、快速熒光灶抑制試驗(yàn)(RFFIT)、熒光抗體病毒中和試驗(yàn)(FAVN)等,然而除了對生物安全等級的要求較高外,還有許多其他差異(圖1)。

圖1. 當(dāng)前的狂犬中和抗體檢測方法對比
迪福潤絲生物采用的狂犬假病毒中和抗體檢測方式通過熒光斑點(diǎn)計數(shù)法,只需簡單操作,無需染色,可通過假病毒的熒光特性定量檢測樣本中的中和抗體含量(圖2、圖3)。檢測結(jié)果與第三方檢測結(jié)果高度一致(圖4)。

圖2. DIFF假病毒狂犬中和抗體檢測案例

圖3. DIFF假病毒狂犬中和抗體檢測案例(中和曲線)


圖4. DIFF假病毒狂犬中和抗體檢測與第三方結(jié)果對比
服務(wù)與方法優(yōu)勢
安全方便
DIFF狂犬假病毒是經(jīng)過人工編輯后的病毒顆粒,而不是活狂犬病毒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)可以顯著降低實(shí)驗(yàn)的生物安全風(fēng)險,無需尋求高生物安全等級實(shí)驗(yàn)室。
結(jié)果直觀
假病毒表達(dá)GFP,陰陽性區(qū)分明顯;梯度稀釋抗體,無需估算感染面積。
數(shù)據(jù)可靠
DIFF狂犬假病毒作為復(fù)制型的假病毒,可以更真實(shí)模擬RABV感染,中和抗體檢測結(jié)果可完全對標(biāo)國家標(biāo)準(zhǔn)。
關(guān)于DIFF-狂犬假病毒
DIFF-狂犬假病毒是迪福潤絲生物通過對病毒的定向改造,使得其可以表達(dá)狂犬病毒保護(hù)性抗原G蛋白,同時表達(dá)熒光報告基因eGFP(圖5)。經(jīng)研究,DIFF-狂犬假病毒能夠感染細(xì)胞,還原真病毒感染細(xì)胞的過程,是一種用于代替狂犬病毒進(jìn)行中和抗體檢測的優(yōu)質(zhì)模型,大大降低狂犬中和抗體檢測的生物安全風(fēng)險。

圖5.DIFF-狂犬假病毒構(gòu)造原理示意圖
