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「DIFF+」NDV載體構建服務|標準化流程的高安全性載體 定制方案

作者:浙江迪福潤絲生物科技有限公司 暫無發布時間 (訪問量:10773)

NDV原理和用途

 

新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)屬于副粘病毒科Avulavirus屬,是一種負鏈包膜RNA病毒,其基因組包含N、P、M、F、HN和L六大基因以及非編碼調控序列(圖1)。具有良好的穩定性。作為RNA病毒,NDV與宿主細胞DNA重組的可能性十分有限。與其他病毒載體相比,NDV病毒載體由于宿主范圍的限制,具有良好的安全性,同時,除養殖場專業作業人員外,人群體內沒有預先存在的NDV抗體。

圖1 NDV病毒基因組示意圖

 

NDV載體的構建方法

 

NDV(新城疫病毒)載體的構建主要基于反向遺傳操作技術(Reverse Genetics),該技術是一種通過操作病毒遺傳物質(如cDNA克隆)重構活病毒,從而研究基因功能或開發新型疫苗的方法(圖2)。流程包括:①提取病毒RNA并逆轉錄為cDNA;②將cDNA插入特定載體(如質粒或痘苗病毒載體);③通過基因編輯(插入/缺失/突變外源基因)修飾基因組;④將修飾后的遺傳物質轉染宿主細胞,拯救重組病毒。

圖2.病毒反向遺傳操作技術

 

目前,臨床前早期研究已經報道了多種以NDV為載體攜載外源抗原基因所形成的重組病毒疫苗(表1&2)。

表1.抗人類病原體的NDV載體疫苗

表2.抗獸醫病原體的NDV載體疫苗

 

NDV載體作為疫苗載體在禽類和非禽類物種中具有高度安全性

在人用疫苗中的安全性:

低致病性由于人類正常細胞缺乏NDV復制所需酶,病毒無法有效增殖,所以NDV主要感染禽類,對人類致病性極低。

 

無基因組整合風險作為RNA病毒,NDV在宿主細胞質內復制,不與宿主DNA整合,避免基因突變風險。

 

缺乏預存免疫:因宿主范圍受限,人類普遍無NDV抗體,可避免免疫干擾導致的疫苗失效(對比腺病毒載體)。

在獸用疫苗中的安全性:

成熟的禽用疫苗基礎NDV弱毒疫苗(如La Sota株)廣泛用于家禽,安全性記錄明確。

 

跨物種安全性在哺乳動物(小鼠、豚鼠、貓、狗等)模型中,NDV載體誘導免疫應答的同時未報告顯著毒性。

 

關于DIFF NDV載體構建服務:

 

 

迪福潤絲NDV載體構建優勢

服務案例:迪福潤絲NDV溶瘤病毒候選株對成瘤小鼠腫瘤的抑制作用

圖3.以NDV為載體的改造溶瘤病毒候選株(NDV-OV1,NDV-OV2,NDV-OV3)給藥后,成瘤小鼠腫瘤體積變化。A:LLC成瘤小鼠;B:B16F10成瘤小鼠。

 

迪福潤絲載體構建類技術服務目錄:

 

參考文獻:

[1] 謝金文,沈旭,林初文,等.新城疫病毒載體的應用研究進展[J].中國人獸共患病學報,2013,29(09):919-923.

 

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[3] 王瑜,王真.基因工程疫苗在獸醫領域的應用[J].黑龍江畜牧醫,2023,(17):44-49.

 

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[5]Kim SH, Samal SK. Newcastle Disease Virus as a Vaccine Vector for Development of Human and Veterinary Vaccines. Viruses. 2016 Jul 4;8(7):183. 

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